動(dòng)物組織胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn)課件

實(shí)驗(yàn)一顯微鏡的正確使用、細(xì)胞和上皮組織實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：熟悉顯微鏡的使用方法了解石蠟切片制作過(guò)程了解細(xì)胞在光鏡下的形態(tài)、大小觀察線粒體、肝糖元、高爾基體觀察各種上皮組織形態(tài)結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)須知顯微鏡是組織學(xué)實(shí)驗(yàn)課的主要儀器，又是貴重的光學(xué)儀器，應(yīng)用顯微鏡必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格訓(xùn)練，使用時(shí)務(wù)必嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行，切勿隨意拆卸。應(yīng)按正確的方法，輕取輕放，用畢放回原處。發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，隨時(shí)報(bào)告，并記錄在顯微鏡旁的小本上。實(shí)驗(yàn)室中制作的組織切片是教師們幾十年辛勤勞動(dòng)的結(jié)果，因此，對(duì)切片要嚴(yán)加愛護(hù)。切片只能在每個(gè)實(shí)驗(yàn)小組中輪流觀察，不能隔桌相互傳遞，如果發(fā)生損壞，應(yīng)及時(shí)報(bào)告老師并處以罰款(每張切片20元)。每一排由一組長(zhǎng)負(fù)責(zé)。衛(wèi)生安排（每周一組）負(fù)責(zé)電源、顯微鏡檢查；桌子、地面每節(jié)課后均需打掃。熟悉工具—光學(xué)顯微鏡目鏡物鏡載物臺(tái)光源載物臺(tái)下面的結(jié)構(gòu)，聚光器的調(diào)節(jié)聚光器標(biāo)本推進(jìn)器聚光器光闌聚光器高度調(diào)節(jié)鈕標(biāo)本夾持器，配合標(biāo)本推進(jìn)器，調(diào)節(jié)玻片的位置調(diào)節(jié)以適應(yīng)不同的瞳距屈光度調(diào)節(jié)，適應(yīng)左右眼不同視力物鏡按順時(shí)針從低倍到高倍排列分別為4倍、10倍、40倍和100倍注意：100倍的是油鏡，必須用特殊的香柏油作介質(zhì)，用后用二甲苯擦除，平時(shí)不用。調(diào)焦旋鈕內(nèi)側(cè)大旋鈕，粗調(diào)外側(cè)小旋紐，細(xì)調(diào)調(diào)焦旋鈕左右各一用右手控制標(biāo)本位置，左手調(diào)焦顯微鏡使用前后注意事項(xiàng)前右手握住鏡臂，左手平托鏡座，保持鏡體直立，嚴(yán)禁單手提取顯微鏡。檢查顯微鏡是否完好，寫登記本。中打開光源----放置切片----調(diào)整組織切片位置調(diào)整焦距----低倍鏡觀察----高倍鏡觀察后旋暗并關(guān)閉電源；下降載物臺(tái)，取下組織切片，放回切片盒；物鏡復(fù)位，罩上防塵罩；檢查顯微鏡是否完好。10%福馬林24小時(shí)

70%酒精1.5小時(shí)

80%酒精1.5小時(shí)

95%酒精1小時(shí)

95%酒精1小時(shí)

95%酒精1.5小時(shí)無(wú)水酒精1.5小時(shí)無(wú)水酒精1.5小時(shí)二甲苯0.5小時(shí)二甲苯0.5小時(shí)石蠟（56-58度）1.0小時(shí)60度石蠟（56-58度）1.0小時(shí)60度石蠟（56-58度）1.0小時(shí)60度石蠟切片制作過(guò)程介紹脫水固定透明透蠟包埋固定脫水透明脫水，常用不同濃度的乙醇透明，用二甲苯，甲苯，脫水(不同濃度的乙醇)透明(二甲苯)固定（波恩氏液）透蠟

包埋

透蠟，在溫箱內(nèi)進(jìn)行，溫度高于石蠟熔點(diǎn)透蠟后，將組織置于盛蠟的小容器中，冷卻后成蠟塊包埋后的蠟塊和切片機(jī)蠟塊和蠟塊中間的組織夾持蠟塊刀架搖柄蠟塊也可固定在木塊上。切出微米厚度的蠟片，蠟片往往連續(xù)成條用毛筆轉(zhuǎn)移到載玻片上，烤片貼牢后可以染色蘇木精-伊紅染色法

(hematoxylin-eosinstainingmethod)

染色的步驟組織脫蠟（二甲苯1）10-15分鐘組織脫蠟（二甲苯2）3-5分鐘組織進(jìn)入100%酒精2-3分鐘組織進(jìn)入95%酒精2-3分鐘組織進(jìn)入70%酒精2-3分鐘自來(lái)水洗0.5-1分鐘自來(lái)水洗0.5-1分鐘組織進(jìn)入蘇木精染色10-15分鐘自來(lái)水洗0.5-1分鐘0.5%鹽酸酒精分色10-20秒自來(lái)水洗10-30分鐘組織進(jìn)入70%酒精2-3分鐘進(jìn)入伊紅染色3-5分鐘進(jìn)入95%酒精1-3分鐘進(jìn)入95%酒精2-3分鐘進(jìn)入100%酒精2-3分鐘進(jìn)入1005酒精2-5分鐘進(jìn)入二甲苯（1）5分鐘-10小時(shí)進(jìn)入二甲苯（2）30分鐘用中性樹膠封固顯微鏡觀察原則

