蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)課件

機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)緒論蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的和任務(wù)機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的和任務(wù)是通過驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)使學(xué)生掌握機(jī)能學(xué)常用的基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)，驗(yàn)證所學(xué)的基本理論知識(shí)；通過設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生了解機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)研究的設(shè)計(jì)思路，培養(yǎng)學(xué)生運(yùn)用知識(shí)能力、創(chuàng)新能力和團(tuán)結(jié)協(xié)作精神，充分發(fā)揮學(xué)生主觀能動(dòng)性；通過綜合性實(shí)驗(yàn)使學(xué)生在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)過程的觀察和結(jié)果分析中進(jìn)一步提高獨(dú)立分析問題和解決問題的能力，培養(yǎng)學(xué)生的初步科研意識(shí)，為今后從事科學(xué)研究打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：蛙和蟾蜍均屬于兩棲綱動(dòng)物，常用于實(shí)驗(yàn)教學(xué)，其心臟在離體后仍可有節(jié)律地跳動(dòng)，常用于心臟生理實(shí)驗(yàn)。家兔屬于哺乳綱動(dòng)物，具有性情溫順、對(duì)溫度適應(yīng)敏銳和便于靜脈注射等特點(diǎn)，是教學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的動(dòng)物之一?？捎糜谘獕?、呼吸和泌尿系統(tǒng)等多種實(shí)驗(yàn)，還可用于體溫實(shí)驗(yàn)和熱原的研究與鑒定。蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)器材】蛙類手術(shù)器械一套、哺乳類手術(shù)器械一套、氣管插管；任氏液，生理鹽水?！緦?shí)驗(yàn)對(duì)象】

蟾蜍，家兔蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)步驟和觀察項(xiàng)目】1.蛙類實(shí)驗(yàn)的基本手技與操作破壞腦和脊髓暴露蛙心，觀察蛙心臟跳動(dòng)情況辨認(rèn)靜脈竇、心房、心室并觀察他們的波動(dòng)順序蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)蛙的捉拿與固定方法蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)破壞蟾蜍腦和脊髓的方法蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)考核方式實(shí)驗(yàn)課成績根據(jù)學(xué)生的平時(shí)表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)技能的掌握情況、實(shí)驗(yàn)報(bào)告或?qū)嶒?yàn)論文以及實(shí)驗(yàn)操作和實(shí)驗(yàn)理論考核等綜合評(píng)價(jià)。蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一制備坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本【目的和原理】由于蛙類的一些基本生理活動(dòng)規(guī)律與溫血?jiǎng)游锵嗨疲⑶揖S持其離體組織正?；顒?dòng)需要的理化條件比較簡單，易于建立和控制。因此，在實(shí)驗(yàn)中常用蟾蜍的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本來觀察和研究興奮與興奮性、刺激與肌肉收縮等基本的生理現(xiàn)象和過程。蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】蟾蜍【實(shí)驗(yàn)器材和藥品】蛙板、玻璃板、普通剪刀、手術(shù)剪、眼科剪、鑷子、眼科鑷、探針、玻璃分針、瓷盤、滴管、培養(yǎng)皿、鋅銅弓、任氏液。蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)鋅銅弓用金屬鋅和銅鉚接而成，鋅銅弓在極性溶液中形成回路時(shí)，鋅與銅兩極產(chǎn)生約0.5~0.7V的直流電壓，因此可用來刺激神經(jīng)和肌肉，使神經(jīng)或肌肉興奮。蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)步驟】破壞腦和脊髓取蟾蜍一只，用自來水沖洗干凈。左手握住蟾蜍，用食指按壓其頭部前端，拇指按壓背部，使其脊柱伸直，右手持探針從枕骨大孔處垂直向下刺入，然后轉(zhuǎn)向前刺入顱腔，左右攪動(dòng)，充分搗毀腦組織。然后將探針抽回至進(jìn)針處，再轉(zhuǎn)向后刺入椎管，反復(fù)上下提插搗毀脊髓。此時(shí)如蟾蜍的四肢松馳無力，呼吸消失，表明腦和脊髓已破壞完全，否則應(yīng)反復(fù)按上述方法進(jìn)行操作蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)剪除軀干上部和內(nèi)臟在骶髂關(guān)節(jié)水平上０.5cm—1cm處剪斷脊柱，左手握住蟾蜍的后肢，將骶骨向上，使蟾蜍頭和內(nèi)臟自然下垂，右手持剪刀，沿脊柱兩側(cè)剪除一切內(nèi)臟和頭胸部，留下后肢、骶骨、脊柱以及緊貼于脊柱兩側(cè)的坐骨神經(jīng)。剝皮左手握緊脊柱斷端（注意不要握住或壓迫神經(jīng)），右手捏住其上的皮膚邊緣，用力向下剝掉全部后肢的皮膚。把標(biāo)本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。將手及用過的剪刀、鑷子等全部手術(shù)器械洗凈，再進(jìn)行下面的步驟。分離兩腿用鑷子夾住脊柱將標(biāo)本提起，背面朝上，剪去向上突起的尾骨（注意勿損傷坐骨神經(jīng)）。然后沿正中線用剪刀將脊柱和恥骨聯(lián)合中央剪開兩條大腿，并完全分開。將兩條腿浸入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本游離坐骨神經(jīng)將腿標(biāo)本腹面朝上放置，用玻璃分針沿脊柱旁游離坐骨神經(jīng)。再沿坐骨神經(jīng)溝（股二頭肌和半膜肌之間的裂隙處），找出坐骨神經(jīng)的大腿段。用玻璃分針仔細(xì)剝離，剪斷坐骨神經(jīng)的所有分支，然后剪斷脊柱，保留約1cm與坐骨神經(jīng)相連處，并將神經(jīng)一直游離到腘窩。完成坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本將游離干凈的坐骨神經(jīng)搭在腓腸肌上，在膝關(guān)節(jié)周圍，剪掉全部大腿肌肉，并用普通剪刀將股骨刮干凈，然后在股骨中部剪去上段股骨，保留1cm的股骨，剩下的部分就是坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本。完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本將上述坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本在跟腱處穿線結(jié)扎后，于結(jié)扎處遠(yuǎn)心端剪斷跟腱。游離腓腸肌至膝關(guān)節(jié)處，然后從膝關(guān)節(jié)囊將小腿其余的部分剪掉，這樣就制得一個(gè)具有附著在股骨上的腓腸肌并帶有支配腓腸肌的坐骨神經(jīng)的標(biāo)本。蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)

