20.藥物基因檢測528課件

個(gè)體化藥物基因檢測應(yīng)用20.藥物基因檢測5281藥物基因組學(xué)的概念2北京精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)服務(wù)平臺(tái)3藥物基因檢測應(yīng)用示例4

總結(jié)目錄20.藥物基因檢測5281藥物基因組學(xué)的概念20.藥物基因檢測528藥物治療效果的差異性

相同病癥相同治療藥物相同劑量毒副反應(yīng)治療作用不起藥效常見臨床藥物治療有效率哮喘、糖尿病、抑郁癥等

<60%丙肝、骨質(zhì)疏松、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎<50%抗腫瘤藥物<24%藥物治療的個(gè)體差異現(xiàn)象無法用傳統(tǒng)藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)解釋20.藥物基因檢測528藥物基因組學(xué)藥物基因組學(xué)是“藥物反應(yīng)”的基因組學(xué)，以藥物遺傳多態(tài)性為基礎(chǔ)，從基因組整體角度研究藥物與遺傳的關(guān)系，主要以藥物效應(yīng)和安全性為目標(biāo)，研究各種基因突變與藥效與安全性之間的關(guān)系，其目的是建立基于評(píng)價(jià)疾病易感性和選擇藥物治療方案的個(gè)體化患者特征的遺傳變異標(biāo)志。藥代動(dòng)力學(xué)：研究藥物在體內(nèi)吸收、分布、代謝和排泄規(guī)律（確定給藥劑量和間隔時(shí)間的依據(jù))。藥效動(dòng)力學(xué)：研究藥物對(duì)機(jī)體的作用、作用規(guī)律和作用機(jī)制。精準(zhǔn)治療：從基因組出發(fā)，研究藥物與基因組結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系，指導(dǎo)臨床用藥，達(dá)到個(gè)體化治療目標(biāo)。20.藥物基因檢測52859%藥物不良反應(yīng)與基因變異相關(guān)。JAMA,2001;286:2270-2279藥物療效和毒性的個(gè)體差異基因檢測基因變異

(單核苷酸多態(tài)性-SNP）藥物代謝酶藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體藥物靶點(diǎn)藥代動(dòng)力學(xué)藥效動(dòng)力學(xué)20.藥物基因檢測528數(shù)據(jù)庫支持PharmGKB20.藥物基因檢測528臨床藥物基因組學(xué)實(shí)施聯(lián)盟20.藥物基因檢測528現(xiàn)狀至2017年4月5日，各國基因相關(guān)藥物達(dá)251個(gè)美國223個(gè)，歐盟92個(gè)，日本53個(gè)，加拿大109個(gè)20.藥物基因檢測528現(xiàn)狀我國2012版臨床藥學(xué)重點(diǎn)?？圃u(píng)分標(biāo)準(zhǔn)中，均要求三甲醫(yī)院開展基于藥物基因檢測的個(gè)體化藥學(xué)服務(wù)。

