氧氟沙星氯化鈉注射液工藝

氧氟沙星氯化鈉注射液工藝-標(biāo)）隹化文件發(fā)布號(hào)：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液工藝驗(yàn)證摘要：為驗(yàn)證鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液的制備工藝，在制備過程中對(duì)左氧氟沙星、氯化鈉、EDTA-2Na、藥用炭［1］的用量及配制時(shí)間、滅菌溫度等可能會(huì)影響到成品質(zhì)量的因素進(jìn)行嚴(yán)格控制，從而對(duì)鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液的工藝進(jìn)行再驗(yàn)證。結(jié)果：按照處方工藝配制鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液，通過檢測(cè)其性狀為淡黃綠色澄明液體；pH在4.6-4.7范圍之內(nèi)；裝量在100-102mL(111.66g-113.67g)范圍內(nèi)；內(nèi)毒素＜0.6EU/mg；氯化鈉的平均含量為101.50%，相對(duì)偏差為0小于2010年版藥典規(guī)定的3%。左氧氟沙星的平均含量為99.40%；相對(duì)偏差為0.2%小于2010年版藥典規(guī)定的1.5%；澄明度檢查無白點(diǎn)、白塊、纖維、色點(diǎn)、塑膠屑等不合格品。以上結(jié)果表明，按照處方工藝進(jìn)行生產(chǎn)，生產(chǎn)出的鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液各項(xiàng)指標(biāo)均符合國(guó)家藥典標(biāo)準(zhǔn)，證實(shí)該系統(tǒng)能持續(xù)穩(wěn)定地生產(chǎn)出符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和預(yù)定用途的鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液。關(guān)鍵詞：鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液；制備；性狀；pH；裝量；內(nèi)毒素；含量；澄明度Levofloxacinhydrochlorideandsodiumchlorideinjectionprocess

revalidationLIFAN-fan(Class1ofPharmaceuticPreparation,Graduatedin2015)Abstractobjective:levofloxacinhydrochlorideandsodiumchlorideinjectionprocessinthepreparationofcentre-leftofloxacin,sodiumchloride,EDTA-2na,thedosageofthemedicinalcharcoalandpreparationtime,sterilizationtemperaturewillaffectthequalityofproducts,throughstrictcontroloftheprocessoflevofloxacinhydrochlorideandsodiumchlorideinjectionprocessforrevalidation.Methods:accordingtotheprescriptioncraftcompoundlevofloxacinhydrochlorideandsodiumchlorideinjection,goodcontrolduringtheprocessofpreparationmaybealltheexternalfactorsaffectthefinishedproduct.Results:accordingtotheprescriptioncrafttoproducethelevofloxacinhydrochlorideandsodiumchlorideinjectionofvariousindexesmeetthenationalpharmacopoeiastandards.Conclusion:Carriedoutinaccordancewiththeprescriptioncraftproduction,confirmthesystemsteadyandcanproducemeetqualitystandardsandtheusageoflevofloxacinhydrochlorideandsodiumchlorideinjection.Keywords:levofloxacinhydrochlorideandsodiumchlorideinjection,preparation,test左氧氟沙星（LevofloxacinLVFX）是第三代喹諾酮類抗菌藥，是氧氟沙星的左旋體，其抗菌活性約為氧氟沙星的2倍，它的主要作用機(jī)制為抑制細(xì)菌DNA旋轉(zhuǎn)酶活性，抑制DNA復(fù)制。鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液由靜脈直接輸注入血液，作用迅速直接。用于敏感菌引起的：呼吸系統(tǒng)感染，包括急性支氣管炎、慢性支氣管炎急性發(fā)作、彌漫性支氣管炎、支氣管擴(kuò)張合并感染、肺炎、扁桃體炎（扁桃體周圍膿腫）；泌尿系統(tǒng)感染，包括腎盂腎炎、復(fù)雜性尿路感染等；生殖系統(tǒng)感染，包括急性前列腺炎、急性副睪炎、宮腔感染、子宮附件炎、盆腔炎（疑有厭氧菌感染時(shí)可合用甲硝唑）；皮膚軟組織感染，包括傳染性膿皰病、蜂窩組織炎、淋巴管（結(jié)炎）、皮下膿腫、肛膿腫等；腸道感染，包括細(xì)菌性痢疾、感染性腸炎、沙門菌屬腸炎、傷寒及副傷寒；敗血癥、粒細(xì)胞減少及免疫功能低下患者的各種感染。