實驗4、細(xì)菌的簡單染色和革蘭氏染色_第1頁
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實驗四細(xì)菌的簡單染色和

細(xì)菌的革蘭氏染色2/24/20241一、目的1、學(xué)習(xí)微生物涂片、染色的基本技術(shù)；2、掌握細(xì)菌的簡單染色和革蘭氏染色；3、了解革蘭氏染色法的原理及其在細(xì)菌分類鑒定中的重要性；4、鞏固顯微鏡油鏡的使用方法。2/24/20242二、基本原理

革蘭氏染色法是由丹麥醫(yī)生C.Gram于1884年發(fā)明，是細(xì)菌學(xué)中最重要的鑒別染色法。革蘭氏染色法的基本步驟是：先用初染劑結(jié)晶紫進(jìn)行染色，再用碘液媒染，然后用乙醇脫色，最后用復(fù)染劑復(fù)染。各種細(xì)菌經(jīng)革蘭氏染色法染色后，能區(qū)分成兩大類，一類最終染成紫色，稱革蘭氏陽性細(xì)菌（G＋），另一類被染成紅色，稱革蘭氏陰性細(xì)菌（G－）。2/24/20243革蘭氏染色陰性2/24/20244革蘭氏染色陽性

2/24/20245三、器材1、菌種大腸桿菌、四聯(lián)球菌

12～18h營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物；2、染色劑革蘭氏染色液3、儀器或其他用具光學(xué)顯微鏡、酒精燈、載玻片、香柏油、二甲苯、擦鏡紙、牙簽。2/24/20246四、操作步驟1、細(xì)菌的簡單染色用牙簽挑取少許牙垢涂片、固定、干燥染色1～2min水洗、干燥、鏡檢。2、細(xì)菌的革蘭氏染色在無菌操作下用接種環(huán)挑取少許細(xì)菌斜面培養(yǎng)物涂片、固定、干燥、初染1分鐘媒染1分鐘脫色20～30s復(fù)染1分鐘、水洗、干燥、鏡檢。2/24/202472/24/20248五、實驗報告1、繪圖示你自己牙垢的細(xì)菌形態(tài)圖；2、說明染色觀察各菌的形狀、顏色和革蘭氏染色反應(yīng)；3、思考題見實驗教材（老）P.30～31

第（1）、（4）和（6）題

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