SFDA已經(jīng)更改很多藥品的說明書，除了靶向藥物以外，普通化學(xué)藥物，如得理多（卡馬西平）等，已經(jīng)在說明書中明確標(biāo)示：HLA-B1502基因陽性者，禁止使用卡馬西平。20.藥物基因檢測528現(xiàn)狀20.藥物基因檢測528現(xiàn)狀20.藥物基因檢測528廣東省現(xiàn)狀2017年廣東省高水平醫(yī)院建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)中，在藥學(xué)部的服務(wù)能力評(píng)分指標(biāo)中明確提出：用藥相關(guān)基因檢測人數(shù)≥600，品種數(shù)≥6，基因個(gè)體化治療方案設(shè)計(jì)例數(shù)≥300。20.藥物基因檢測52820.藥物基因檢測528廣東省藥學(xué)會(huì)設(shè)立精準(zhǔn)用藥研究基金20.藥物基因檢測5282北京精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)服務(wù)平臺(tái)20.藥物基因檢測528檢測原理A寡核苷酸探針：3’端接有熒光素（紅圈），5’端接有淬滅基團(tuán)（紅點(diǎn)）未雜交時(shí)，成自身環(huán)狀，不發(fā)出熒光。35Q+A35=T模板G有特異核酸SNP位點(diǎn)的模板雜交后，探針打開，淬滅基團(tuán)遠(yuǎn)離熒光素，發(fā)出熒光20.藥物基因檢測528檢測原理由于測序探針是熒光素標(biāo)記的，利用熒光檢測設(shè)備即可直接檢測雜交染色的結(jié)果，熒光檢測儀高靈敏地捕捉雜交測序熒光信號(hào)的變化，從而完成目標(biāo)序列的精準(zhǔn)檢測，由此形成了新一代雜交測序，即數(shù)字熒光分析雜交/原位雜交熒光染色脫氧核糖核酸測序（簡稱“數(shù)字熒光分子雜交/雜交測序技術(shù)”）體系。該技術(shù)要求更多的模板核酸（要求不低于10000拷貝）才能完成測序，但不需要通過PCR環(huán)節(jié)。20.藥物基因檢測528臨床基因檢測技術(shù)對(duì)比探針雜交采集標(biāo)本提取基因組DNA/RNAPCR擴(kuò)增顯色/掃描電泳檢測純化PCR產(chǎn)物基因芯片焦磷酸測序雙脫氧標(biāo)記毛細(xì)管電泳焦磷酸測序雙脫氧測序、SangerRT-PCR實(shí)時(shí)熒光PCR血液標(biāo)本白細(xì)胞染色體核型分析或雜交測序（系統(tǒng)自動(dòng)完成）數(shù)字熒光分子雜交和雜交測序出現(xiàn)污染的高風(fēng)險(xiǎn)環(huán)節(jié)低風(fēng)險(xiǎn)環(huán)節(jié)避開PCR環(huán)節(jié)，前處理簡單*金標(biāo)準(zhǔn)20.藥物基因檢測528熒光分子雜交獨(dú)特優(yōu)勢1.不怕污染:少量的異源DNA污染的信號(hào)很低，不會(huì)影響測序準(zhǔn)確性。例如500拷貝的異源DNA污染，在PCR擴(kuò)增中絕對(duì)是災(zāi)難級(jí)的，但在雜交測序中，異源信號(hào)的強(qiáng)度不到總信號(hào)強(qiáng)度的10%，則可以作為本底信號(hào)而被消除；2.簡便：雜交測序沒有繁瑣的標(biāo)本DNA提取和PCR擴(kuò)增產(chǎn)物提取環(huán)節(jié)，將臨床標(biāo)本簡單處理即可進(jìn)行雜交測序，因此測序速度非?？?，從拿到臨床標(biāo)本算起，約3小時(shí)即由檢測儀自動(dòng)報(bào)告測序結(jié)果。20.藥物基因檢測528準(zhǔn)確性該技術(shù)初期對(duì)進(jìn)行方法學(xué)準(zhǔn)確性驗(yàn)證。與Sanger法進(jìn)行比較，一致性為99%。20.藥物基因檢測528可檢測藥物：心腦血管科：氯吡格雷、阿司匹林、華法林、他汀類、硝酸甘油、ACE-I類、美托洛爾、葉酸、卡馬西平、苯妥因等。腫瘤科：嘧啶類、鉑類、紫杉醇、伊立替康、他莫昔芬、甲氨蝶呤等。心理科：氯氮卓、氯氮平、奧氮平、氟西汀、文拉法辛、西酞普蘭、阿米替林、依地普侖等。消化科：PPI類、環(huán)孢素A、硫唑嘌呤、呋塞米和螺內(nèi)酯等。呼吸科：吸入性糖皮質(zhì)激素、短/長效β受體激動(dòng)劑、伏立康唑等。內(nèi)分泌科：磺脲類、二甲雙胍和胰島素等。婦產(chǎn)科：葉酸(胎兒神經(jīng)管發(fā)育異常、習(xí)慣性流產(chǎn)等）。風(fēng)濕免疫科/腎內(nèi)科/血液科：他克莫司、環(huán)磷酰胺、別嘌醇、硫唑嘌呤等。........20.藥物基因檢測528開展情況至2016年底，覆蓋醫(yī)院284家。20.藥物基因檢測528廣東開展示例南方醫(yī)院：卡馬西平、苯妥英鈉、磷苯妥因、奧卡西平、巰嘌呤、硫唑嘌呤、糖皮質(zhì)激素沖擊、甲氨蝶呤、氯吡格雷、阿司匹林、華法林、他克莫司、別嘌醇、環(huán)磷酰胺、阿糖胞苷、奧美拉唑、泮托拉唑、蘭索拉唑、埃索美拉唑、葉酸、新生兒自閉癥、孕中及產(chǎn)后抑郁、胎兒神經(jīng)發(fā)育異常、習(xí)慣性流產(chǎn)、人工受精。中山孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院：卡馬西平、巰嘌呤、硫唑嘌呤、別嘌醇、奧美拉唑、糖皮質(zhì)激素沖擊、甲氨蝶呤、他克莫司、環(huán)孢素、腎移植排斥風(fēng)險(xiǎn)、霉酚酸、丙戊酸、環(huán)磷酰胺、替莫唑胺、抗胸腺細(xì)胞球蛋白ATG。中大五院：氯吡格雷、華法林、阿司匹林、他汀、伏立康唑、環(huán)孢素、他克莫司、糖皮質(zhì)激素、奧氮平、氯氮平、奮乃靜、利培酮、文拉法辛、丙戊酸、別嘌醇、乙醇風(fēng)險(xiǎn)等。......20.藥物基因檢測528檢測操作分子診斷檢測樣本：1、血液樣本2、組織樣本血液樣本：2～3ml靜脈全血（EDTA抗凝紫管）白細(xì)胞富集耀金分測序反應(yīng)耀金保個(gè)體化藥學(xué)基因檢測主要步驟20.藥物基因檢測528條件支持該項(xiàng)目污染小，實(shí)驗(yàn)室要求為通風(fēng)通水的普通實(shí)驗(yàn)室條件即可，不需要PCR認(rèn)證實(shí)驗(yàn)室。我院開展此項(xiàng)新技術(shù)、新項(xiàng)目需新添置的設(shè)備1、熒光分析儀2、離心機(jī)3000R/M3、冰箱4、普通PC機(jī)5、移液槍*36、打印機(jī)開展此項(xiàng)新技術(shù)、新項(xiàng)目所需新購置的試劑1、耀金分

