尿液自動化分析5課件

第七節(jié)

尿液分析儀檢驗檢驗醫(yī)學(xué)教研室2自動尿液分析系統(tǒng)尿液干化學(xué)分析儀尿沉渣分析儀

計算機(jī)聯(lián)控分析報告3尿液檢驗流程4尿液自動化分析5第一節(jié)

尿液干化學(xué)分析儀目前臨床廣泛使用尿干化學(xué)分析系統(tǒng)，將檢測尿液各種成分的試劑附著在紙〔或膠片〕上做成試紙〔或干片〕，采用反射光原理檢測試劑顏色變化。具有操作簡便、效率高，100-360份樣本/h作為尿液的過篩檢查。6尿液干化學(xué)分析的開展1956年：美國人Ames和Lilly創(chuàng)造了尿糖干化學(xué)試帶1957年：利用“蛋白質(zhì)誤差〞的原理推出尿蛋白檢測試帶，1958年：推出尿糖、尿蛋白二聯(lián)試帶1959年：推出尿糖、尿蛋白、尿pH三聯(lián)試帶20世紀(jì)70年代：第一臺干化學(xué)分析儀問世——現(xiàn)代尿液分析自動化的標(biāo)志試帶逐步開展到多項，八聯(lián)、十聯(lián)、十一聯(lián)、十二聯(lián)從目測開展到自動化儀器檢測，由半自動化到全自動化國產(chǎn)試劑代替進(jìn)口試劑。7一、尿干化學(xué)分析儀分類按自動化程度分1.半自動尿液分析儀：2.全自動尿液分析儀：按檢測工程分8項：pH、PRO、GLU、KET、BIL、URO、BLD、NIT10項：8項+LEU、SG11項：10項+VitC12項：10項+顏色、透明度8各種尿干化學(xué)分析儀9尿干化學(xué)試帶種類單項試紙：PRO、GLU、BLD、BIL等多聯(lián)試紙：3A、8A、10A、11A、12A等。10二、尿干化學(xué)分析儀與試帶的根本結(jié)構(gòu)11二、干化學(xué)尿液分析儀的原理和特點(diǎn)

12尿液自動分析儀結(jié)構(gòu)圖CPU13(二)試帶的結(jié)構(gòu)塑料基質(zhì)載體吸水層試劑層2〔碘酸鹽層〕尼龍保護(hù)膜透明膜試劑層1試帶的多層膜結(jié)構(gòu)14

尿試帶的多層膜結(jié)構(gòu)〔1〕過濾層：尼龍膜，起保護(hù)作用，防止大分子物質(zhì)對反響的影響〔2〕反響層：絨制品，包括過碘酸鹽區(qū)〔有的無此區(qū)〕和試劑區(qū)，過碘酸鹽區(qū)可破壞VitC的干擾；試劑區(qū)含有試劑成分主要與所測物質(zhì)發(fā)生反響，產(chǎn)生顏色反響〔3〕吸水區(qū)：可使尿液均勻快速深入，并能抑制尿液流到相鄰反響區(qū)。〔4〕支持層：不被尿液浸潤的塑料片做支持層。空白塊：用于消除尿自身顏色在試劑塊上產(chǎn)生顏色的干擾。15三、尿干化學(xué)分析儀原理與試帶反響原理〔一〕檢測原理試帶上試劑塊分別與尿中相應(yīng)的成分發(fā)生化學(xué)反響并呈現(xiàn)不同的顏色，顏色深淺與尿液中相應(yīng)成分含量成正比?？瞻卓熳鳛椤把a(bǔ)償區(qū)〞。試帶上的模塊被雙波長〔參考波長720nm、測定波長620nm/550nm〕光照射，色塊顏色越深，吸收光亮越大，反射光亮越小，反射反射率越小色塊顏色越淺，吸收光亮越小，反射光亮越大，反射反射率越大檢測試塊反射率、空白反射率、總反射率計算R試劑=Tm/TsR空白=Cm/CsR總=Tm×Cs/(Ts×Cm〕R:反射率；T:試塊;C:空白塊；m:測量波長反射強(qiáng)度；s:參考波長反射強(qiáng)度16〔二〕尿試紙法的工程和反響原理17(二)試帶使用本卷須知1.

嚴(yán)格按操作說明書要求進(jìn)行操作；2.

試帶要在有效期內(nèi)使用；3.

試帶從冷藏變成室溫前不要翻開瓶蓋，用后蓋緊瓶蓋；開過蓋的試帶瓶不建議放在冷藏溫度，可放陰涼、枯燥、避光處。4.禁止用手觸摸試劑區(qū)，5.

