血清葡萄糖濃度的測定

血清葡萄糖濃度的測定〔GOD-POD法〕1編輯ppt實驗目的1、掌握血糖變化的臨床意義。2、掌握酶法測定血清葡萄糖濃度的原理。2編輯ppt生理性高血糖

可見于攝入高塘食物后，或情緒緊張腎上腺分泌增加時。生理性低血糖

見于饑餓和劇烈運動時。臨床意義低血糖<2.8mmol/L高血糖〔空腹〕>7.1mmol/L3編輯ppt臨床意義病理性高血糖糖尿病：胰島素絕對或相對缺乏的糖尿病患者。內(nèi)分泌腺功能障礙：引起各種對抗胰島素的激素分泌過多，或升高血糖的激素增多引起的高血糖。〔胰島素是唯一降低血糖的激素〕顱內(nèi)壓增高：可刺激血糖中樞，引起血糖增高。如腦膜炎、顱外傷、顱內(nèi)出血等。脫水引起的高血塘：如嘔吐、腹瀉和高熱等也可使血糖輕度增高。病理性低血糖特發(fā)性功能性低血糖最多見，其次是藥源性、肝源性和胰島素瘤等。4編輯ppt實驗原理——

酶法分析偶聯(lián)酶反響定量法：ABC酶1酶2使用此方法條件：當單酶反響的底物或產(chǎn)物用物理化學手段不能區(qū)分時

〔即：當測定A或B很困難時，可用酶2作為指示酶，通過測定C的含量來間接測定A的含量〕5編輯ppt實驗原理——

酶法分析以H2O2酶作指示酶系統(tǒng)：〔本次實驗使用方法〕某底物H2O2顯色過氧化物酶底物相應酶H2O2氧化色素原吸光度過氧化物酶的底物有兩類：1.

單一色素原：鄰聯(lián)茴香胺、二氨基聯(lián)苯胺、四甲基聯(lián)苯胺等2.

成對色素原：苯酚與4-氨基安替比林

本次實驗所使用的兩種色素原同時存在以脫氫酶作指示酶系統(tǒng)：〔略〕6編輯ppt實驗原理葡萄糖苯酚O2葡萄糖氧化酶〔GOD〕葡萄糖酸H2O紅色醌類化合物4-氨基安替比林過氧化物酶〔POD〕H2O2氧化色素原2

H2O27編輯ppt實驗器材與試劑器材：5mL移液管，微量可調(diào)式移液器，721E分光光度計，37℃恒溫水浴。試劑：1、0.1mol/L磷酸鹽緩沖液〔pH7.0〕2、酶試劑4℃保存3、酚溶液用棕色瓶貯存4、酶酚混合試劑酶試劑與酚溶液等量混合5、苯甲酸鈉溶液〔12mmol/L〕6、葡萄糖標準儲存液〔100mmol/L〕7、葡萄糖標準工作液〔5mmol/L〕8編輯ppt操作步驟試劑/mL空白管標準管測定管血清------0.020葡萄糖標準液---0.020---蒸餾水0.020------酶酚混合試劑3.003.003.00先取3支試管，然后按表格操作混勻，置于37℃水浴中，保溫25min，在波長510nm處比色，以空白管調(diào)零，讀取標準管及測定管的吸管度9編輯ppt計算公式血清葡萄糖濃度=A

測定A

標準X5

mmol/L葡萄糖標準液5

mmol/L參考值：空腹血清葡萄糖濃度：3.89

~

6.11

mmol/L10編輯ppt1、葡萄糖氧化酶法可直接測定腦脊液葡萄糖含量，但不能直接測定尿酸葡萄糖含量?！惨驗槟蛞褐械鹊饶蛩岬雀蓴_性物質(zhì)濃度過高，可干擾過氧化物酶反響，而造成結果假性偏低。〕2、血液樣品需及時別離血細胞?！惨驗榧t細胞的酵解將導致測定結果偏低。建議測定樣品以草酸鉀-氟化鈉