植物愈傷組織培養(yǎng)

第七章植物愈傷組織培養(yǎng)第一節(jié)外植體的制備1.一般植物組織都能誘發(fā)愈傷組織。材料必須完全無菌外植體的大小

第二節(jié)愈傷組織的培養(yǎng)一、培養(yǎng)基根本培養(yǎng)基只有局部植物組織能夠培養(yǎng)和維持下去，大多數(shù)組織需要添加各種各樣的附加物，如維生素、氨基酸、糖醇，生長素、細(xì)胞分裂素等。二、愈傷的培養(yǎng)方式：培養(yǎng)分為固體和液體培養(yǎng)兩大類。液體培養(yǎng)又分三、培養(yǎng)條件1、光照：愈傷組織的誘導(dǎo)需弱光或不需光，分化需光。繼代培養(yǎng)一般需光。2、溫度：一般采用24～28℃的恒溫條件進(jìn)行。3、濕度：較大，以免引起培養(yǎng)基干縮。

第三節(jié)愈傷組織形態(tài)的發(fā)生

愈傷組織培養(yǎng)物在某些條件下，可以再分化產(chǎn)生不定芽或根的分生組織甚至是胚狀體，這些有結(jié)構(gòu)的組織發(fā)育成苗。一、愈傷組織形態(tài)發(fā)生的途徑1.器官的形成

在分化時(shí)，愈傷組織的表層和內(nèi)部都可形成分生中心。芽多發(fā)生在愈傷組織的表層，屬外起源。根發(fā)生在組織的深處，與整體植株發(fā)生類似，是內(nèi)起源。

2.體細(xì)胞胚的發(fā)生愈傷組織體細(xì)胞胚植株二、激素對愈傷組織分化的影響植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)在分化過程中的作用是極為明顯的，適宜的植物生長物質(zhì)配比在器官分化中起著重要的作用。器官分化的植物激素控制理論大多數(shù)植物組織或器官的再生作用符合器官分化的植物激素控制理論。生長素與細(xì)胞分裂素的比例小時(shí)那么產(chǎn)生苗，比例大時(shí)那么生根，而兩種激素的比例適中時(shí)，那么產(chǎn)生無結(jié)構(gòu)的愈傷組織。第四節(jié)愈傷組織的誘導(dǎo)與分化一、外植體形成愈傷組織的時(shí)期及特點(diǎn)。

從外植體脫分化形成愈傷組織大致可分為三個(gè)時(shí)期：起動(dòng)期〔誘導(dǎo)期〕、分裂期和分化期。1.誘導(dǎo)期:

誘導(dǎo)期是細(xì)胞準(zhǔn)備分裂的時(shí)期，是愈傷組織形成起點(diǎn)。

特點(diǎn)：在誘導(dǎo)期，代謝活化了，細(xì)胞內(nèi)合成代謝迅速進(jìn)行，但是細(xì)胞的大小仍然和外植體時(shí)一樣，沒有多大改變。2.分裂期：外植體中已分化的活細(xì)胞在外源激素的作用下，外層細(xì)胞出現(xiàn)了分裂，細(xì)胞的體積縮小，逐漸回復(fù)到分生組織狀態(tài)，稱為回復(fù)變化。在回復(fù)變化時(shí)，細(xì)胞通過脫分化的起動(dòng)期而進(jìn)入分裂，并開始形成愈傷組織。特征：外層細(xì)胞進(jìn)行分裂，而中間的細(xì)胞不分裂。另外還有細(xì)胞數(shù)目增加，體積變??；細(xì)胞核和核仁增到最大等3.分化期特點(diǎn)：分化結(jié)構(gòu)的形成過程加速，超過了回復(fù)變化。外層細(xì)胞的分裂逐漸減慢，甚至停止，為次生生長所代替，大量次生結(jié)構(gòu)出現(xiàn)。在這時(shí)期中細(xì)胞的伸展和分裂處于平衡，故細(xì)胞的平均大小往往沒有變化。它們并不是嚴(yán)格的，特別是分裂期和分化期。一塊培養(yǎng)組織的細(xì)胞既有分裂的又有分化的。二、愈傷組織的質(zhì)地根據(jù)愈傷質(zhì)地劃分為：愈傷組織的質(zhì)地是有明顯差異的有的堅(jiān)實(shí)，有的脆。脆的愈傷組織是懸浮培養(yǎng)生長的最適宜的材料，容易使組織處于