第二章 血液分析儀檢驗(yàn)課件

臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)12/16/2023第二章血液分析儀檢驗(yàn)第二章血細(xì)胞分析儀檢驗(yàn)第二章血液分析儀檢驗(yàn)本章目錄1第一節(jié)血細(xì)胞分析儀檢測原理2第二節(jié)儀器分析臨床應(yīng)用3第三節(jié)儀器安裝、使用、保養(yǎng)4第四節(jié)校準(zhǔn)、性能評價(jià)及比對第五節(jié)檢驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量保證5第二章血液分析儀檢驗(yàn)

血液分析儀（hematologyanalyzer,HA）：臨床血液一般檢查最常用儀器。1953年美國Coulter申請了“粒子計(jì)數(shù)法”的技術(shù)專利，并成功研發(fā)了世界上第一臺電阻抗式血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。第二章血液分析儀檢驗(yàn)血細(xì)胞計(jì)數(shù)功能兩大功能白細(xì)胞分類功能第一節(jié)血細(xì)胞分析儀檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)

血細(xì)胞具有相對非導(dǎo)電性質(zhì)，懸浮在電解質(zhì)溶液中的血細(xì)胞通過計(jì)數(shù)小孔時(shí)，可引起小孔內(nèi)、外電流或電壓的變化，形成與血細(xì)胞數(shù)量相當(dāng)、體積大小相應(yīng)的脈沖信號，從而對血細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，并根據(jù)體積大小間接區(qū)分出細(xì)胞群。此原理又稱為庫爾特原理（Coulterprinciple）。一、電阻抗檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)細(xì)胞計(jì)數(shù)池中，小孔內(nèi)外兩個電極和稀釋液構(gòu)成一個電流回路，在負(fù)壓作用下，細(xì)胞通過小孔，電極能感應(yīng)到一個瞬間的電阻變化，并將其轉(zhuǎn)換成脈沖，脈沖的數(shù)量代表細(xì)胞數(shù)量，脈沖大小反映細(xì)胞體積大小。一、電阻抗檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)(一)血細(xì)胞計(jì)數(shù)原理一、電阻抗檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（二）血紅蛋白測定原理一、電阻抗檢測原理在被稀釋的血液中加入溶血劑后，使紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白，后者與溶血劑結(jié)合形成血紅蛋白衍生物，進(jìn)入血紅蛋白測試系統(tǒng)，在特定波長（一般在530nm～550nm）下比色，根據(jù)吸光度的變化儀器便可顯示血紅蛋白濃度。第二章血液分析儀檢驗(yàn)一、電阻抗檢測原理稀釋后的血液經(jīng)溶血素處理后，紅細(xì)胞迅速溶解，白細(xì)胞膜通透性改變使胞質(zhì)經(jīng)細(xì)胞膜滲出、脫水，胞膜緊裹在細(xì)胞核或顆粒周圍。脫水后的白細(xì)胞體積與其自然體積無關(guān)，取決于脫水后白細(xì)胞內(nèi)有形物質(zhì)的多少。

（三）白細(xì)胞分群原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)一、電阻抗檢測原理根據(jù)電阻抗原理，不同體積的白細(xì)胞通過小孔時(shí)產(chǎn)生的脈沖大小有明顯的差異。依據(jù)脈沖的大小，電阻抗法血細(xì)胞分析儀可對白細(xì)胞進(jìn)行分群。

（三）白細(xì)胞分群原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)一、電阻抗檢測原理

三分群法的第一群為小細(xì)胞區(qū)，體積為35fl～90fl，主要為淋巴細(xì)胞；第二群為中間細(xì)胞區(qū)也稱單個核細(xì)胞區(qū)，體積90fl～160fl，包括幼稚細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞、嗜堿性細(xì)胞；第三群為大細(xì)胞區(qū)，體積160fl以上，主要為中性粒細(xì)胞。

（三）白細(xì)胞分群原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)一、電阻抗檢測原理

（三）白細(xì)胞分群原理電阻抗法白細(xì)胞三分群示意圖第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（一）激光散射法將細(xì)胞懸液注入鞘液流中央，單個細(xì)胞沿著懸液和鞘液流兩股液流整齊排列，以恒定流速定向通過石英毛細(xì)管。當(dāng)細(xì)胞通過激光束被照射時(shí)，可阻擋或改變激光束的方向，產(chǎn)生與其特征相應(yīng)的各種角度的散射光。放置在石英毛細(xì)管周圍不同角度的信號檢測器可接收特征各異的散射光。二、光（化）學(xué)檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（一）激光散射法二、光（化）學(xué)檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（二）分光光度法主要用于血紅蛋白測定。

