外用芒硝對(duì)大鼠外傷性血瘀模型的影響

外用芒硝對(duì)大鼠外傷性血瘀模型的影響

芒硝是用未經(jīng)處理和精制的硫酸鹽芒硝工藝精制而成的晶體。主要是含有硫酸鈉（na2so4）的水硫酸鈉（10h2o），如《醫(yī)學(xué)同益記》。2005版藥典記載其功能為瀉熱通便,潤(rùn)燥軟堅(jiān),清火消腫;用于實(shí)熱便秘、大便燥結(jié)、積滯腹痛、腸癰腫痛,外治乳癰、痔瘡腫痛?，F(xiàn)代臨床報(bào)道芒硝外用可用于靜脈炎、產(chǎn)后乳脹、骨關(guān)節(jié)腫及軟組織損傷、腸梗阻等療效確切。本文通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究為芒硝臨床外用提供依據(jù)。材料表面1.動(dòng)物清潔級(jí)Wistar大鼠,體質(zhì)量180-200g,雌雄各半,由河北省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào)804122。方法1.非開(kāi)放性可變性模型材料的制備取體質(zhì)量180-200g大鼠50只,雌雄各半,隨機(jī)均勻分為大、小劑量芒硝組、田七跌打風(fēng)濕膏組、模型組、空白組,每組10只。實(shí)驗(yàn)前1d將大鼠右后肢脫毛,并測(cè)量其周長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天除空白組外,將其余各組大鼠固定,將1根直徑為3cm、高25cm的空心管置于大鼠右后肢軟組織上,然后把1根重1000g鈍頭鐵杵,自空心管頂端自由落體擊中大鼠右后肢軟組織,造成有明顯皮下出血及腫脹的非開(kāi)放性軟組織損傷模型。造模型后測(cè)量各組大鼠右后肢周長(zhǎng)并進(jìn)行癥狀積分,然后給于相應(yīng)藥物,大、小劑量芒硝組分別以藥棉吸附40%、20%芒硝溶液后濕敷(用量約為1.5mL/cm2),田七跌打風(fēng)濕膏組涂抹田七跌打風(fēng)濕膏(損傷部位均勻涂2mm厚,約0.25g/cm2),模型組和空白組以藥棉吸附生理鹽水后濕敷(用量約為1.5mL/cm2),給藥后均以保鮮膜覆蓋膠布固定,每天保持藥物接觸皮膚6h,6h后以溫生理鹽水清洗用藥局部。每天用藥1次,連續(xù)用藥5d。2.瘀血、水腫、單一分每天記錄造模局部癥狀積分和周長(zhǎng)變化(周長(zhǎng)變化=用藥后周長(zhǎng)-用藥前周長(zhǎng),小于0按0計(jì))。損傷部位積分評(píng)定方法:皮下瘀血:多量瘀血,計(jì)2分;少量點(diǎn)狀瘀血,計(jì)1分;無(wú)瘀血者,計(jì)0分。肌肉腫脹:明顯腫脹,計(jì)2分;稍有腫脹,計(jì)1分;無(wú)腫脹者,計(jì)0分。肌肉顏色:紫暗色深,計(jì)2分;暗紅色淺,計(jì)1分;色澤正常,計(jì)0分。于第6d早上大鼠眼眶取血,檢測(cè)血液流變學(xué)指標(biāo),取大鼠造模腫脹局部組織用10%甲醛固定,常規(guī)病理切片,觀察病理變化。3.統(tǒng)計(jì)方法數(shù)據(jù)分析用SPSS13.0fowindows統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)資料的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,計(jì)量資料用表示,計(jì)數(shù)資料采用秩和分析。大鼠右術(shù)后損傷局部癥狀積分1.