膠體金法檢測牛奶成分

1食品中過敏原成分檢測方法第二部分:膠體金法檢測牛奶成分T/xxx的本部分規(guī)定了食品中過敏原牛奶成分的膠體金法。本部分適用于生產加工設備表面環(huán)境采樣以及清洗水中的牛奶殘留成分驗證，也可用于部分食品原料及終產品中過敏原牛奶成分的定性檢測。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1過敏原allergen能夠誘發(fā)機體產生過敏反應的抗原物質，又稱為致敏原、變態(tài)反應原。3.2食品過敏原foodallergen普通食品中正常存在的天然或人工添加物質，過敏體質人群食用后會誘發(fā)其過敏反應。4檢測原理本方法基于抗原抗體反應、膠體金標記技術及毛細管層析技術。試樣中的牛奶蛋白抗原在層析過程中與膠體金標記的特異性抗體結合。試劑條上檢測線和過載線的顏色深淺與樣品中牛奶蛋白的含量相關，可根據檢測線和過載線的顏色變化通過目視進行結果判定。5試劑與材料5.1牛奶膠體金試劑盒參見附錄A。5.2食品提取緩沖液參見附錄A。6儀器與設備6.1電子天平：感量0.1g。6.2研缽及粉碎裝置。6.3渦旋振蕩器。6.4微量可調單通道移液器:量程200μL~1000μL。7檢測方法27.1食品試樣的提取與測試7.1.1取2g研磨好的固體食品試樣(或2mL液體食品試樣)加到離心管中,每個樣品同時做兩份平行樣。7.1.2在每個離心管中加入20mL（對固體樣品）/18mL（對液體樣品）食品提取緩沖液。7.1.3蓋上蓋子，劇烈振蕩1min混勻。7.1.4離心管傾斜約45°,將試劑條浸入離心管中，確保試劑條圓形一端完全被液體浸沒。7.1.5當液體層析進入測試窗口時，取出試劑條并放置在水平桌面上，5min后目視讀取結果。7.2清洗水試樣的提取與測試7.2.1將一袋Type8提取液撕開，全部倒入樣品管內。7.2.2向樣品管中加入1mL清洗水樣品，蓋上蓋子，劇烈振蕩1min后，將混勻的液體倒?jié)M樣品管蓋。7.2.3將試劑條浸入管蓋內液體，確保試劑條圓形一端完全被液體浸沒。7.2.4當液體層析進入測試窗口時，取出試劑條并放置在水平桌面上，5min后目視讀取結果。7.3表面涂抹試樣的提取與測試7.3.1將一袋Type8提取液撕開，全部倒入樣品管內。7.3.2使用棉簽拭子涂抹10cm×10cm大小的環(huán)境表面。如果是干燥表面，涂抹前需將拭子用Type8提取液潤濕。7.3.3將拭子頭折斷放入樣品管內，蓋上蓋子，劇烈振蕩1min后，將混勻的液體倒?jié)M樣品管蓋。7.3.4將試劑條浸入管蓋內液體，確保試劑條圓形一端完全被液體浸沒。7.3.5當液體層析進入測試窗口時，取出試劑條并放置在水平桌面上，5min后目視讀取結果。8結果判讀8.1無效質控線不顯色,說明此試劑條無效，需重新檢測。8.2陰性質控線顯色,過載線顯色,檢測線不顯色，判為陰性。8.3陽性質控線顯色,過載線顯色,檢測線顯色，判為陽性。8.4強陽性質控線顯色,過載線不顯色,檢測線不顯色或輕微顯色，判為強陽性。（資料性）過敏原成分定性檢測試劑盒A.1牛奶膠體金試劑盒本標準使用的牛奶膠體金試劑盒為美國Neogen公司產品,試劑盒包括:a)10個膠體金試劑條；b)10袋Type8提取液;c)10個樣品管（含蓋）;d)10個棉簽拭子。A.2食品提取緩沖液本標準使用的Reveal