用藥期間可能出現(xiàn)惡心、嘔吐、腹部不適、腹瀉、食欲不振、腹痛、腹脹、失眠、頭暈、頭痛等癥狀；皮癥、搔癢、紅斑及注射部位發(fā)紅、發(fā)癢或靜脈炎等癥狀。亦可出現(xiàn)一過性肝功能異常，如血清轉(zhuǎn)氨酶增高、血清總膽紅素增加等。上述不良反應(yīng)發(fā)生率在0.1?5%之間。偶見血中尿素氮升高、倦怠、發(fā)熱、心悸、味覺異常等［2］。一般均能耐受，療程結(jié)束后癥狀可消失。為確保產(chǎn)品質(zhì)量，確認(rèn)該產(chǎn)品生產(chǎn)工藝具有可行性和可靠性。經(jīng)過產(chǎn)品工藝的驗(yàn)證，確認(rèn)大容量注射劑鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液在確定的環(huán)境、工藝和操作下，按照本品種的工藝規(guī)程進(jìn)行生產(chǎn)，能生產(chǎn)出符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品［3,4］；驗(yàn)證時(shí)應(yīng)對(duì)生產(chǎn)過程控制情況進(jìn)行逐一確認(rèn)，對(duì)生產(chǎn)產(chǎn)品進(jìn)行取樣、檢驗(yàn)，根據(jù)生產(chǎn)情況和檢驗(yàn)結(jié)果綜合評(píng)價(jià)。1材料與方法1.1試驗(yàn)地點(diǎn)、時(shí)間本試驗(yàn)于2015年1月至4月間在河南科倫藥業(yè)有限公司進(jìn)行。1.2主要儀器設(shè)備FE20型精密pH計(jì)（梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司）；UV-1750型紫外-可見分光光度計(jì)（島津國(guó)際貿(mào)易有限公司）；YB-2型澄明度檢測(cè)儀（長(zhǎng)沙楚天科技有限公司）；JJ1000型高精密電子天平（美國(guó)雙杰測(cè)試儀器廠）等。1.3主要試劑左氧氟沙星（上虞京新藥業(yè)有限公司，批號(hào)：DK20-1411133）；氯化鈉（中鹽宏博集團(tuán)云夢(mèng)云虹制藥股份有限公司，批號(hào)：20141218）；依地酸二鈉（湖南爾康制藥股份有限公司，批號(hào)：102320140901）；藥用炭（上?；钚蕴繌S，批號(hào)：1451286）；鱟試劑（靈敏度0.125EU/mL，廈門鱟試劑廠，批號(hào)：141225）；細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品（160EU/支，中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：201412），細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水（2mL/支，廈門鱟試劑廠，內(nèi)毒素含量＜0.01EU/mL，批號(hào)：141203）試管、膠管等玻璃器皿均按中國(guó)藥典2010年版除細(xì)菌內(nèi)毒素處理。鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液對(duì)照品由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供，上述試劑使用時(shí)都在有效期內(nèi)。1.4操作方法和過程鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液注冊(cè)處方：鹽酸左氧氟沙星2.32g（相當(dāng)左于氧氟沙星2g），氯化鈉9.00g，EDTA-2Na0.05g,藥用炭0.15g，NaOH適量，加注射用水至1000mL。鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液生產(chǎn)處方：鹽酸左氧氟沙星19.02（相當(dāng)于左氧氟沙星16.4g），氯化鈉73.8g，EDTA-2Na0.41g,藥用炭1.23g，NaOH適量，加注射用水至820萬mL。1.4.1濃配濃配罐內(nèi)加入總量20%-50%的注射用水（調(diào)節(jié)溫度40-60D，將稱量好的氯化鈉原料投入濃配罐內(nèi)，攪拌溶解。加入處方量2/3藥用炭，開啟蒸汽閥攪拌5min，加熱煮沸15min，關(guān)閉蒸汽閥，經(jīng)鈦棒粗濾轉(zhuǎn)移至稀配罐中。濃配藥液過濾完畢，加注射用水1200kg（分三次加入）對(duì)濃配灌進(jìn)行沖洗，將沖洗水全部泵入稀配灌中。1.4.2稀配接收濃配藥液及三次沖洗水的同時(shí)，向稀配灌加注射用水20%-50%，開始攪拌，加入稱量好的左氧氟沙星、EDTA-2Na、攪拌溶解，開啟稀配注射用水閥，向稀配灌內(nèi)加注射用水至全量，關(guān)閉注射用水閥，向稀配灌內(nèi)加處方量1/3藥用炭，開啟自循環(huán)閥門藥液泵開始攪拌15min。1.4.3灌裝、滅菌調(diào)節(jié)灌裝時(shí)間，對(duì)藥品進(jìn)行灌裝，采用高溫水浴滅菌法滅菌（115°CX30min），滅菌過程中各種參數(shù)的設(shè)置：蒸汽壓力0.3?0.5MPa；冷卻水壓力0.3?0.5MPa；壓縮空氣壓力0.5?0.8MPa，純化水壓力控制范圍0.15?0.3MPa。1.4.4大容量注射劑生產(chǎn)工藝大容量注射劑生產(chǎn)工藝流程圖（見圖1）。