超短波聯(lián)合電針治療家兔實(shí)驗(yàn)性膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究

超短波聯(lián)合電針治療家兔實(shí)驗(yàn)性膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究

近年來，臨床報(bào)告主要集中在膝蓋周圍的經(jīng)絡(luò)穴位上。傳統(tǒng)的針灸、針灸、脈象刺、電針、針刀等方法已被用于膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎（koa）的治療。KOA是中老年人易患的一種常見病、多發(fā)病,以可動(dòng)關(guān)節(jié)軟骨退行性變,繼而發(fā)生骨質(zhì)和滑膜病變?yōu)樘卣?。軟骨?xì)胞壞死和軟骨基質(zhì)破壞所致的軟骨降解是其主要病理環(huán)節(jié)。本研究是在臨床實(shí)踐基礎(chǔ)上,以日本大耳兔實(shí)驗(yàn)性膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎模型,觀察超短波聯(lián)合電針對兔實(shí)驗(yàn)性膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的血清中過氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量變化的影響,探討超短波聯(lián)合電針防治膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制,為臨床運(yùn)用和深入研究其作用機(jī)理提供理論依據(jù)。1材料表面1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心健康日本大耳白兔55只[普通級(jí),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證號(hào):SYXK(陜)2007-003],雌雄不限,體重2.5~3kg,6~8月齡,由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。常規(guī)飼料喂養(yǎng),自由飲水,按時(shí)通風(fēng)、沖刷糞便,保持環(huán)境安靜。1.2超短波電療機(jī)組NO、SOD和MDA試劑盒(由南京建成生物工程研究所提供,批號(hào)分別為:20080125;20071026;20080116);五官超短波電療機(jī),波長7.3m,工作頻率(50±1.5)MHz(WCH-B型,南京醫(yī)用儀器廠);電針儀(6805B型,廣東省汕頭市醫(yī)用設(shè)備廠);順和牌一次性無菌針灸針(0.2mm×7mm,蘇州市華倫醫(yī)療用品有限公司生產(chǎn),批號(hào)20080126);醫(yī)用角度尺(規(guī)格32cm×14cm×3cm,常州市建本醫(yī)療康復(fù)器材有限公司)。2方法2.1動(dòng)物造模檢測55只日本大耳白兔適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,按隨機(jī)、對照、均衡的原則,分為空白對照組10只和造模45只。造模的45只動(dòng)物均行右后肢膝關(guān)節(jié)伸直位固定6周的方法造模。6周后采用簡單隨機(jī)方法抽取其中5只行造模結(jié)果檢測。確定造模成功后,將余下40只家兔按照隨機(jī)數(shù)字表法分為模型對照組、電針治療組、超短波治療組、聯(lián)合治療組,每組10只。2.2超短波治療組空白對照組和模型對照組僅予常規(guī)飼養(yǎng),不作任何特殊處理。電針治療組取家兔右后肢“血?！?、“梁丘”、“陽陵泉”和“足三里”穴,以毫針直刺或斜刺8~15mm,得氣后,針柄接電針治療儀,電壓6V,疏密波,頻率1.6~2Hz,輸出強(qiáng)度1~2mA,以局部肌肉輕微顫動(dòng)為度,每次留針25min,每日1次,連續(xù)治療30天。超短波治療組使用儀器為國產(chǎn)超短波電療機(jī),兩個(gè)直徑為9cm的圓電極于右后肢膝關(guān)節(jié)對置,間隙2~3cm,微溫量,每次治療20min,每日1次,連續(xù)治療30天。聯(lián)合治療組采用超短波治療組治療方法后30min繼續(xù)采用電針治療組治療方法,每日1次,連續(xù)30天。治療結(jié)束后第30天末次治療后1h,將4組動(dòng)物分組處理,先測量右后肢膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度后心臟穿刺取血以備檢測NO、SOD和MDA。2.3觀察指標(biāo)和方法2.3.1關(guān)節(jié)活動(dòng)量測試測量采用醫(yī)用角度尺測量右后肢膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度,分別于治療前后各測1次。2.3.2血液特性檢測將兔仰臥固定于兔臺(tái)上,剪去心前區(qū)毛,在左側(cè)胸壁第3~4肋間,用左手食指摸到心搏最明顯處,常規(guī)消毒,右手持帶10號(hào)針頭的10ml一次性注射器,從心搏最強(qiáng)處垂直穿刺,進(jìn)針約3cm,落空感時(shí)即有血液涌入,取血5ml,肝素抗凝,離心分離出血清,-20℃保存,按試劑盒說明方法定測。SOD測定法采用黃嘌呤氧化酶法(羥胺法);MDA測定采用硫代巴比妥(TBA)法;NO測定采用硝酸還原酶法。2.4統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(xˉ±s)(xˉ±s)表示,做多樣本均數(shù)間兩兩比較采用q檢驗(yàn)。