由表1可看出,與空白組比較,模型組大鼠在第1、3、5d右后肢損傷局部癥狀積分均顯著升高(P<0.01),說(shuō)明造模成功。與模型組比,造模第1d,給藥各組大鼠右后肢損傷癥狀積分無(wú)顯著性差異,說(shuō)明分組均勻;造模第3d大鼠右后肢損傷局部癥狀積分,小劑量芒硝組可顯著降低(P<0.01),大劑量芒硝組及和田七跌打風(fēng)濕膏組明顯降低(P<0.05);造模第5d大鼠右后肢損傷局部癥狀積分,小劑量芒硝組和田七跌打風(fēng)濕膏組大鼠可顯著降低(P<0.01),大劑量芒硝組明顯降低(P<0.05)。2.由表2可看出,與空白組比較,模型組大鼠在第1-5d右后肢周長(zhǎng)變化均顯著升高(P<0.01),說(shuō)明造模成功。與相應(yīng)模型組比較,在用藥第2-5d,小劑量芒硝組和田七跌打風(fēng)濕膏組大鼠右后肢周長(zhǎng)變化值均顯著減小(P<0.01);在用藥第4d,大劑量芒硝組大鼠右后肢周長(zhǎng)變化值明顯減小(P<0.05),第5d,大劑量芒硝組大鼠右后肢周長(zhǎng)變化值顯著減小(P<0.01)。2.光度計(jì)和儀器WFZUV2000型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),尤尼卡(上海)儀器有限公司生產(chǎn);FA(N)/JA(N)系列電子天平,上海民橋精密儀器有限公司。3.各組大鼠右術(shù)后皮膚主動(dòng)防御機(jī)制比較芒硝,購(gòu)自河南張仲景大藥房股份有限公司,經(jīng)河南中醫(yī)學(xué)院中藥鑒定教研室鑒定為含硫酸鈉的天然礦物經(jīng)精制而成的結(jié)晶體NatriiSulfas,含水硫酸鈉(Na2SO4·10H2O);田七跌打風(fēng)濕膏,廣州白云山制藥股份有限公司,批號(hào):N1001;喜療妥,DAIICHISANKYOEUROPEGmbH,批號(hào):456004;二甲苯,天津市化學(xué)試劑三廠,批號(hào):20051028;伊文思蘭,南京奧多福尼生物科技有限公司,批號(hào):20050406;甘露醇,鄭州永和制藥有限公司,生產(chǎn)批號(hào):20080306;氯化鈉注射液,鄭州永和制藥廠有限公司,批號(hào):080302221;甲醛,中國(guó)萊陽(yáng)市雙雙化工有限公司,生產(chǎn)批號(hào):20070519。3.從表3可看出,與空白組比,模型組全血黏度、全血還原黏度、全血低切相對(duì)黏度及紅細(xì)胞聚集指數(shù)均顯著性升高(P<0.01),血漿黏度可明顯升高(P<0.05),說(shuō)明出現(xiàn)血瘀癥狀。與模型組相比,大、小劑量芒硝組和田七跌打風(fēng)濕膏組可顯著降低全血黏度、全血低切還原黏度及紅細(xì)胞聚集指數(shù)(P<0.01);大劑量芒硝組可明顯降低紅細(xì)胞壓積、全血高切還原黏度、紅細(xì)胞剛性指數(shù)和全血高低切相對(duì)黏度(P<0.05),小劑量芒硝組可顯著降低全血高切還原黏度、紅細(xì)胞剛性指數(shù)和全血高低切相對(duì)黏度(P<0.01),可明顯降低血漿黏度、紅細(xì)胞壓積(P<0.05)。4.