1.4.5對(duì)配制好的鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液進(jìn)行檢測(cè)⑴性狀：取本品適量采用目視觀察法檢測(cè)。⑵pH：用FE20型精密pH計(jì)測(cè)定藥液的pH［5］（供試品溫度25.1C，室內(nèi)溫度25C，室內(nèi)濕度54%）。⑶裝量：使用美國(guó)雙杰JJ1000型高精密電子天平（精確度為0.001g）測(cè)量裝量。（4） 內(nèi)毒素檢測(cè)：采用鱟試驗(yàn)法進(jìn)行檢測(cè)，取供試品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水稀釋成12:4:8的溶液，按中國(guó)藥典2010年版細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)［6,7］。（5） 含量檢測(cè)氯化鈉含量檢測(cè)：分別精密量取3份鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液10mL，加水40mL，2%的糊精溶液5mL、碳酸鈣0.1g與熒光黃指示液6滴，然后用硝酸銀滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液由黃綠色變?yōu)槲⒓t色，每1mL的硝酸銀滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于5.844mg的氯化鈉（室內(nèi)濕度54%，滴定液溫度為24C，標(biāo)定液溫度為21C），其中硝酸銀的濃度為1.003mol/L，記錄消耗滴定液的體積，計(jì)算鹽酸左氧氟沙星注射液中氯化鈉的含量。左氧氟沙星含量檢測(cè)：采用紫外分光光度法進(jìn)行檢測(cè)［8,9］，對(duì)照品溶液的制備（左氧氟沙星對(duì)照品來源為中國(guó)食品藥品檢定研究院）精密量取左氧氟沙星對(duì)照品25.13mL、25.18mL置50mL容量瓶中分別標(biāo)記為1、2，加0.03mol/L鹽酸溶液并稀釋至刻度，搖勻，制成每1mL中約含左氧氟沙星0.5g的溶液，作為對(duì)照品貯備液，精密量取對(duì)照品貯備液10mL，置100mL的容量瓶中，加0.1mol/L的鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，再精密量取10mL置100mL的容量瓶中，加0.1mol/L的鹽酸溶液稀釋至刻度，制成每1mL中約含左氧氟沙星5ug的溶液，搖勻、即得。供試品溶液的制備，精密量取本品 5mL，置100mL容量瓶中，加0.1mol/L的鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，再精密量取5mL，置100mL容量瓶中，加0.1mol/L的鹽酸溶液稀釋至刻度，制成每1mL中約含0.5ug的溶液，搖勻，即得供試品溶液濃度為0.5Rg/mL［10］。用UV-1750型紫外-可見分光光度計(jì)測(cè)定其吸光度［10,11］，計(jì)算鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液中左氧氟沙星的含量。2結(jié)果與分析2.1性狀目視觀察該藥液為黃綠色澄明液體。2.2pH值經(jīng)測(cè)量藥品的pH值在4.6-4.7之間。2.3裝量稱量結(jié)果最小重量為111.66g，最大重量為113.67g。計(jì)算裝量均在在100-102mL范圍之內(nèi)。2.4細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)內(nèi)毒素檢測(cè)采用鱟試驗(yàn)法進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果見表1。由表1可知測(cè)定結(jié)果呈陰性，藥液無變化，無渾濁絮狀，粘液狀反應(yīng)。結(jié)果表明，鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液經(jīng)細(xì)菌內(nèi)毒素檢查均合格。表1鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液鱟試驗(yàn)法檢測(cè)結(jié)果Table3levofloxacinhydrochlorideandsodiumchlorideinjectionmethodoflimulustestresults供試品Theproductbatch1234陰性對(duì)照Negativecontrol陽(yáng)性對(duì)照Positivecontrol1-----+2-----+3-----+2.5含量檢測(cè)2.4.1氯化鈉含量的檢測(cè)測(cè)定結(jié)果消耗硝酸銀滴定液的體積分別為 V1=15.58mL、V2=15.58mL、V3=15.58mL，測(cè)得氯化鈉含量的平均值為101.50%，相對(duì)偏差為0小于2010年版藥典規(guī)定的3%。2.4.2左氧氟沙星含量的檢測(cè)采用紫外分光光度法測(cè)定對(duì)照品及供試品的吸光度［12］，測(cè)定結(jié)果見表2。