藥理學(xué)研究的一般性問(wèn)題

藥理學(xué)研究的科學(xué)訓(xùn)練1.科研全過(guò)程訓(xùn)練概況專業(yè)課程、專業(yè)外語(yǔ)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、文獻(xiàn)檢索、常用軟件應(yīng)用〔Word,Excel,圖表制作軟件，Photoshop,SPSS,PowerPoint,etc〕閱讀文獻(xiàn)，確定課題〔查閱文獻(xiàn)能力〕設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)研究〔取得初步結(jié)果，可以申請(qǐng)基金〕統(tǒng)計(jì)分析資料；撰寫(xiě)論文辯論、會(huì)議報(bào)告〔Chinese,English〕2.一、藥理學(xué)研究的類型根據(jù)研究目的分類根底研究：受體、遞質(zhì)、蛋白質(zhì)、神經(jīng)通路、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、基因開(kāi)發(fā)研究：圍繞新藥研發(fā)的藥理學(xué)研究應(yīng)用研究：提高治療效果、減少不良反響的臨床藥理學(xué)3.一、藥理學(xué)研究的類型根據(jù)研究?jī)?nèi)容和研究方法分類藥效及作用機(jī)制研究藥動(dòng)學(xué)研究實(shí)驗(yàn)研究整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)離體器官、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)臨床研究4.二、定位與選題〝三定〞:明確的目標(biāo)定研究方向很穩(wěn)定定研究領(lǐng)域相對(duì)穩(wěn)定定研究課題非?；顫娙绾味ㄎ?學(xué)科開(kāi)展的前景與可行性單位的可能條件個(gè)人興趣5.如何選題

導(dǎo)師：給方向、提供條件、審閱文章、組織辯論〔不同于technician〕根據(jù)導(dǎo)師的研究方向基金資助情況確有興趣的探索可以做出開(kāi)創(chuàng)性的工作二、定位與選題6.三、要求獨(dú)立研究工作的根本能力掌握信息,復(fù)習(xí)文獻(xiàn)的能力科學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能力〔創(chuàng)新思維能力〕科學(xué)實(shí)驗(yàn)操作能力科學(xué)論文撰寫(xiě)發(fā)表能力科學(xué)基金申請(qǐng)能力良好的素質(zhì)，杜絕造假、剽竊文章的可信率、實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)率7.四、怎樣寫(xiě)好實(shí)驗(yàn)記錄認(rèn)真、客觀、全面的記錄。格式和內(nèi)容實(shí)驗(yàn)方法試劑稱量配制時(shí)間氣候儀器設(shè)備動(dòng)物結(jié)果8.四、怎樣寫(xiě)好實(shí)驗(yàn)記錄一般要求記錄本應(yīng)事先印有頁(yè)碼，不得撕掉或挪作他用，即使寫(xiě)錯(cuò)了亦應(yīng)如此。封面或首頁(yè)應(yīng)寫(xiě)明科研課題名稱，開(kāi)始工作年、月、日，工作者姓名，每本記錄前1～2頁(yè)應(yīng)留作寫(xiě)實(shí)驗(yàn)?zāi)夸浖绊?yè)次之用，便于查閱。所有數(shù)據(jù)，必須立即用不掉色的筆直接清晰地記錄在記錄本上，嚴(yán)禁用鉛筆記錄，因?yàn)槿菀淄松捅煌扛?。如有?xiě)錯(cuò)不得涂改擦抹，必須改正時(shí)，可在錯(cuò)誤處畫(huà)道線或打×，然后寫(xiě)上正確數(shù)據(jù)，并由課題負(fù)責(zé)人簽字，防止弄虛做假。電腦測(cè)得的數(shù)據(jù)應(yīng)輸入電腦，自動(dòng)打印，貯存，最好拷貝一份，以防喪失或損壞。9.四、怎樣寫(xiě)好實(shí)驗(yàn)記錄寫(xiě)記錄的要求立即不能先記在心上，實(shí)驗(yàn)后補(bǔ)寫(xiě)記錄，因?yàn)橛洃浻袝r(shí)不可靠。直接要直接寫(xiě)在記錄本上，不能先寫(xiě)在紙條上，然后重抄，因?yàn)橹爻袝r(shí)抄錯(cuò)，有時(shí)甚至把紙條丟掉。清晰字體清楚，不要潦草，不要詞不達(dá)意，自己能看懂，別人也看得清楚，今天清楚，日后也看得懂。自動(dòng)儀器打印的數(shù)據(jù)、結(jié)果、圖譜等必須將原件依順序貼在記錄本上，有條件的還可輸入電腦保存。10.四、怎樣寫(xiě)好實(shí)驗(yàn)記錄記錄的內(nèi)容年、月、日。有的實(shí)驗(yàn)還應(yīng)注明室溫實(shí)驗(yàn)名稱目的材料實(shí)驗(yàn)方法，應(yīng)注明引用參考文獻(xiàn)；結(jié)果：包括原始數(shù)據(jù)，圖，表，統(tǒng)計(jì)方法討論或小結(jié)