實(shí)驗(yàn)各組大鼠右后肢皮膚血瘀組織病理組織學(xué)觀察結(jié)果如下:空白組大鼠皮膚表皮各層結(jié)構(gòu)和真皮層結(jié)構(gòu)中毛囊、汗腺、皮脂腺均正常;模型組大鼠皮膚表皮各層結(jié)構(gòu)和真皮結(jié)構(gòu)中的局部組織嚴(yán)重受損,表皮結(jié)構(gòu)缺損,真皮組織可見(jiàn)殘存毛囊、汗腺、皮脂腺組織并有大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn);大劑量芒硝組大鼠受損皮膚表皮未有恢復(fù),而真皮層結(jié)構(gòu)中的毛囊、汗腺、皮脂腺明顯得到恢復(fù)只見(jiàn)少數(shù)的炎細(xì)胞浸潤(rùn);小劑量芒硝組大鼠受損皮膚表皮有所恢復(fù)而真皮層結(jié)構(gòu)中毛囊、汗腺、皮脂腺明顯得到恢復(fù),可見(jiàn)少數(shù)炎細(xì)胞浸潤(rùn);田七跌打風(fēng)濕膏組大鼠皮膚表皮的各層結(jié)構(gòu)和真皮層結(jié)構(gòu)中毛囊、汗腺、皮脂腺明顯恢復(fù)。從表4可看出,經(jīng)Ridit檢驗(yàn),與空白組比,模型組出現(xiàn)顯著的病理組織損傷(P<0.01);與模型組比,大、小劑量芒硝組及田七跌打風(fēng)濕膏組均可顯著改善大鼠局部病理組織損傷(P<0.01)。不同劑量連續(xù)劑對(duì)大鼠右后期損傷癥狀積分的影響目前常用鐵杵擊大鼠右后肢軟組織造外傷性血瘀模型,右后肢出現(xiàn)紅腫、瘀血、青紫,此與臨床軟組織損傷癥狀一致。在組織損傷早期,出現(xiàn)由于血管損傷,擴(kuò)張充血,微小血栓的產(chǎn)生致微循環(huán)不暢,中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞等炎性物質(zhì)在局部浸潤(rùn),使血管壁通透性增加,產(chǎn)生紅腫、瘀血;及時(shí)冷敷可減輕局部組織充血和出血,使毛細(xì)血管收縮,微血管通透性降低,減輕局部充血腫脹。本實(shí)驗(yàn)采用具有苦咸之性的芒硝外敷治療,中醫(yī)認(rèn)為芒硝苦能瀉熱,咸能軟堅(jiān),其性善消,入血分,故善消瘀血,能通化一切瘀滯;本品物理性質(zhì)比較特殊,主要成份是鹽類(lèi)物質(zhì),具有良好的吸潮性,與水相溶,滲透性強(qiáng),冰點(diǎn)低,自身有吸收熱量的特性,可使毛細(xì)血管收縮,減輕充血腫脹。為較好判斷芒硝外用對(duì)外傷性血瘀的療效,本實(shí)驗(yàn)對(duì)右后肢損傷癥狀積分變化、右后肢同一位置的周長(zhǎng)變化、血液流變學(xué)指標(biāo)及病理變化進(jìn)行評(píng)價(jià);損傷癥狀積分變化及周長(zhǎng)變化能直觀的反映損傷局部組織的腫脹程度,檢測(cè)后肢周長(zhǎng)更方便;血瘀的形成與血液流變性、血流動(dòng)力學(xué)變化有關(guān),血液流變學(xué)檢測(cè)是觀察血瘀情況的一個(gè)重要指標(biāo);組織病理學(xué)變化可以反應(yīng)受損組織各層皮膚的炎細(xì)胞浸潤(rùn)程度和愈合情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示小劑量芒硝組大鼠右后肢損傷癥狀積分、周長(zhǎng)變化及病理變化的影響比大劑量芒硝組效果好;小劑量芒硝組可顯著降低全血黏度、全血低切還原黏度及紅細(xì)胞聚集指數(shù)、全血高切還原黏度、紅細(xì)胞剛性指數(shù)和全血高低切相對(duì)黏度,明顯降低血漿黏度、紅細(xì)胞壓積;大劑量芒硝組可顯著降低血液流變學(xué)的部分指標(biāo),提示芒硝外用可以消腫,改善血液循環(huán),但量效關(guān)系不明顯,甚至大劑量芒硝外用藥效不如小劑量芒硝外敷效果好;其可能的原因是,每次吸附芒硝溶液的藥棉給大鼠外敷有6h,大劑量芒硝組因濃度高,一定敷藥時(shí)間后