不同廠家的同類試紙，其原理、方法、結(jié)果不相同，不可混用。18尿干化學(xué)方法學(xué)評價優(yōu)點(diǎn)：具有操作簡便、檢測快速、同時獲得多項結(jié)果缺點(diǎn)：影響因素多，必須結(jié)合尿理學(xué)檢查、顯微鏡檢查，互相驗證、綜合分析目前國內(nèi)采用方法：干化學(xué)法LEU、BLD、PRO、NIT四項皆〔-〕，可不鏡檢。其中任一項出現(xiàn)異常時，那么必須鏡檢。本卷須知：①以尿沉渣作為診斷依據(jù)或觀察療效時，不宜用干化學(xué)過篩②尿外觀與尿沉渣有關(guān)，當(dāng)尿外觀異常時，應(yīng)注意鏡檢③干化學(xué)干擾因素多，且有一定的假〔-〕，因此無論干化學(xué)結(jié)果如何，必要時需做鏡檢④有泌尿系統(tǒng)疾病，不宜用干化學(xué)過篩，應(yīng)全部進(jìn)行鏡檢。19(三)試紙分析的假陽性和假陰性1.尿中含高濃度VC,可使試紙法葡萄糖和隱血結(jié)果呈假(一);2.尿蛋白試紙是利用PH指示劑的蛋白質(zhì)誤差原理,白蛋白的反響性最強(qiáng),球蛋白的反響性弱,一些高分子化學(xué)物(如聚乙烯吡咯酮)可產(chǎn)生假(+);3.

某些藥物〔如氯丙嗪、酚噻嗪、吩嗪類藥物〕可使尿BIL、URO等呈假〔+〕；4.

尿PH超過8.0以上，PRO呈假(+)；20尿試紙法產(chǎn)生假〔+〕、假〔-〕的常見原因項目假（+）假（-）pH尿液久置，使結(jié)果升高浸入尿中時間過長，使結(jié)果偏低SG高蛋白質(zhì)、酸性尿使結(jié)果偏高堿性尿使結(jié)果偏低PRO尿pH＞8.0、氯乙烯、磷酸鹽、季胺類消毒劑大量青霉素尿、慶大霉素尿、pH＜8.0GLU強(qiáng)氧化劑次氯酸鈉、過氧化物VitC＞500mg/LKET肌酐、酞、苯丙酸試劑帶潮解、標(biāo)本防止時間過長BIL大量氯丙嗪、鹽酸苯偶氮吡啶VitC＞500mg/L、亞硝酸鹽、光照URO膽色素原、吲哚、吩噻嗪類、VitK亞硝酸鹽、光照BLDMb、菌尿、氧化劑、不耐熱的觸酶PRO、GLU、VitC＞100mg/LNIT陳舊尿、亞硝酸鹽及偶氮劑污染、含硝酸鹽豐富的食物VitC、尿量過多、食物含硝酸鹽過低、尿于膀胱中儲存＜4h，不含硝酸鹽還原酶的細(xì)菌感染LEU甲醛、氧化劑、高濃度BILPRO、GLU、VitC、大量慶大霉素、呋喃妥因VitC硫代硫酸鈉、內(nèi)源性酚堿性尿21三、

干化學(xué)分析儀的局限性

1.

試劑條的因素2.

尿本身的因素：如標(biāo)本采集不不合格等3.

操作原因：如儀器的校準(zhǔn)、維護(hù)、環(huán)境溫度。4.

皆為定性分析，只能做過篩試驗。其次是不能檢測尿有形成分，因而不能代替尿沉渣檢查。22第二節(jié)

尿沉渣分析儀

尿沉渣分析儀是用顯微鏡或?qū)Ｓ迷O(shè)備對尿液有形成分檢查的儀器，擺脫了繁瑣和費(fèi)時的操作程序，做到尿沉渣分析的標(biāo)準(zhǔn)化、自動化。目前使用的尿沉渣分析儀，主要有：圖像識別法、流式細(xì)胞儀法，以及尿液分析工作站等幾種類型。23〔一〕流式細(xì)胞式尿沉渣分析儀24流式細(xì)胞式尿沉渣分析儀原理激光束(

=488m)熒光強(qiáng)度fl：前向散射光強(qiáng)度：細(xì)胞大小RND、DNA強(qiáng)度前向散射光脈沖寬度：細(xì)胞長度熒光脈沖寬度(F1w)：細(xì)胞染色質(zhì)長度電阻抗：反映細(xì)胞體積25流式細(xì)胞式尿沉渣分析儀原理前向散射光強(qiáng)度(Fsc)：細(xì)胞大小