表2左氧氟沙星吸收值測(cè)定結(jié)果Table2levofloxacinabsorptionvaluedeterminationresults吸收值測(cè)/123平均（On定結(jié)果average)Absorption對(duì)照品1(Referencesubstance1)0.4500.4500.4490.449value對(duì)照品2(Referencesubstance2)0.4490.4500.4490.449determinati供試品1(1ofthetest)0.4580.4570.4580.458onresults供試品2(1ofthetest)0.4570.4570.4580.457根據(jù)含量%=A供*C對(duì)/Am*C供測(cè)得左氧氟沙星的含量分別為99.34%,99.76%,99.12%,99.54%平均值為99.40%相對(duì)偏差為0.2小于2010年版藥典規(guī)定的1.5%。2.6澄明度檢測(cè)按照可見異物檢查法進(jìn)行檢查無白點(diǎn)、白塊、纖維、色點(diǎn)、塑膠屑等。通過對(duì)鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液的形狀、pH、裝量、內(nèi)毒素、含量、性狀進(jìn)行檢測(cè)，其檢測(cè)結(jié)果均符合2010年版藥典規(guī)定，證實(shí)該藥品質(zhì)量可靠，安全可控，可用于工業(yè)化大生產(chǎn)。3討論在GMP生產(chǎn)條件下，成品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)能反映對(duì)注射劑的一般要求，本試驗(yàn)對(duì)產(chǎn)品的性狀、PH、裝量、內(nèi)毒素、含量及澄明度進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果均符合中國(guó)藥典2010年版。證明該生產(chǎn)工藝可行，質(zhì)量可控，可用于工業(yè)化大生產(chǎn)[13]。鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液配制過程實(shí)質(zhì)是通過對(duì)帶菌、帶熱原、帶雜質(zhì)顏色的原輔料進(jìn)行溶解、升溫、吸附、過濾、調(diào)節(jié)、混合處理后，達(dá)到降低微生物負(fù)荷、去除熱原、調(diào)節(jié)物理參數(shù)(濃度和pH值等)、去除有色雜質(zhì)等的過程。其中濃配開始到稀配結(jié)束時(shí)間間隔＜4h，稀配結(jié)束到灌裝結(jié)束時(shí)間間隔＜10h，灌裝開始到滅菌開始時(shí)間間隔＜5h，控制工藝時(shí)限的目的是要求在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成配制作業(yè)，防止有菌藥液低溫存放時(shí)間過長(zhǎng)微生物過量繁殖、熱原物質(zhì)增長(zhǎng)。滅菌過程中蒸汽壓力和流量對(duì)滅菌升降溫過程有重要影響，冷卻水壓力和流量對(duì)冷卻速度有重影響，壓縮空氣壓力和流量對(duì)保壓過程的壓力穩(wěn)定起決定性作用，純化水壓力和流量決定注水時(shí)間，可能影響生產(chǎn)效率。滅菌溫度和保溫時(shí)間是保證滅菌過程達(dá)到預(yù)期無菌保證水平(F0值＞8的前提)，裝載方式可能影響滅菌效果。對(duì)這些關(guān)鍵工藝參數(shù)應(yīng)經(jīng)確認(rèn)，保證嚴(yán)格執(zhí)行。滅菌過程中輸液瓶焊蓋部位、包裝中的藥液經(jīng)受高溫、高壓滅菌，可能出現(xiàn)包裝密封被破壞、組分穩(wěn)定性發(fā)生變化等風(fēng)險(xiǎn)。為保證實(shí)際滅菌工藝對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量影響在可接受范圍內(nèi)，應(yīng)通過風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法確立有所有裝載部位的產(chǎn)品質(zhì)量影響程度，并盡可能在最大風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)取樣檢測(cè)。生產(chǎn)過程中對(duì)對(duì)鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液工藝驗(yàn)證所使用的關(guān)鍵物料進(jìn)行平衡計(jì)算。應(yīng)根據(jù)實(shí)際領(lǐng)、用情況，產(chǎn)品產(chǎn)出情況等綜合因素進(jìn)行核算，證實(shí)實(shí)際生產(chǎn)過程控制能力達(dá)到工藝規(guī)程預(yù)定的物料定額，能保證產(chǎn)出穩(wěn)定。對(duì)于鹽酸左氧氟沙星氯化鈉注射液生產(chǎn)過程的控制，對(duì)藥品生產(chǎn)過程中可能影響產(chǎn)品質(zhì)量的因素進(jìn)行了風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別、評(píng)估和控制，包括空調(diào)系統(tǒng)、壓縮空氣及工藝用水系統(tǒng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，制坯、制瓶、配制、洗灌封、滅菌、燈檢和包裝工序風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，以及大容量注射劑無菌取樣風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。通過這些評(píng)估活動(dòng)，加強(qiáng)了生產(chǎn)過程控制。致謝：本試驗(yàn)是在河南科倫藥業(yè)有限公司進(jìn)行的，本論文是在苑麗老師的悉心指導(dǎo)和親切關(guān)懷下完成的，在此表示由衷的感謝！參考文獻(xiàn)：