動物細胞融合技術及應用 高二生物人教版選擇性必修三

第三節(jié)

動物細胞工程及應用第3課時

動物細胞融合技術及應用特異性高：雙抗夾心法保證了抗體交叉反應低，從而有效提高了免疫學方法的特異性，減少假陽性的發(fā)生。第三節(jié)

動物細胞工程及應用第3課時

動物細胞融合技術及應用【學習目標】1.闡述動物細胞融合技術的概念、方法、原理2.利用細胞融合的知識分析單克隆抗體的制備過程、特點3.通過分析新冠抗原試劑盒檢測原理，體會單克隆抗體的應用，并能將所學知識應用于社會生產(chǎn)生活實踐，參與社會事件的探討。探究一

動物細胞融合技術【活動一】自主閱讀課本P66-67，填寫學案內(nèi)容。探究一

動物細胞融合技術1.概念：在一定條件下將_______或_______動物細胞，通過

、

或

方法，結(jié)合形

細胞的技術。2.誘導方法：物理方法

化學方法

等

生物方法

等

兩個多個生物物理化學電融合誘導1個PEG誘導滅活的病毒探究一

動物細胞融合技術【活動一】自主閱讀課本，填寫學案內(nèi)容。3.融合的結(jié)果：

___________

4.完成的標志：

5.融合的原理：

形成雜種細胞細胞核融合細胞質(zhì)膜有一定的流動性【檢測一】判斷：1.植物體細胞雜交技術與動物細胞融合技術誘導融合的原理、方法相同。（

）2.二倍體動物細胞融合后的雜種細胞仍是二倍體細胞。（

）3.植物體細胞雜交技術與動物細胞融合技術的結(jié)果不同。（

）探究一動物細胞融合技術XX√探究一動物細胞融合技術三、應用：在疾病診斷、治療等領域展現(xiàn)出美好的前景。特別是大量制備抗體。傳統(tǒng)制備抗體的方法過程：向小鼠反復注射某種抗原小鼠產(chǎn)生抗體從血清中分離相應抗體缺

點

?資料：1.從血清中獲得相應抗體，需要大量小鼠血液。2.動物在生存環(huán)境中會接觸多種抗原，產(chǎn)生數(shù)百萬種以上抗體。傳統(tǒng)制備抗體的方法產(chǎn)量低純度低、特異性差如何獲得產(chǎn)量高、純度高、特異性強的單一抗體呢？1.抗體由

細胞產(chǎn)生。2.多種不同的抗原刺激B細胞分化為

種（個）漿細胞，

1個漿細胞只產(chǎn)生

種特異性抗體?！局R回顧】漿多1【設計方案】結(jié)合動物細胞培養(yǎng)技術，如何獲得純度高的單一抗體？一般無增殖能力可行嗎？1個漿細胞體外培養(yǎng)漿細胞細胞群單一抗體產(chǎn)生什么細胞能無限增殖？癌細胞單克隆抗體的制備體外大量增殖1個漿細胞癌細胞融合單克隆抗體（克?。┟谞査固箍评罩Z貝爾生理醫(yī)學獎獲得者：單克隆抗體制備過程【任務二】根據(jù)圖中操作，完成下列填空一、免疫小鼠、誘導融合：漿細胞單克隆抗體制備過程1.向小鼠體內(nèi)注入

；2.對小鼠免疫處理的目的是

；3.多次免疫刺激的目的是獲得

；4.從小鼠的

部位獲得漿細胞；一、免疫小鼠、誘導融合：獲得相應漿細胞特定的抗原蛋白大量相應漿細胞脾臟（已免疫的B細胞）單克隆抗體制備過程5.取出的脾臟組織可剪碎后用

處理制備單細胞懸液。6.用

技術培養(yǎng)小鼠的

細胞，7.將

細胞和

細胞誘導

；若融合，只考慮兩兩融合，結(jié)果培養(yǎng)液中共

種細胞。一、免疫小鼠、誘導融合：胰蛋白酶或膠原蛋白酶動物細胞培養(yǎng)骨髓瘤漿骨髓瘤融合5單克隆抗體制備過程如何篩選？雜交瘤細胞漿細胞一、免疫小鼠、誘導融合：單克隆抗體制備過程二、第一次篩選：【活動三】根據(jù)資料2討論在培養(yǎng)液中添加什么物質(zhì)可以