檢驗(yàn)標(biāo)本興奮性

用經(jīng)任氏液濕潤的鋅銅弓輕輕的接觸一下坐骨神經(jīng)，如腓腸肌發(fā)生迅速而明顯的收縮，則表明標(biāo)本的興奮性良好，即可將標(biāo)本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中，以備實(shí)驗(yàn)用。實(shí)驗(yàn)要求：掌握制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的技能，并獲得興奮性良好的一對(duì)標(biāo)本。蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)【注意事項(xiàng)】操作中勿污染，壓榨，損傷，過度牽拉神經(jīng)和肌肉，動(dòng)作要輕，避免損傷神經(jīng)。操作中經(jīng)常給神經(jīng)和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以保持其始終有正常的興奮性。蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)制備好的神經(jīng)肌肉標(biāo)本為何要放在仁氏液中？用鋅銅弓刺激神經(jīng)，為何會(huì)引起肌肉收縮？坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本可完成哪些方面的實(shí)驗(yàn)。思考題蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)二骨骼肌收縮的影響因素【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/p>

觀察改變電刺激頻率與刺激強(qiáng)度對(duì)肌肉收縮的影響，明確閾下刺激、閾刺激、閾上刺激以及最適刺激的概念。【實(shí)驗(yàn)原理】單收縮：一個(gè)短暫的有效刺激復(fù)合收縮：相繼兩個(gè)有效刺激，間隔時(shí)間小于肌肉單收縮的總時(shí)程不完全強(qiáng)直收縮：串刺激，后一刺激落在前一刺激引起肌肉收縮的舒張期完全強(qiáng)直收縮：串刺激，后一刺激落在前一刺激引起肌肉收縮的收縮期蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】

蟾蜍或蛙【實(shí)驗(yàn)器材和試劑】

蛙類手術(shù)器械一套、萬能支架、任氏液、BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、張力換能器（100克）、神經(jīng)-肌肉標(biāo)本屏蔽盒、蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)步驟】

坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備（見坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備方法）。儀器連接和標(biāo)本放置蛙腓腸肌標(biāo)本制作與骨骼肌收縮實(shí)驗(yàn)【觀察項(xiàng)目】

刺激強(qiáng)度對(duì)肌肉收縮的影響。

逐步增加刺激強(qiáng)度，觀察肌肉收縮反應(yīng)是否也相應(yīng)增大，即描記出的曲線幅度是否相應(yīng)增高。讀出最大刺激強(qiáng)度數(shù)值。刺激頻率對(duì)肌肉收縮的影響

選用單次采集，應(yīng)用最大刺激強(qiáng)度，單脈沖刺激神經(jīng)，觀察肌肉單收縮波形的高度與寬度。

雙脈沖數(shù)刺激神經(jīng)，并縮短刺激之間的時(shí)間間隔（0.06-0.08s）,記錄舒張期復(fù)合收縮曲線。進(jìn)一步縮短刺激的時(shí)間間隔（0.02-0.04s），記錄收縮收縮期復(fù)合收縮曲線

選擇串脈沖為5-10，串脈沖間隔從100ms開始，給予神經(jīng)連續(xù)刺激，記錄肌肉的不完全性強(qiáng)直收縮曲線。進(jìn)一步減少串脈沖刺激間隔，可記錄到肌肉