大體解剖學(xué)緒言

Chapter1

Introduction

第一章 緒言

1.1

What’shistology?2

Whywestudyit?3

Howtostudyit?-Histologicalmethods.1 組織學(xué)研究什么?2 為什么學(xué)習(xí)組織學(xué)?3 怎樣研究組織學(xué)---組織學(xué)的方法.2.1.What’shistology?Histology(Greekwords):/histo-tissue/logia-studyof,orknowledgeofSo,histologymeanstheknowledgeoftissue,isabranchofAnatomy.組織學(xué)是解剖學(xué)的分枝學(xué)科3.Anatomy:---grossanatomy---microscopicanatomyStructuresrelatedtofunction.解剖學(xué): ---大體解剖學(xué)

---顯微解剖學(xué)結(jié)構(gòu)及其功能4.胃的大體解剖胃的細(xì)微解剖返回5.So,exactly,Histologyisasciencewhichstudythemicrostructureandtherelationshipbetweenthestructureandfunctionofhumanbeing.

組織學(xué)是研究人體微細(xì)結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功能的科學(xué)6.Cell:細(xì)胞

結(jié)構(gòu)及功能的最小單位. 1015個(gè)、200

余種↓ tissue:組織

細(xì)胞群和細(xì)胞外基質(zhì) 細(xì)胞群: 形態(tài)相似,功能相關(guān) 細(xì)胞外基質(zhì):由細(xì)胞分泌形成,是細(xì)胞生存的微 環(huán)境

7.fourbasictissue: 4種根本組織---epithelium 上皮組織↓---connectivetissue 結(jié)締組織---musculartissue 肌組織---nervoustissue 神經(jīng)組織8.organ:器官 組織以特定的形狀、結(jié)構(gòu)與功能組成器官↓system:系統(tǒng)

假設(shè)干功能相關(guān)的器官構(gòu)成系統(tǒng)9.2

Whywestudyhistology?促進(jìn)了生理學(xué)的進(jìn)步是病理學(xué)的根底促進(jìn)人類對(duì)自身的深入了解10.3.

Howtostudyit-histologicalmethods 怎樣研究組織學(xué)---組織學(xué)的方法.---Developmentofhistologydepondsonthedevelopmentoftechnique. 組織學(xué)的開(kāi)展依賴技術(shù)的開(kāi)展11.問(wèn)題解決方法觀察對(duì)象太小放大顯微鏡觀察對(duì)象無(wú)色，無(wú)反差染色〔HE染色〕觀察對(duì)象生化成分不同細(xì)胞化學(xué)、免疫組織化學(xué)觀察對(duì)象是活體培養(yǎng)研究技術(shù)12.---Histologystudiesthemicrostructures.So,weshouldhavetheaidofmicroscopetostudy.Severaltypesofmicroscopesareavailable.

組織學(xué)研究微細(xì)結(jié)構(gòu) 應(yīng)該了解顯微鏡 顯微鏡有不同種類13..Accordingtothelightsourceused,microscopescanbebasallyclassifiedas:lightmicroscope(LM) 光鏡electronmicroscope(EM) 電鏡光鏡結(jié)構(gòu)〔常稱為顯微結(jié)構(gòu)〕電鏡結(jié)構(gòu)〔又稱超微結(jié)構(gòu)，ultrastructure〕14.(1).structureofMicroscope 顯微鏡結(jié)構(gòu)

LMEM---usefulmagnification:1500X800,000X

放大---resolution:0.2μm0.2nm

分辯率15.(2).

光鏡組織樣品的制作

最常見(jiàn)的是石蠟切片

HE染色16.17.主要步驟 1.

取材

2.

固定

(福爾馬林)

3.

脫水

18.4.

透明

(二甲苯)

5.

包埋

(石蠟)19. 6.

切片:5-10μm

切片機(jī)

7.染色 8.封片

(其它方法：如：涂片法、鋪片法、磨片法、火棉膠包埋法等。)20.染色---Hematoxylin:蘇木精

---Eosin:伊紅

21.染色方法HE染色蘇木精伊紅嗜堿性結(jié)構(gòu)：細(xì)胞核粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)游離核糖體等嗜酸性結(jié)構(gòu)：細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)溶酶體、線粒體等細(xì)胞器膠原纖維等22.涂片23.染色方法HE染色法以外的所有染色法，通常是為了顯示某些用HE染色法顯示不出的細(xì)胞和結(jié)構(gòu)。如：蘇丹法——顯示脂肪鍍銀法——顯示神經(jīng)細(xì)胞、嗜銀顆粒鐵蘇木素法——顯示心肌閏盤馬氏三色法——顯示胰島細(xì)胞甲苯胺藍(lán)法——顯示糖胺多糖特殊染色24.電鏡技術(shù)