11.五、研究設(shè)計(jì)三要素處理因素〔自變量〕試驗(yàn)對(duì)象〔人、動(dòng)物；器官、組織、細(xì)胞、分子〕試驗(yàn)效應(yīng)〔因變量〕藥物、方法和模型的關(guān)系12.六、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的根本原那么對(duì)照原那么并行對(duì)照配對(duì)對(duì)照自身對(duì)照前后對(duì)照潛在對(duì)照13.六、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的根本原那么隨機(jī)原那么排除實(shí)驗(yàn)者的主觀性，使每個(gè)實(shí)驗(yàn)單位都有同等時(shí)機(jī)被分配到實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。重復(fù)原那么實(shí)驗(yàn)的取樣例數(shù)或?qū)嶒?yàn)次數(shù)14.

如何針對(duì)課題復(fù)習(xí)文獻(xiàn)15.1.站在巨人肩上看世界知識(shí)爆炸時(shí)代:廣博、交叉學(xué)科

知識(shí)廣博與深入、專業(yè)化間的矛盾〝開(kāi)卷有益〞？16.2.按科研需要來(lái)復(fù)習(xí)文獻(xiàn)充分占有文獻(xiàn)〝方向〞─專業(yè)人員水平領(lǐng)域─專家水平課題─No.1專家水平17.2.按科研需要來(lái)復(fù)習(xí)文獻(xiàn)文獻(xiàn)分類書(shū)教科書(shū):相關(guān),交叉學(xué)科的根底知識(shí)專著編著(資料性)著作(文獻(xiàn)性)(方向)(領(lǐng)域)綜述資料性(方向)(領(lǐng)域)文獻(xiàn)性(領(lǐng)域,課題)Originalpaper課題領(lǐng)域(個(gè)別)Datapaper快報(bào)摘要會(huì)議匯編自己定位不要變,別被文獻(xiàn)牽著走18.3.如何看文獻(xiàn)精讀與瀏覽看懂:問(wèn)題的提出(Background)目的設(shè)計(jì)思想與依據(jù)研究對(duì)象與方法重要結(jié)果結(jié)論與啟示熟悉程度方向:一般涉及;根底知識(shí);學(xué)科水準(zhǔn);當(dāng)前重大進(jìn)展與趨勢(shì)領(lǐng)域:了解焦點(diǎn)與熱點(diǎn);已/正/將進(jìn)行的課題課題:(全面)歷史現(xiàn)狀展望；主要方法、手段19.4.如何收集文獻(xiàn)檢索重要文獻(xiàn);實(shí)驗(yàn)室或?qū)W者追蹤;確定本學(xué)科的重要(核心)期刊分層次收集資料課題有關(guān)文獻(xiàn);盡可能收集原著/快報(bào);要新,全本領(lǐng)域非課題文獻(xiàn);新綜述,影響大的原著本方向非本領(lǐng)域文獻(xiàn):經(jīng)典專著/綜述不同方向相關(guān)知識(shí):專著,教科書(shū)20.5.文獻(xiàn)整理運(yùn)用自己專業(yè)知識(shí)按照文獻(xiàn)的熱點(diǎn)與焦點(diǎn)參照相關(guān)綜述模式例TGFβ在腎纖維化中的意義(作用)

㈠背景知識(shí)

①腎纖維化

②TGFβ的理化特征

③TGFβ的生成與代謝、組織分布等

㈡腎纖維化病程中TGFβ的變化

①血漿的和腎組織的，蛋白與基因表達(dá)

②病程中的動(dòng)態(tài)變化與臨床病理生理表現(xiàn)

的〔相關(guān)〕關(guān)系21.5.文獻(xiàn)整理㈢TGFβ的生物學(xué)〔腎〕效應(yīng)：整體，器官，細(xì)胞及分子效應(yīng)

