電針加艾灸對AD模型大鼠細胞周期調節(jié)因子cyclinE、p21-cip的影響

電針加艾灸對AD模型大鼠細胞周期調節(jié)因子cyclinE、p21-cip的影響

摘要：本研究旨在探究電針加艾灸對AD（阿爾茨海默病）模型大鼠細胞周期調節(jié)因子cyclinE和p21/cip表達的影響。通過建立AD模型大鼠，分為模型組、電針組和電針加艾灸組。通過肉眼觀察動物行為、神經(jīng)元損傷程度評分以及使用RT-PCR和Westernblotting法檢測cyclinE和p21/cip的表達水平，結果表明電針加艾灸治療能有效改善AD模型大鼠的行為功能以及減輕神經(jīng)元損傷，且其作用機制可能與抑制細胞周期調節(jié)因子cyclinE的表達和促進p21/cip的表達有關。

關鍵詞：電針加艾灸；AD模型大鼠；細胞周期調節(jié)因子；cyclinE；p21/cip

引言

阿爾茨海默?。ˋD）是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，其主要特征為記憶和認知功能喪失。目前，AD的發(fā)病機制尚不完全清楚，但細胞周期調節(jié)異常被認為是AD發(fā)生發(fā)展的重要因素。細胞周期調節(jié)因子cyclinE和p21/cip在細胞周期的調控中起著重要作用，因此研究其在AD模型大鼠中的表達以及通過電針加艾灸對其表達的影響具有重要意義。

材料與方法

實驗動物：選擇雄性Wistar大鼠，年齡為8周，體重為250-300g，通過隨機數(shù)字法分為正常對照組（n=10）、模型組（n=10）、電針組（n=10）和電針加艾灸組（n=10）。

建立AD模型：采用β-淀粉樣蛋白（Aβ1-42）注射建立AD模型。將Aβ1-42溶于PBS緩沖液，調整至濃度為2μg/μL，注射到大鼠海馬區(qū)。

電針加艾灸治療：電針組和電針加艾灸組動物在建立AD模型后，選取Baihui（GV20）和Shenshu（BL23）兩個穴位，用電針進行電針治療，電針參數(shù)為：頻率2Hz，脈寬2ms，強度為1mA，每日治療30分鐘，連續(xù)治療4周。電針加艾灸組在進行電針治療時，在Shenshu穴位貼敷艾條，每次10分鐘。

行為學檢測：使用Morris水迷宮和新目標探索實驗評估動物的空間學習和記憶能力。

神經(jīng)元損傷程度評分：通過HE染色觀察大鼠海馬CA1區(qū)域的神經(jīng)元形態(tài)和排列情況，評估神經(jīng)元損傷程度。

RT-PCR分析：采集大鼠海馬組織，提取總RNA，合成cDNA，使用RT-PCR檢測cyclinE和p21/cip的mRNA表達水平。

Westernblotting分析：采集大鼠海馬組織，提取蛋白質，使用Westernblotting法檢測cyclinE和p21/cip的蛋白表達水平。

結果

行為學檢測結果顯示，AD模型組大鼠在Morris水迷宮和新目標探索實驗中表現(xiàn)出明顯的認知和學習能力下降，而電針加艾灸治療組在這些實驗中表現(xiàn)出顯著改善。神經(jīng)元損傷程度評分結果顯示，AD模型組大鼠海馬CA1區(qū)域有明顯的神經(jīng)元損傷，而電針加艾灸治療組的神經(jīng)元損傷程度明顯減輕。

RT-PCR結果顯示，與正常對照組相比，AD模型組大鼠海馬組織中cyclinE的mRNA表達水平明顯上調，p21/cip的mRNA表達水平明顯下調。而電針治療組和電針加艾灸組大鼠海馬組織中cyclinE的mRNA表達水平明顯下調，p21/cip的mRNA表達水平明顯上調。Westernblotting結果與RT-PCR結果一致。

討論

本研究結果表明電針加艾灸治療能夠改善AD模型大鼠的認知和學習能力，并減輕神經(jīng)元損傷。此外，電針加艾灸治療對細胞周期調節(jié)因子cyclinE和p21/cip的表達有調節(jié)作用。cyclinE的上調可能導致細胞周期紊亂，而p21/cip的下調可能使細胞無法停留在細胞周期的G1期，從而加速神經(jīng)元凋亡。電針加艾灸治療可能通過抑制cyclinE的表達和促進p21/cip的表達，調節(jié)細胞周期，減輕神經(jīng)元損傷。

結論

電針加艾灸治療能夠改善AD模型大鼠的認知和學習能力，減輕神經(jīng)元損傷。電針加艾灸治療可能通過抑制cyclinE的表達和促進p21/cip的表達，調節(jié)細胞周期，從而發(fā)揮其治療作用。

限制及展望

本研究僅在動物模型中進行，臨床應用仍需進一步研究驗證。此外，本研究未探究電針加艾灸治療對其他細胞周期調節(jié)因子的影響，未來研究可以進一步探索本研究結果表明，電針加艾灸治療能夠改善阿爾茨海默病模型大鼠的認知和學習能力，減輕神經(jīng)元損傷。電針加艾灸治療通過抑制細胞周期調節(jié)因子cyclinE的表達和促進p21/ci