紅細(xì)胞經(jīng)溶血劑溶解釋放出血紅蛋白,并與溶血劑有關(guān)成分形成血紅蛋白衍生物，在540nm特定波長下比色，吸光度與血紅蛋白含量成正比，可直接反映血紅蛋白濃度。二、光（化）學(xué)檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)

現(xiàn)代血液分析儀主要綜合應(yīng)用了電學(xué)和光學(xué)兩大原理，用以測定血液有形成分（細(xì)胞）和無形成分（血紅蛋白）。三、聯(lián)合檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)體積(volume,V)電導(dǎo)(conductivity,C)光散射(scatter,S)應(yīng)用電阻抗原理測量細(xì)胞體積采用高頻電磁探針測量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞核、細(xì)胞內(nèi)顆粒采用激光源單色光直接掃描細(xì)胞，產(chǎn)生不同角度散射光，提供細(xì)胞形態(tài)及胞核結(jié)構(gòu)等光散射信息，以此鑒別粒細(xì)胞。

（一）體積、電導(dǎo)和光散射（VCS）法三、聯(lián)合檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（一）體積、電導(dǎo)和光散射（VCS）法三、聯(lián)合檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（二）光散射與細(xì)胞化學(xué)法

當(dāng)細(xì)胞被激光束照射時(shí)，細(xì)胞因體積大小、細(xì)胞成分、細(xì)胞核形狀、染色情況等各種特性的不同，可阻擋或改變激光束的方向，產(chǎn)生與細(xì)胞特征相應(yīng)的各種角度的散射光。檢測不同角度的散射光信號，可分辨出各類細(xì)胞。三、聯(lián)合檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（二）光散射與細(xì)胞化學(xué)法1．過氧化物酶染色通道2．嗜堿性粒細(xì)胞/核分葉通道三、聯(lián)合檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（三）多角度偏振光散射法

應(yīng)用固體激光流式細(xì)胞熒光技術(shù)，多角度檢測白細(xì)胞和分類。三、聯(lián)合檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（四）電阻抗、射頻、流式細(xì)胞術(shù)與核酸熒光染色法

1．白細(xì)胞分類通道（DIFF通道）2．白細(xì)胞/嗜堿性粒細(xì)胞（WBC/BASO）通道3．未成熟髓細(xì)胞信息（IMI）通道

采用半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞技術(shù)結(jié)合核酸熒光染色技術(shù)進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類。三、聯(lián)合檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（四）電阻抗、射頻、流式細(xì)胞術(shù)與核酸熒光染色法三、聯(lián)合檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（五）雙鞘流技術(shù)和細(xì)胞化學(xué)染色法

在流式通道中有2個鞘流裝置，細(xì)胞經(jīng)第1束鞘流后通過阻抗微孔測定細(xì)胞的真實(shí)體積，然后經(jīng)第2束鞘流后到達(dá)光窗，測定細(xì)胞的光吸收，分析細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)。三、聯(lián)合檢測原理第二章血液分析儀檢驗(yàn)血細(xì)胞分析儀各項(xiàng)檢測參數(shù)及臨床應(yīng)用一血細(xì)胞分析儀細(xì)胞分布圖及臨床應(yīng)用二血細(xì)胞分析儀常見報(bào)警和干擾因素三血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果顯微鏡復(fù)查規(guī)則四第二節(jié)血細(xì)胞分析儀分析臨床應(yīng)用第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（一）紅細(xì)胞參數(shù)及臨床應(yīng)用一、血細(xì)胞分析儀各項(xiàng)檢測參數(shù)及臨床應(yīng)用血細(xì)胞分析儀紅細(xì)胞系列檢測參數(shù)第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（一）紅細(xì)胞參數(shù)及臨床應(yīng)用一、血細(xì)胞分析儀各項(xiàng)檢測參數(shù)及臨床應(yīng)用

