無菌和無菌操作技術(shù)

一、無菌的環(huán)境1、無菌室標(biāo)準(zhǔn)無菌室的要求：房間設(shè)置〔外面有緩沖室〕、空氣過濾、墻面、墻角、微生物操作相關(guān)設(shè)備、紫外燈等。無菌室布局如條件有限，可在微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)專辟一個(gè)小房間作為無菌室?？梢杂冒宀暮筒ＡЫㄔ欤娣e4-5平方米即可。板材和玻璃隔出的無菌室2、超凈工作臺(tái)超凈工作臺(tái)是一種提供局部無塵無菌工作環(huán)境的垂直單向流型空氣凈化設(shè)備。超凈工作臺(tái)3、生物平安柜生物平安柜外形與超凈臺(tái)類似，也提供局部無塵無菌工作環(huán)境。但它設(shè)置了風(fēng)槽，氣流不會(huì)吹向使用者，可以有效保護(hù)使用者。生物平安柜二、無菌的器具、培養(yǎng)基1、玻璃、金屬等器具--干熱滅菌法設(shè)備：電烘箱用途：用于玻璃器皿、金屬器具等耐熱物品的烤干和滅菌。條件：160-165℃，滅菌1-2小時(shí)。

2、玻璃、金屬、含水物品等--高壓蒸汽滅菌法設(shè)備：高壓蒸汽滅菌鍋用途：培養(yǎng)基、生理鹽水、廢棄物、采樣器、紗布、衣物的滅菌。條件：121℃水蒸氣15分鐘

培養(yǎng)基一般使用高壓蒸汽滅菌法4、液體或水溶性物質(zhì)--過濾除菌法器具：細(xì)菌過濾器用途：不耐高溫的液體、水溶性物質(zhì)的除菌。細(xì)菌過濾器1、手部清潔消毒洗手：手部有可見灰塵時(shí)、飯前、便后，用水和肥皂洗手；Handrub〔揉手〕：手部較清潔時(shí)，75%乙醇或者醇基消毒劑揉手。動(dòng)作：手掌-手背-指縫-手指-拇指-指尖-手腕2、培養(yǎng)皿操作培養(yǎng)皿開合：單手翻開和蓋上皿蓋，包括持皿法和皿加法兩種。此操作用于制作培養(yǎng)基平板、接種等。持皿法皿加法3、接種環(huán)操作包括灼燒接種環(huán)、接種、劃線等。灼燒接種環(huán)先斜放外焰灼燒接種環(huán)，然后垂直放置后繼續(xù)灼燒，再斜燒金屬桿?，F(xiàn)在紅外接種環(huán)滅菌器使用也比較廣泛。紅外接種環(huán)滅菌器用接種環(huán)進(jìn)行接種用接種環(huán)進(jìn)行劃線4、涂布棒操作灼燒滅菌：可以沾酒精然后灼燒，灼燒范圍要包括其桿部。涂布：將菌液滴在培養(yǎng)基外表中央。右手拿涂布棒將菌液沿一條直線來回推動(dòng)，然后沿一垂直線來回推動(dòng)，平板邊緣處可改變方向再涂幾次。涂布5、試管操作單試管操作〔注意左右手的使用〕雙試管操作四、根本規(guī)那么不得留長指甲，頭發(fā)需扎好；無菌操作中不要大聲笑、說話、打噴嚏、打鬧