篩選出雜交瘤細胞，并說明理由。選擇培養(yǎng)基單克隆抗體制備過程二、第一次篩選：HAT選擇培養(yǎng)基漿細胞漿-漿骨髓瘤細胞骨-骨雜交瘤細胞DSDDS不能增殖而死亡不能合成DNA而死亡通過S途徑合成DNA，大量增殖注：培養(yǎng)液中還需要添加次黃嘌呤（H）、胸腺嘧啶（T）。單克隆抗體制備過程二、第一次篩選：HAT選擇培養(yǎng)基漿細胞漿-漿骨髓瘤細胞骨-骨雜交瘤細胞DSDDS不能增殖而死亡不能合成DNA而死亡通過S途徑合成DNA，大量增殖思考：得到的雜交瘤細胞合成并分泌的抗體都是同一種嗎？單克隆抗體制備過程漿細胞1種抗原蛋白上有不同種抗原表位，每一種抗原表位都可刺激產(chǎn)生相應的抗體。不同的抗原表位多種不同單克隆抗體制備過程三、第二次篩選：目的？選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞【活動四】小組活動，結(jié)合稀釋涂布平板法和單個菌

落的來源，討論問題

1

和

2單克隆抗體制備過程稀釋加到最多1個細胞?多孔培養(yǎng)板三、第二次篩選：單克隆抗體制備過程方法：抗體檢測法陽性孔(1)怎樣篩選出所需的雜交瘤細胞？原理是什么？三、第二次篩選：原理：抗原和抗體特異性結(jié)合單克隆抗體制備過程細胞增殖，獲得單一細胞群陽性孔(2)第二次篩選時，克隆化培養(yǎng)的目的是什么？三、第二次篩選：【思考】單位時間內(nèi)，熒光現(xiàn)象越明顯，說明什么？雜交瘤細胞合成并分泌抗體能力強單克隆抗體制備過程四、大規(guī)模生產(chǎn)：雜交瘤細胞單克隆抗體的優(yōu)點:特異性強、靈敏度高、可大量制備既能無限增殖、又能分泌單一抗體改進：鼠-人嵌合抗體、全人源抗體。單克隆抗體制備過程【構(gòu)建概念模型】1.

每個小組根據(jù)所給卡片和箭頭構(gòu)建制備單克隆抗體的流程（用膠帶黏貼）;2.

標出過程中進行篩選的環(huán)節(jié)；3.思考應用了哪些細胞工程技術。小組活動：【解決實際問題】

應用1.診斷疾?。盒鹿诳乖瓩z測試劑盒單克隆抗體應用1.診斷疾病：

新冠抗原檢測試劑盒核衣殼蛋白(N)包膜蛋白(E)刺突蛋白(S)膜糖蛋白(M)RNA包膜檢測原理？【活動六】請結(jié)合圖示，小組討論學案問題。單克隆抗體應用單克隆抗體應用一1.制備抗體1和T線抗體時給動物注射什么？

檢測的原理是什么？

新冠病毒N蛋白新冠病毒N蛋白與抗體特異性結(jié)合與N蛋白不同抗原表位結(jié)合雙抗夾心法降低交叉反應這兩種單克隆抗體與N蛋白的相同抗原表位結(jié)合嗎？單克隆抗體應用2.新冠抗原檢測陽性時為什么會出現(xiàn)兩色顯色帶，陰性時為什么只出現(xiàn)一條顯色