①外源或刺激內(nèi)源TGFβ的效應(yīng)〔在正常和疾病條件〕

②拮抗或促失活的效應(yīng)㈣TGFβ效應(yīng)的機(jī)理

受體及細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)理

TGFβ的基因表達(dá)和細(xì)胞表型改變的機(jī)理㈤腎臟疾病的TGFβ高/低表達(dá)的機(jī)理㈥TGFβ與其他腎纖維化因子間的關(guān)系〔包括遺傳易感因素〕22.5.文獻(xiàn)整理㈦TGFβ參與腎纖維化發(fā)病的臨床意義：診斷，治療，預(yù)防策略此外，常用方法學(xué)和技術(shù)的整理

腎纖維化整體活離體模型；相關(guān)細(xì)胞的培養(yǎng)；細(xì)胞增殖表型轉(zhuǎn)變；膠元測(cè)定；

TGFβ受體表達(dá)與活性檢測(cè)……23.三.如何撰寫(xiě)文獻(xiàn)綜述目的學(xué)科帶頭人與學(xué)科骨干寫(xiě)科研工作人員開(kāi)題前寫(xiě)科學(xué)情報(bào)人員寫(xiě)研究生畢業(yè)論文(?)基層人員為寫(xiě)而寫(xiě)文獻(xiàn)性與資料性,大綜述與小專論24.三.如何撰寫(xiě)文獻(xiàn)綜述小專論內(nèi)容

審定好內(nèi)容與題目(如上述例子)

要有思路，有觀點(diǎn)，提煉科學(xué)問(wèn)題，要告訴讀者什么？概述問(wèn)題的提出--研究的歷史與背景--本問(wèn)題(課題)的意義背景知識(shí)及相關(guān)根本知識(shí)〔不要寫(xiě)成教科書(shū)或講義〕本專論要論述的主要內(nèi)容,注意從課題與背景聯(lián)系的學(xué)科高度分析小結(jié)存在的問(wèn)題與今后的方向25.三.如何撰寫(xiě)文獻(xiàn)綜述資料處理按專業(yè)知識(shí)列好提綱;文獻(xiàn)(作的摘要)編號(hào)后按提綱歸類背景材料,根底知識(shí),立論依據(jù);權(quán)威甚或經(jīng)典;“教科書(shū)式或講義式〞語(yǔ)言不同意見(jiàn),學(xué)術(shù)觀點(diǎn)與資料如何處理資料的準(zhǔn)確性,尤其是翻譯,講不清楚不如不講老課題文獻(xiàn)多,新課題文獻(xiàn)太少26.三.如何撰寫(xiě)文獻(xiàn)綜述如何表達(dá)自己的學(xué)術(shù)觀點(diǎn):評(píng)述?自引?邏輯分析內(nèi)容集中,目標(biāo)明確,不要廣證博引(與研究生論文不同)參考文獻(xiàn):新(5年內(nèi)2/3);背景材料,

立論依據(jù);權(quán)威經(jīng)典;

專論內(nèi)容:新,反映進(jìn)展,可引會(huì)議,摘要及個(gè)人咨詢,準(zhǔn)確發(fā)表:刊登進(jìn)展/綜述的專業(yè)雜志(如“進(jìn)展〞“國(guó)外醫(yī)學(xué)〞);專業(yè)論文雜志;查閱國(guó)內(nèi)類似綜述有無(wú),防止重復(fù).按雜志稿約修改(留底)27.四.如何進(jìn)行科研課題設(shè)計(jì)原那么:目標(biāo)明確;構(gòu)思新穎;立論依據(jù)充分;實(shí)驗(yàn)方法恰當(dāng)選題(科研目標(biāo),目的)目標(biāo)具體:用實(shí)驗(yàn)手段解決科學(xué)問(wèn)題,問(wèn)題是什么,攻關(guān)，攀科學(xué)頂峰，“關(guān)〞、“頂峰〞是什么,在哪里?(目的與手段,工具的關(guān)系)射箭中的,忌打哪兒指哪兒，看看有什么變化，研究甚少，填補(bǔ)空白等?！叭è暩咨厦鞔_該課題的學(xué)科地位(與原創(chuàng)新關(guān)系);注意工作的積累和開(kāi)展;可參考文獻(xiàn)整理中發(fā)現(xiàn)的和未解決的問(wèn)題；將確定的目標(biāo)逐字推敲寫(xiě)下來(lái)。28.四.如何進(jìn)行科研課題設(shè)計(jì)創(chuàng)新構(gòu)思Idea的來(lái)源:臨床;文獻(xiàn);交叉學(xué)科啟迪;(學(xué)科開(kāi)展)自己工作的連續(xù)性，防止被文獻(xiàn)牽著鼻子走，或趕時(shí)髦;新技術(shù)應(yīng)用更重視新思維;交叉學(xué)科別交叉走了(轉(zhuǎn)向)29.四.如何進(jìn)行科研課題設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)思想合理,依據(jù)充分