3結(jié)果3.1各組兔膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度改善情況比較治療前與空白對照組比較,其余4組與其均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01);治療后超短波治療組、電針治療組、聯(lián)合治療組的兔膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度明顯改善,與模型對照組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),并且聯(lián)合治療組明顯優(yōu)于電針治療組和超短波治療組(P<0.01)。表明超短波、電針治療能夠改善膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎所致膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度的改變,且聯(lián)合治療臨床療效更顯著。3.2各組血清sod、mda和no含量的比較與空白對照組比較,其余4組家兔血清SOD含量降低、NO和MDA含量升高(P<0.01)。與模型對照組比較,電針治療組、超短波治療組、聯(lián)合治療組均可使血清SOD含量增加、MDA和NO含量下降(P<0.01);并且聯(lián)合治療組同電針治療組、超短波治療組比較血清SOD顯著高于后兩組,MDA、NO顯著低于后兩組(P<0.01)。4超短波和電針治療膝關(guān)節(jié)骨性預(yù)防損傷的作用機(jī)制氧自由基損傷是導(dǎo)致關(guān)節(jié)衰老和變性的重要因素,過量的氧自由基抑制軟骨細(xì)胞增殖,引起軟骨細(xì)胞死亡,抑制軟骨基質(zhì)膠原和蛋白多糖的合成,加速軟骨降解,導(dǎo)致軟骨的損傷。血清MDA和SOD水平可間接地反映體內(nèi)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的狀況。SOD是為防御新陳代謝及其它生命活動(dòng)中產(chǎn)生的氧自由基(OFR)對機(jī)體損傷和破壞,在組織和細(xì)胞中建立和形成一套完善的抗氧化防御體系中的一種重要金屬酶,SOD對細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用,一旦炎癥發(fā)生,SOD在反應(yīng)中大量消耗,必然含量降低。SOD為超氧陰離子的清除劑,MDA是脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物,二者是檢測機(jī)體血氧自由基水平的常用配對指標(biāo),氧自由基參與骨性關(guān)節(jié)炎的病理過程,通過對軟骨基質(zhì)生理功能的改變,進(jìn)而使軟骨細(xì)胞退變、死亡。NO是一種不穩(wěn)定的自由基,具有廣泛的生物學(xué)作用,其含量與病情的嚴(yán)重程度成正相關(guān)。在本實(shí)驗(yàn)中采用膝關(guān)節(jié)石膏制動(dòng)造模方法建立的膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型,其機(jī)制主要在于:兔膝關(guān)節(jié)伸直位固定時(shí),由于限制了關(guān)節(jié)的運(yùn)動(dòng),跨越關(guān)節(jié)的肌肉、關(guān)節(jié)囊持續(xù)收縮,使關(guān)節(jié)面的壓力增加,同時(shí)異常壓力狀態(tài)下黏蛋白、透明質(zhì)酸的成分減少,導(dǎo)致關(guān)節(jié)面的機(jī)械磨損;滑膜與軟骨的黏連影響了軟骨細(xì)胞營養(yǎng)的攝取,軟骨細(xì)胞發(fā)生退變;關(guān)節(jié)局部血流滯緩,骨內(nèi)壓增高。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為,膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎為肝、脾、腎虧虛,風(fēng)、寒、濕外襲,客于局部,經(jīng)絡(luò)不通所致。臨床上針灸治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎已經(jīng)取得了較為肯定的療效,多以膝關(guān)節(jié)周圍局部腧穴為主。本實(shí)驗(yàn)以經(jīng)絡(luò)辨證和臟腑辨證為依據(jù),選用了臨床上治療膝關(guān)節(jié)炎頻率較高的4個(gè)穴位。陽陵泉為筋會(huì)穴,膝為筋之府,故陽陵泉善治膝病;血海為活血之要穴,與陽陵泉配伍有舒筋活絡(luò)、利關(guān)節(jié)的作用,主治膝關(guān)節(jié)痛;足三里是治療下肢痿痹的要穴;梁丘具有舒筋活絡(luò)的作用,與足三里配伍有溫經(jīng)通絡(luò)的作用。超短波能作用于機(jī)體深層組織,進(jìn)一步改善其血液循環(huán),以促進(jìn)滲出物的吸收、降低關(guān)節(jié)周圍及韌帶的張力,有利于改善關(guān)節(jié)軟骨的營養(yǎng)供給,使軟骨損傷的部位得以有效修復(fù),同時(shí)還有很好的止痛功效。超短波治療可以促進(jìn)炎性滲出物及代謝廢物排泄加快,使局部肌張力降低、疼痛緩解,還可以改善局部微循環(huán),緩解靜脈淤滯導(dǎo)致的骨內(nèi)高壓,延緩膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎病理變化過程。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明,超短波、電針、超短波聯(lián)合電針均能顯