（耀金寶等為贈(zèng)送）20.藥物基因檢測528檢測操作1、血液樣本：2-3ml靜脈全血(不需空腹)，使用一次性真空抽血管（EDTA抗凝紫帽管）采集，于4℃低溫保存，保存時(shí)間不宜超過24h。2、使用預(yù)處理液NH4CL裂解紅細(xì)胞，離心，獲得白細(xì)胞。2、將白細(xì)胞溶解到耀金寶中，再取1.5微升，加入耀金分試劑管中。3、將加入了白細(xì)胞裂解液的耀金分試劑，放置入熒光檢測儀中。4、熒光檢測儀自動(dòng)完成染色體核型分析和基因序列測定。5、熒光檢測儀在2.5小時(shí)內(nèi)自動(dòng)報(bào)告基因型結(jié)果。6、藥師解讀報(bào)告，給出個(gè)體化用藥建議。20.藥物基因檢測5283藥物基因檢測應(yīng)用示例20.藥物基因檢測528氯吡格雷基因檢測20.藥物基因檢測528氯吡格雷氯吡格雷是一種血小板聚集抑制劑?？捎糜诜乐涡募」Ｋ?，缺血性腦血栓，閉塞性脈管炎和動(dòng)脈粥樣硬化及血栓栓塞引起的并發(fā)癥。20.藥物基因檢測528氯吡格雷代謝路徑20.藥物基因檢測52820.藥物基因檢測528CYP2C19的中國人特異性

CYP2C19的表型多態(tài)性有明顯的種族差異

白種人，弱代謝者發(fā)生率僅為3％

韓國人，弱代謝者發(fā)生率為13％

津巴布韋黑人中，弱代謝者發(fā)生率僅約4％

中國人，弱代謝者發(fā)生率為15％-17％付良青.國外醫(yī)學(xué)藥學(xué)分冊,2001.28(2):74-7820.藥物基因檢測52820.藥物基因檢測528PON120.藥物基因檢測52820.藥物基因檢測52820.藥物基因檢測528臨床數(shù)據(jù)分析成果分享20.藥物基因檢測528臨床數(shù)據(jù)分析成果分享20.藥物基因檢測5284