前向散射光脈沖寬度(Fscw)：細(xì)胞長度熒光信號

熒光強(qiáng)度(Fl)：細(xì)胞染色質(zhì)(DNA/RNA)的強(qiáng)度熒光脈沖寬度(Flw)：細(xì)胞染色質(zhì)長度電阻抗：反映細(xì)胞體積前向散射光信號26儀器將這種熒光，散射光和電阻抗的信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?，綜合分析這些電信號，得出細(xì)胞大小、長度、染色強(qiáng)度和染色局部長度以及細(xì)胞的體積資料，并給出每類細(xì)胞的散射圖和直方圖，并計算出每微升尿中各種細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行報告。27SYSMEXUF-100尿沉渣分析儀28UF-100尿沉渣分析系統(tǒng)原理29UF-100尿沉渣分析系統(tǒng)散點(diǎn)圖30UF-100尿沉渣分析系統(tǒng)散點(diǎn)圖31需采集尿液標(biāo)本約9ml最少需尿標(biāo)本4ml，實(shí)際吸樣量0.8ml，檢測尿標(biāo)本量9μl,相當(dāng)于顯微鏡檢測尿沉渣50個高倍視野，每小時檢測100個樣本，檢測總粒子數(shù)0-40000個。32紅細(xì)胞(RBC)均一性紅細(xì)胞〔IsomorphicRBC〕%非均一性紅細(xì)胞〔DysmorphicRBC〕%非溶血性紅細(xì)胞數(shù)量〔Non-LysedRBC#〕非溶血性紅細(xì)胞百分比〔Non-LysedRBC%〕白細(xì)胞〔WBC〕上皮細(xì)胞〔EC〕、小圓上皮〔SRC〕管型〔CAST〕,病理管型〔Path.CAST〕細(xì)菌〔BACT〕酵母細(xì)胞〔YLC〕精子細(xì)胞〔SPERM〕結(jié)晶〔X’TAL〕尿液電導(dǎo)率〔conductivity〕33尿沉渣分析儀檢測參數(shù)—參考范圍RBC：男性0~10/μL；女性0~24/μLWBC：男性0~10/μL；女性0~26/μLEC：0~15/μLCAST：0~2/μLBACT：0~8000/μLConductivity：

13~25ms/cmUF-100尿沉渣分析儀檢測窗口治療前后散點(diǎn)圖比照36病例張某，男，39歲，急性腎小球腎炎。圖示該患者尿液標(biāo)本UF-100分析儀測試結(jié)果。尿干化學(xué)分析結(jié)果：

SG：1.025KET：negNIT：neg

LEU：25/μlBIL：negGLU：norm

PRO：5.0g/LpH：7.0UBG：normERY：250/μl鏡檢結(jié)果：

WBC：5-10/HPRBC：滿視野/HPEC：0-2/HP

尿蛋白定量：2.20g/24h尿沉渣分析儀結(jié)果：紅細(xì)胞位于散射圖的左下方,非均一性紅細(xì)胞占99.7%;經(jīng)相差顯微鏡檢查證實(shí)為多形性紅細(xì)胞急性腎小球腎炎38方法學(xué)評價1.優(yōu)點(diǎn)：①不需離心尿液，可自動進(jìn)樣；②所需標(biāo)本量少；③檢測速度快，效率高，可報告多項參數(shù)；④檢測過程計數(shù)的粒子數(shù)0～40000，提高了準(zhǔn)確性；⑤操作程序同一，易于標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量控制。2.局限性:①對尿液中的某些成分不能準(zhǔn)確識別，仍需顯微鏡進(jìn)行分類和確認(rèn)。②應(yīng)用時間短，普及面窄，臨床實(shí)際應(yīng)用經(jīng)驗欠缺；③尚未建立公認(rèn)的參考范圍；39〔二〕圖像識別尿沉渣分析儀40圖像識別尿沉渣分析儀41AVE-763尿沉渣智能分析儀

42自動進(jìn)樣系統(tǒng)43尿沉渣定量計數(shù)池44操作界面45圖像識別尿沉渣分析儀—方法學(xué)評價國內(nèi)進(jìn)入較晚，尚未普及，應(yīng)用經(jīng)驗少，試劑應(yīng)用效果尚待進(jìn)一步探討。①使用光學(xué)流動計數(shù)池，體積準(zhǔn)確恒定，視野清晰，由于是密閉的管道，標(biāo)本不污染工作環(huán)境，平安性好。②由于尿液有形成分復(fù)雜，且易發(fā)生變形，有時圖像識別軟件難以識別。③不能識別的成分如何處理，是否刪除處理。如細(xì)胞管型、細(xì)胞重疊、模糊的圖像和碎片等④其誤差如何評估，如何去除干擾⑤如何合理的組合尿干化學(xué)與影像學(xué)的結(jié)果4