RDW是反映紅細(xì)胞體積大小異質(zhì)性的參數(shù)，以標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)來表示（CV%），有助于貧血的診斷與鑒別診斷。⑴紅細(xì)胞體積分布寬度（RDW）MCVRDW分類意義減低正常小細(xì)胞均一性輕型β-珠蛋白生成障礙性貧血增高小細(xì)胞不均一性缺鐵性貧血正常正常正細(xì)胞均一性慢性病性貧血、再生障礙性貧血、白血病增高正細(xì)胞不均一性骨髓纖維化增高正常大細(xì)胞均一性MDS、再生障礙性貧血增高大細(xì)胞不均一性巨幼細(xì)胞貧血貧血的RDW和MCV分類第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（一）紅細(xì)胞參數(shù)及臨床應(yīng)用一、血細(xì)胞分析儀各項(xiàng)檢測參數(shù)及臨床應(yīng)用

HDW是反映紅細(xì)胞內(nèi)Hb含量異質(zhì)性的參數(shù)，用單個紅細(xì)胞Hb含量的標(biāo)準(zhǔn)差表示。（2）紅細(xì)胞血紅蛋白分布寬度（HDW）第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（二）白細(xì)胞參數(shù)一、血細(xì)胞分析儀各項(xiàng)檢測參數(shù)及臨床應(yīng)用血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞系列檢測參數(shù)第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（三）血小板參數(shù)一、血細(xì)胞分析儀各項(xiàng)檢測參數(shù)及臨床應(yīng)用血細(xì)胞分析儀血小板系列檢測參數(shù)第二章血液分析儀檢驗(yàn)血細(xì)胞直方圖二、血細(xì)胞分析儀細(xì)胞分布圖及臨床應(yīng)用以測定的細(xì)胞體積（大?。闄M坐標(biāo)，細(xì)胞出現(xiàn)的相對頻率（數(shù)量）為縱坐標(biāo)，可繪制的血細(xì)胞直方圖，主要包括白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板三種直方圖。第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（一）紅細(xì)胞直方圖的臨床應(yīng)用二、血細(xì)胞分析儀細(xì)胞分布圖及臨床應(yīng)用正常紅細(xì)胞直方圖幾乎為兩側(cè)對稱、較狹窄的正態(tài)分布曲線，主要分布在50fl～200fl區(qū)域。第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（一）紅細(xì)胞直方圖的臨床應(yīng)用二、血細(xì)胞分析儀細(xì)胞分布圖及臨床應(yīng)用%

100200300400(fl)正態(tài)分布,峰頂在82fl~96fl第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（一）紅細(xì)胞直方圖的臨床應(yīng)用二、血細(xì)胞分析儀細(xì)胞分布圖及臨床應(yīng)用不同類型貧血紅細(xì)胞直方圖的變化和常見原因第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（二）白細(xì)胞直方圖的臨床應(yīng)用二、血細(xì)胞分析儀細(xì)胞分布圖及臨床應(yīng)用電阻抗型血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞直方圖為具有3個峰的光滑曲線，從左至右分別為：為淋巴細(xì)胞（小細(xì)胞群）、單個核細(xì)胞（中間細(xì)胞群）和中性粒細(xì)胞（大細(xì)胞群）或相當(dāng)大小的細(xì)胞。第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（二）白細(xì)胞直方圖的臨床應(yīng)用二、血細(xì)胞分析儀細(xì)胞分布圖及臨床應(yīng)用35f1—90f1160fl以上90f1～160f1第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（二）白細(xì)胞直方圖的臨床應(yīng)用二、血細(xì)胞分析儀細(xì)胞分布圖及臨床應(yīng)用第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（三）血小板直方圖的臨床應(yīng)用二、血細(xì)胞分析儀細(xì)胞分布圖及臨床應(yīng)用正常血小板直方圖呈左偏態(tài)分布，主要集中在2fl～30fl范圍內(nèi)，主峰在7.6fl～13.1fl之間。第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（三）血小板直方圖的臨床應(yīng)用二、血細(xì)胞分析儀細(xì)胞分布圖及臨床應(yīng)用