-------從低倍到高倍細(xì)胞（Cell）細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)與細(xì)胞形態(tài)肝細(xì)胞(H-E染色)肌細(xì)胞血細(xì)胞神經(jīng)細(xì)胞細(xì)跑器線粒體：蠑螈肝（鐵礬蘇木精染色)高爾基復(fù)合體：豬脊神經(jīng)節(jié)（鍍銀法)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)：多極神經(jīng)元的尼氏體細(xì)胞的光鏡觀察此圖片上首先區(qū)分出細(xì)胞核然后區(qū)分出細(xì)胞形狀線粒體繪圖線粒體（mitochondrion）腎（鐵蘇木精染色）細(xì)胞核中間黑色圓點(diǎn)為核仁線粒體為細(xì)胞質(zhì)中的小黑點(diǎn)核仁：合成RNA，組裝核糖體大小亞基的前體高爾基體功能：參與細(xì)胞的分泌活動(dòng)，加工、濃縮、包裝和運(yùn)輸肝糖元過(guò)碘酸希夫反應(yīng)（PAS反應(yīng)）

多糖過(guò)碘酸氧化醛Schiff試劑紫紅色沉淀肝細(xì)胞細(xì)胞核肝糖元倒置顯微鏡

（Invertedmicroscope

）熒光顯微鏡

（fluorescencemicroscope）透射電子顯微鏡

(transmissionelectronmicroscope,TEM)掃描電子顯微鏡技術(shù)

（scanningelectronmicroscope,SEM）單層扁平上皮（腸系膜，鍍銀法）細(xì)胞核，不被染色細(xì)胞邊界，被銀染成黑色血管內(nèi)皮，單層扁平細(xì)胞核，扁圓單層扁平上皮（血管內(nèi)皮，HE染色）單層立方上皮（腎，HE染色）單層立方上皮（甲狀腺）甲狀腺上皮細(xì)胞細(xì)胞核單層柱狀上皮（腸絨毛）小腸絨毛杯狀細(xì)胞（gobletcell）假?gòu)?fù)層柱狀纖毛上皮

（pseudostratifiedcolumnarciliatedepithelium

）氣管壁氣管軟骨氣管上皮，假?gòu)?fù)層柱狀纖毛上皮細(xì)胞核，形態(tài)各異，看上去多層變移上皮（膀胱）

（transitionalepithelium）復(fù)層扁平上皮

（stratifiedsquamousepithelium

）表層細(xì)胞扁平中間細(xì)胞多邊形底層細(xì)胞矮立方形作業(yè)畫圖線粒體、單層立方上皮、單層柱狀上皮、復(fù)層扁平上皮實(shí)驗(yàn)結(jié)束上交疏松結(jié)締組織成纖維細(xì)胞脂肪細(xì)胞漿細(xì)胞肥大細(xì)胞巨噬細(xì)胞淋巴細(xì)胞膠原纖維彈性纖維成纖維細(xì)胞（fibroblast）巨噬細(xì)胞（macrophage)漿細(xì)胞（plasmacell）肥大細(xì)胞（mastcell）纖維成分

Fibroblastswithdarknuclei[A]areseenherealongwiththickcollagenfibers[B],thinelasticfibers[C]andveryfinereticularfibers[D].（400X）

致密結(jié)締組織，肌腱，縱向

（denseregularconnectivetissue,longitudinal,tendon

）

不規(guī)則致密結(jié)締組織

（denseirregularconnectivetissue）毛囊彈性組織（項(xiàng)韌帶）脂肪組織（adiposetissue）脂肪細(xì)胞脂滴細(xì)胞核雙套瓶的結(jié)構(gòu)外面透明瓶（二甲苯）二甲苯小瓶（香柏油）小棒用于取香柏油注意：需托住底下大瓶，或?qū)⒋笃恐糜谧郎?，切不可懸空。小心摔壞。取香柏油，右手捏住頂端瓶塞取二甲苯，右手捏住小瓶突出部分低倍觀察后，選取合適視野，降低載物臺(tái)，滴加香柏油在視野正中，聚光器正上方。油鏡頭此部分具有一定彈性，接觸玻片后會(huì)略微回縮。油鏡使用時(shí)，小心將鏡頭接觸油所在區(qū)域，使鏡頭與玻片貼近，然后邊觀察，邊降低載物臺(tái)，增加玻片和鏡頭距離，至視野清晰。不可邊觀察，邊提升載物臺(tái)，容易使玻片和鏡頭受損。注意香柏油中不能有小氣泡，否者需擦掉重滴。血液（blood）HowdoyoustudyBlood?血涂片的制作步驟（1）采血：抗凝血（約0.05ml）（2）推片：將推片與載玻片呈30~45度角，輕壓推片邊緣（3）干燥：將推好的血涂片在空氣中晃動(dòng)，使其迅速干燥。（4）標(biāo)記：在載玻片的一端用記號(hào)筆編號(hào)。（5）染色：瑞氏（Wright’s）或姬姆薩（Giemsa）染液。血涂片的制作血涂片應(yīng)呈舌狀，頭、體、尾清晰可見紅細(xì)胞（erythrocyte）中性粒細(xì)胞（neutrophil）嗜酸性粒細(xì)胞（eosinophil）