如:證明某因子(TGFβ)是某疾病(腎纖維化)的發(fā)病因素.設(shè)計(jì):疾病時(shí)高表達(dá),與病程開(kāi)展以及某些病理變化相關(guān)外源TGFβ或誘導(dǎo)內(nèi)源TGFβ高表達(dá)加劇發(fā)病拮抗TGFβ或抑制內(nèi)源TGFβ生成或促進(jìn)滅活,消除疾病上述思路與文獻(xiàn)(or臨床)是否相悖?30.四.如何進(jìn)行科研課題設(shè)計(jì)方法恰當(dāng)(方法先進(jìn))

方法選擇：目的決定方法選擇；實(shí)驗(yàn)條件選方法；工作者熟練程度選方法；假設(shè)全部順利，所得結(jié)果能否到達(dá)設(shè)計(jì)目標(biāo)？模型經(jīng)典與新建；是否需與人一致或接近；可行性；模型與分組適合研究目的為原那么觀察指標(biāo)多〔廣〕或少〔精〕好？明確每個(gè)指標(biāo)的原理和意義背景指標(biāo)如證實(shí)疾病模型復(fù)制成功的指標(biāo)；反映質(zhì)控的指標(biāo)；反映陰性或陽(yáng)性的對(duì)照指標(biāo)等→必須是肯定的結(jié)果探索性指標(biāo)前瞻性指標(biāo)31.四.如何進(jìn)行科研課題設(shè)計(jì)建立操作程序落實(shí)每個(gè)方法預(yù)試成熟，建立程序設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)記錄與觀察內(nèi)容實(shí)驗(yàn)記錄表；單項(xiàng)歸納表；匯總表No.ControlGroup1Group2123432.6.總體設(shè)計(jì)的預(yù)測(cè)評(píng)估

⑴預(yù)期結(jié)果陰性或陽(yáng)性的解釋與再證實(shí)；審定設(shè)計(jì)能否到達(dá)目標(biāo)

⑵預(yù)期結(jié)果追蹤深入研究的方向和可行性

⑶預(yù)期結(jié)果圖表設(shè)計(jì)〔發(fā)表是否薄弱〕

⑷預(yù)期結(jié)果的學(xué)術(shù)價(jià)值和地位

〔寫(xiě)論文的Introduction,M&M〕33.藥物效應(yīng)的測(cè)量34.

一、藥物-受體相互作用的測(cè)定生化結(jié)合研究〔全部受體〕功能研究〔局部受體〕realtimemeasurementstoptimemeasurement35.1種配體與3種不同受體群的相互作用

36.配體與受體結(jié)合的特異性是相對(duì)的，與藥物濃度有關(guān)37.二、放射受體結(jié)合研究20世紀(jì)60年代，125I-ACTH、125I-血管緊張素;preparation:制備根本原理：配基與受體特異性結(jié)合，以放射性強(qiáng)弱表示結(jié)合容量。與放免分析相似〔1955年創(chuàng)造，Yalow〕38.

放射配基結(jié)合過(guò)程圖解

39.藥物濃度，可得到受體結(jié)合劑量-反響曲線參加大劑量非標(biāo)記配基，封閉受體，得到非特異性結(jié)合相應(yīng)公式計(jì)算非特異性結(jié)合、總結(jié)合固定配基濃度，改變受體量符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)：隨時(shí)間增加，結(jié)合達(dá)最大值；能被無(wú)藥物介質(zhì)逆轉(zhuǎn)40.受體結(jié)合研究時(shí)的平衡情形

41.

放射性配基結(jié)合實(shí)驗(yàn)中不同水平的特異性結(jié)合

42.特別注意點(diǎn)去除非特異性結(jié)合在一定濃度的敏感“窗〞內(nèi)進(jìn)行43.三、功能性研究測(cè)定功能性反響方法多樣經(jīng)典生理反響酶活性第二信使水平反響、表達(dá)產(chǎn)物測(cè)定報(bào)告物質(zhì)〔酶、基因等〕44.要求： 大的信-噪比：機(jī)體、儀器 根底狀態(tài)穩(wěn)定方法：找出衰減規(guī)律 設(shè)對(duì)照〔不常用〕 也必須在穩(wěn)定的“窗〞內(nèi)進(jìn)行45.

