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文檔簡介

皮膚性病科真菌檢查技術(shù)操作規(guī)范一、真菌直接鏡檢是一種方便、準確診斷真菌病的檢測方法。此法簡便易行,陽性可明確真菌是否存在,結(jié)合臨床表現(xiàn)可確診皮膚真菌病,但一般不能確定致病菌種類,而且陰性不能完全排除真菌病診斷。【適應證】各種淺部、深部真菌病?!窘勺C】無特殊禁忌?!静僮鞣椒俺绦颉?.用鈍刀刮取皮損邊緣部的皮屑,或用小刀刮取變色松脆的甲屑,用拔毛鑷拔取病發(fā),置載玻片上,加1滴10%的KOH溶液,蓋上蓋玻片后在酒精燈上微微加熱,待櫬本溶解,輕輕加壓蓋玻片使標本透明,然后在顯微鏡下觀察。2.檢査時應遮去強光,先在低倍鏡下觀察有無真菌菌絲和孢子,然后用高倍鏡觀察孢子和菌絲的形態(tài)、特征、位置、大小和排列等。3.典型真菌鏡檢所見(1)花斑癬:短粗、兩頭鈍圓、稍彎曲的菌絲,成堆的圓形或卵圓形厚壁孢子,有時有芽胞。(2)頭癬①黃癬:黃癬痂,發(fā)內(nèi)孢子、鹿角狀菌絲,可見氣溝、氣泡。②白癬:斷發(fā)外菌鞘由鑲嵌或成堆圓形孢子組成。③黑癬:發(fā)內(nèi)鏈狀孢子。(3)體股癬、手足癬:分支分隔的長菌絲。(4)甲癬:分支分隔的長菌絲,常斷裂為關節(jié)孢子樣。(5)念珠菌病,假菌絲、圓形或橢圓形芽胞。(6)隱球菌?。簣A形或橢圓形雙壁孢子,外圍有一層透光莢膜,在黑色背景下極為明亮。(7)著色芽生菌病:棕色圓形厚壁分隔孢子。(8)暗色絲孢霉病,棕色分支分隔菌絲或酵母樣細胞。(9)鏈狀芽生菌病:鏈狀出芽孢子。(10)毛霉病:寬大菌絲,不分隔。【注意事項】1.取材應在損害活動區(qū),如環(huán)形損害的邊緣、水庖頂部,量要充足。2.體液標本應離心后取沉渣鏡檢。有條件者應同時進行真菌培養(yǎng)。3.取材前皮損部位應盡量避免涂藥。二、真菌培養(yǎng)目的是進一步提高病原體檢出的陽性率,同時確定致病菌的種類,一旦發(fā)現(xiàn)肯定的致病菌如紅色毛癬菌或新型隱球菌時,診斷即可確立。但如果分離出條件致病菌如白色念珠菌或煙曲霉時,應結(jié)合臨龐進行判斷。從無菌部位如血液或腦脊液中分離出條件致病菌常提示肯定的感染,但對來自于膿、痰或尿的標本則應謹慎解釋結(jié)果,單靠一次培養(yǎng)陽性往往不能確定診斷、有時還須結(jié)合直接鏡檢的結(jié)果,因此強調(diào)直接鏡檢與培養(yǎng)檢査相結(jié)合的重要性。【適應證】1.疑似真菌感染的標本。2.進一步確定感染真菌種類。【禁忌證】無特殊禁忌。【操作方法及程序】1.在無菌操作下,將標本接種于沙氏葡萄糖瓊脂(SDA),置25?27攝氏度溫箱內(nèi)培養(yǎng)4?6周。2.如懷疑有深部真菌,應同時在35?37攝氏度培養(yǎng)。3.菌落出現(xiàn)后,應定期觀察其生長情況。4.常規(guī)分離鑒定使用的培養(yǎng)基為SDA斜面培養(yǎng)基,加0.005%氯霉素,對皮膚癬菌,還應添加0.05%放線菌酮。5.對分離到的真菌,應結(jié)合菌落和顯微鏡下形態(tài)學特點將其鑒定到種。真菌常用形態(tài)學鑒定,而酵母常以形態(tài)學和生理生化學方法結(jié)合進行鑒定。6.常見真菌培養(yǎng)所見:(1)念珠菌病:奶油色酵母樣菌落(2)隱球菌?。喝榘咨湍笜泳洌鬄闇\橘黃色,質(zhì)地呈黏液狀。(3)孢子絲菌病:棕色至棕黑色菌落。(4)曲霉病:黃綠色毛狀菌落。(5)芽生菌?。赫婢酁榘咨藁泳?,酵母相為奶油色或棕色菌落。(6)暗色絲孢霉病:棕黑色菌落。(7)諾卡菌病:橘黃色或紅色

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