嗜堿性粒細(xì)胞（basophil）單核細(xì)胞（monocyte）

淋巴細(xì)胞（lymphocyte）血涂片的繪制：

把不同類型的白細(xì)胞繪入一張圖中禽類血涂片的特點(diǎn)紅細(xì)胞有核中性粒細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)有嗜酸性梭形顆粒血栓細(xì)胞為有核細(xì)胞，執(zhí)行血小板功能軟骨與骨透明軟骨（hyalinecartilage）軟骨膜軟骨陷窩軟骨細(xì)胞核，軟骨細(xì)胞本身含脂滴，細(xì)胞質(zhì)呈空泡狀軟骨囊?guī)讉€(gè)靠近的軟骨細(xì)胞稱為同源細(xì)胞群彈性軟骨（elasticcartilage）纖維軟骨（fibrouscartilage）骨骨磨片內(nèi)環(huán)骨板骨單位間骨板骨單位骨單位中央管骨陷窩骨小管骨骼?。╯keletalmuscle）心肌（cardiacmuscle）平滑?。╯moothmuscle）平滑肌細(xì)胞三種肌纖維的光鏡結(jié)構(gòu)比較骨骼肌：橫紋、核橢圓形（幾十到幾百個(gè)，位于細(xì)胞邊緣）心?。簷M紋、一般一個(gè)核（橢圓形、位于正中）、有閏盤平滑?。簾o(wú)橫紋、一核（長(zhǎng)橢圓形，位于細(xì)胞中間）、梭形神經(jīng)組織（nervoustissue）有髓神經(jīng)纖維（myelinatedfiber）無(wú)髓神經(jīng)纖維

（unmyelinatednervefiber）神經(jīng)末梢（nerveending）大腦

cerebrum小腦

cerebellum分子層

顆粒層

小腦髓質(zhì)小腦皮質(zhì)分子層顆粒層浦肯野細(xì)胞脊髓spinalcord腹角：多級(jí)神經(jīng)元神經(jīng)節(jié)ganglion脊神經(jīng)節(jié)：假單極神經(jīng)元循環(huán)系統(tǒng)大動(dòng)脈中動(dòng)脈毛細(xì)血管大靜脈靜脈瓣靜脈管腔常塌陷胸腺要求掌握1、區(qū)分胸腺被膜、小葉、皮質(zhì)和髓質(zhì)。2、胸腺小體的結(jié)構(gòu)特征。髓質(zhì)

皮質(zhì)胸腺小體淋巴結(jié)區(qū)分被膜、小梁、皮質(zhì)和髓質(zhì)，低倍鏡下找門部；皮質(zhì)淋巴小結(jié)；注意淋巴小結(jié)和周圍彌散淋巴組織和淋巴竇的區(qū)別區(qū)分髓索和髓竇；皮質(zhì)

髓質(zhì)髓索髓竇（髓質(zhì)淋巴竇）小豬淋巴結(jié)皮髓倒置脾區(qū)分被膜、小梁、白髓和紅髓。注意和淋巴結(jié)的區(qū)別。白髓中注意觀察中央動(dòng)脈、脾小結(jié)紅髓中注意觀察脾髓、脾竇。繪圖體現(xiàn)以上特征腦垂體遠(yuǎn)側(cè)部和中間部間有垂體裂，此部分的結(jié)構(gòu)是區(qū)分三部分最好的區(qū)域細(xì)胞成團(tuán)狀，周圍為毛細(xì)血管嗜堿性細(xì)胞嗜酸性細(xì)胞嫌色細(xì)胞赫令氏體中間部神經(jīng)部旁細(xì)胞，體積較大，HE染色較淺腎上腺髓質(zhì)多形區(qū)索狀區(qū)網(wǎng)狀區(qū)神經(jīng)細(xì)胞嗜鉻細(xì)胞氣管氣管軟骨切片的皺褶上皮層氣管腺假?gòu)?fù)層柱狀纖毛上皮纖毛肺內(nèi)支氣管軟骨細(xì)支氣管，黏膜常見皺襞4細(xì)支氣管到終末細(xì)支氣管呼吸性細(xì)支氣管，有肺泡開口肺泡管肺泡囊肺泡管，末端膨大肺泡囊，末端不膨大腎髓質(zhì)腎小體血管球和腎小囊壁層腎小囊臟層遠(yuǎn)端小管，無(wú)刷狀緣