圖5

生物制備的穩(wěn)定窗

46.不同受體制備進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的前提敏感性和反響性不變〔實(shí)際不可能〕糾正系統(tǒng)不穩(wěn)定性平衡周期達(dá)穩(wěn)態(tài)對(duì)照47.圖6移動(dòng)基線對(duì)劑量-反響曲線的影響48.沖動(dòng)劑作用后指數(shù)性細(xì)胞死亡對(duì)劑量－反響曲線的影響49.組織失去敏感性后，最大反響也喪失一個(gè)系統(tǒng)不太可能充當(dāng)不同組織間根底反響變化的良好對(duì)照數(shù)據(jù)必須在穩(wěn)定的“窗〞內(nèi)進(jìn)行，防止繼發(fā)作用靠一個(gè)劑量得到的反響不能下結(jié)論50.圖8生物制備反響窗51.圖9劑量－反響曲線形狀的改變顯示繼發(fā)反響52.生物放大的根本原那么具有終端器官反響的細(xì)胞體系具有很大價(jià)值53.圖10細(xì)胞代謝指示物氫離子從細(xì)胞釋放調(diào)控示意圖

54.四、藥物反響的表述根底與給藥狀態(tài)的差值原發(fā)反響變異性較大利用差值較好有多種轉(zhuǎn)換方法55.圖11兩種描述藥物反響的方法56.圖12生物制備劑量－反響曲線誤差范圍57.

實(shí)驗(yàn)的藥物數(shù)據(jù)的不同處理直接反響以對(duì)數(shù)濃度作圖有較高精確性藥物反響減去根底值降低反響測(cè)量誤差反響值以根底水平的百分?jǐn)?shù)表示變異大以最大反響值的百分?jǐn)?shù)表示較好；需要較少的實(shí)驗(yàn)次數(shù)58.圖13直接反響以對(duì)數(shù)濃度作圖59.圖14從圖13顯示的數(shù)據(jù)所計(jì)算的delta反響60.圖15反響以根底值的百分率表示61.圖16Delta反響以最大delta反響的百分?jǐn)?shù)計(jì)算62.圖17連續(xù)累積劑量－反響曲線63.研究結(jié)果的表達(dá)64.一、研究文章的撰寫(xiě)確定投哪本雜志文章的質(zhì)量與雜志的檔次要相稱發(fā)表周期65.論文撰寫(xiě)根本格式與要求Bacon:Writingmakesanexactman.66.二、根本要求值得研究數(shù)據(jù)真實(shí)、經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理按照國(guó)際科學(xué)界公認(rèn)的格式編排文體要好，含義確切、符合邏輯67.1978年1月美、加、英醫(yī)學(xué)期刊編輯：?溫哥華宣言?1991年國(guó)際醫(yī)學(xué)期刊編輯委員會(huì)修改BrMedJ1991;302:338-3411995年人民軍醫(yī)出版社?醫(yī)學(xué)生物學(xué)文獻(xiàn)方法學(xué)?68.題目〔title〕作者姓名〔author’sname〕作者單位地址〔address〕摘要〔abstract〕關(guān)鍵詞〔keywords〕引言〔introduction〕Nature例外材料與方法〔materialsandmethods〕結(jié)果〔results〕討論〔discussion〕總結(jié)或結(jié)論〔conclusionorsummary〕致謝〔acknowledgement〕參考文獻(xiàn)〔reference〕69.題目〔title〕：短！具體；簡(jiǎn)潔：通常不超過(guò)20個(gè)字確切；通常在論文寫(xiě)完后確定“甲氨蝶呤加四物湯治療白血病46例〞防止“關(guān)于……的研究、調(diào)查、分析、觀察〞作者姓名〔author’sname〕：第一作者……correspondence;contributedequally作者單位地址〔address〕70.摘要〔abstract〕目的、方法、結(jié)果、結(jié)論。150～250個(gè)字符，或不超過(guò)1000個(gè)英文字母。關(guān)鍵詞〔keywords〕：3～7個(gè)。引言〔introduction〕：背景、本項(xiàng)研究的理論根底、為什么要進(jìn)行此研究或提出假說(shuō)。全部論文的1/10左右篇幅。引言的最后一句：目的。71.材料與方法〔materialsandmethods〕動(dòng)物：種類、數(shù)量、來(lái)源、性別、年齡、體重、飼養(yǎng)條件微生物、細(xì)胞：種、型、株、系、培養(yǎng)條件技術(shù)、方法的步驟、條件控制儀