102030(fl)%呈偏態(tài)，峰頂5fl~10fl第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（四）散點(diǎn)圖的臨床應(yīng)用二、血細(xì)胞分析儀細(xì)胞分布圖及臨床應(yīng)用不同的檢測原理，坐標(biāo)上的散點(diǎn)所在象限平面圖上的位置，如上下（高低）、左右、前后（可重疊）或散點(diǎn)群的疏密，均與相應(yīng)類別的細(xì)胞形態(tài)、體積、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、胞核、胞質(zhì)及胞質(zhì)顆粒數(shù)量等特性密切相關(guān)。第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（四）散點(diǎn)圖的臨床應(yīng)用二、血細(xì)胞分析儀細(xì)胞分布圖及臨床應(yīng)用1.白細(xì)胞散點(diǎn)圖第二章血液分析儀檢驗(yàn)

（四）散點(diǎn)圖的臨床應(yīng)用二、血細(xì)胞分析儀細(xì)胞分布圖及臨床應(yīng)用2.紅細(xì)胞散點(diǎn)圖第二章血液分析儀檢驗(yàn)三種形式圖形符號文字標(biāo)本自身檢測環(huán)境報(bào)警Text常見的干擾因素Text三、血細(xì)胞分析儀常見報(bào)警和干擾因素第二章血液分析儀檢驗(yàn)四、血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果顯微鏡復(fù)查規(guī)則2005年，國際實(shí)驗(yàn)室血液學(xué)學(xué)會提出了顯微鏡復(fù)查的41條建議性標(biāo)準(zhǔn)。但由于各臨床檢驗(yàn)室使用的儀器不同，服務(wù)的患者人群也有差異，“41條建議性標(biāo)準(zhǔn)”尚處于實(shí)踐檢驗(yàn)中，目前還沒有被公認(rèn)的復(fù)查標(biāo)準(zhǔn)。各實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)ISLH建議的41條復(fù)檢規(guī)則，并結(jié)合具體情況來制訂切合實(shí)際、可操作的復(fù)查標(biāo)準(zhǔn)。第二章血液分析儀檢驗(yàn)四、血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果顯微鏡復(fù)查規(guī)則血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果手工涂片復(fù)查真陽性標(biāo)準(zhǔn)血涂片顯微鏡檢查陽性:發(fā)現(xiàn)異常形態(tài)細(xì)胞血涂片顯微鏡檢查陽性:發(fā)現(xiàn)異常類型細(xì)胞紅細(xì)胞形態(tài)異常:2+/中等量或更多；或發(fā)現(xiàn)瘧原蟲原始細(xì)胞:≥1個血小板形態(tài)異常（巨大血小板）:2+/中等量或更多晚幼粒細(xì)胞:＞2個血小板凝塊:偶見或時(shí)而可見中幼粒/早幼粒細(xì)胞:≥1個D?hle小體:2+/中等量或更多非典型淋巴細(xì)胞:＞5個中毒顆粒:2+/中等量或更多有核紅細(xì)胞:≥1個空泡:2+/中等量或更多漿細(xì)胞:≥1個第二章血液分析儀檢驗(yàn)工作環(huán)境工作電壓儀器安裝儀器擺放檢測原理操作程序日保養(yǎng)周保養(yǎng)月保養(yǎng)檢測器維護(hù)液路維護(hù)機(jī)械傳動部分維護(hù)第三節(jié)血細(xì)胞分析儀安裝、使用、保養(yǎng)和維護(hù)安裝使用保養(yǎng)維護(hù)第二章血液分析儀檢驗(yàn)總體評價(jià)性能評價(jià)1．校準(zhǔn)條件2．校準(zhǔn)品定值3．建立儀器校準(zhǔn)和校準(zhǔn)驗(yàn)證程序4．保證試劑質(zhì)量應(yīng)對同一實(shí)驗(yàn)室不同血液分析儀測定結(jié)果進(jìn)行比對，相關(guān)性良好后，定期校準(zhǔn)一臺性能較好的血細(xì)胞分析儀，將它作為參比儀器校準(zhǔn)性能評價(jià)比對第四節(jié)血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)、性能評價(jià)及比對第二章血液分析儀檢驗(yàn)分析前分析中分析后第五節(jié)血細(xì)胞分析儀檢驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量保證檢驗(yàn)人員的要求合適的檢測環(huán)境合格的血液分析儀配套試劑合格的檢測標(biāo)本儀器啟動室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)本檢測儀器清潔檢驗(yàn)結(jié)果審核檢驗(yàn)結(jié)果解釋建立危急值通知標(biāo)本的保存儀器維護(hù)和保養(yǎng)定