透射電鏡術(shù)(transmissionelectronmicroscopeTEM)電子束穿透樣品(超薄切片)。放大倍數(shù)為幾萬(wàn)至幾十萬(wàn)倍，分辨率可達(dá)0.2nm。標(biāo)本在熒光屏上呈黑白反差的結(jié)構(gòu)影像。被重金屬浸染呈黑色的結(jié)構(gòu)，稱電子密度高(electron-dense)；反之，淺染的局部稱電子密度低(electron-lucent)。25.(3).

電鏡組織樣品的制作

步驟類似光鏡 a.

組織塊小＜1mm3 b.

樹脂包埋26.c.

超微切片 30-50nmd.

重金屬鹽染色 檸檬酸鉛 醋酸鈾e.

電子束替換光

屏吸收電子

27.返回電鏡外觀照片28.

黑或深灰色:電子密度高 淺灰色:電子密度低29.電子顯微鏡〔electronmicroscope,EM〕技術(shù)透射電鏡〔transmissionelectronmicroscope〕：觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)掃描電鏡〔scanningelectronmicroscope)：觀察組織或細(xì)胞外表的立體結(jié)構(gòu)如細(xì)胞外表的突起、微絨毛、纖毛及細(xì)胞的分泌與吞噬行為等。30.31.(4). 組織化學(xué)1)

組織中的某種結(jié)構(gòu)成分與所加試劑發(fā)生化學(xué)反響、并呈現(xiàn)某種顏色，在顯微鏡下可觀察到32.*Periodicacidschiffreaction(PASreaction):HIO4schiff’sreagent(colourless)PAS〔過(guò)碘酸希夫〕反響，顯示多糖和糖蛋白，呈紫紅色Polysaccharides→aldehydes→magentacomples多糖 醛 紫紅色Glycogenoxidizecombine(purpleredcoloured)肝糖 氧化 結(jié)合 紫色33.34.Feulgen反響。顯示DNA的傳統(tǒng)方法，先用稀鹽酸處理，使DNA分子中脫氧核糖與嘌吟之間的連接鍵翻開(kāi)，形成醛基，再與Schiff試劑作用顯色，故此反響顯示DNA。35.2)immnohistochemistry: antigen-antibody

免疫組織化學(xué)術(shù)根據(jù)抗原、抗體特異性結(jié)合原理，檢測(cè)組織切片中的肽和蛋白質(zhì)36. 免疫細(xì)胞〔組織〕化學(xué)利用抗原〔antigen,Ag〕，抗體〔antibody〕特異結(jié)合的原理，用抗體檢測(cè)未知抗原的一種方法。37.圖10免疫組織化學(xué)原理模式圖

抗原抗體熒光素辣根過(guò)氧化物酶膠體金38.圖12免疫組織化學(xué)（辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記）胰島B細(xì)胞呈胰島素陽(yáng)性39.圖11免疫組織化學(xué)（熒光素標(biāo)記）毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞呈vWF陽(yáng)性40.3)insituhybridization:原位雜交術(shù) nucleicacid:DNA(desoxyribosenucleicacid)RNA(ribosenucleicacid) 用帶有標(biāo)記物的堿基順序的核酸探針，與細(xì)胞內(nèi)待測(cè)的核酸結(jié)合〔雜交〕，從而在原位顯示該核酸。 常用標(biāo)記物：放射性核素、地高辛41.圖14原位雜交臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞呈心房鈉尿肽陽(yáng)性42.4) 細(xì)胞培養(yǎng)(cellculture)43.細(xì)胞培養(yǎng)〔cellculture〕把從機(jī)體取得的細(xì)胞在體外模擬體內(nèi)的條件下進(jìn)行培養(yǎng)；培養(yǎng)組織塊或器官那么稱組織培養(yǎng)術(shù)或器官培養(yǎng)術(shù)用于研究細(xì)胞、組織的代謝、增殖、分化、形態(tài)和功能變化，各種理化因子對(duì)活細(xì)胞的影響培養(yǎng)條件：營(yíng)養(yǎng)、生長(zhǎng)因子、pH值、滲透壓、O2和CO2濃度、溫度，控制污染用相差顯微鏡觀察44.圖17體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞（左）HeLa細(xì)胞（右）倒置顯微鏡圖45.5) 組織工程〔tissueengineering〕用細(xì)胞培養(yǎng)術(shù)