微生物的培養(yǎng)技術(shù)和應(yīng)用-微生物的選擇培養(yǎng)和技術(shù)(教師版)-高二生物同步講義人教版

目標(biāo)導(dǎo)航教學(xué)目標(biāo)

第2節(jié) 一、微生物的根本培育技術(shù)課程標(biāo)準(zhǔn)獲得純潔的微生物培育物是發(fā)酵工程的根底。

目標(biāo)解讀說明在發(fā)酵工程中滅菌是獲得純潔的微生物培育物的前提。說明無菌技術(shù)是在操作過程中，保持無菌產(chǎn)品與無菌區(qū)域不被微生物污染的技術(shù)。舉例說明通過調(diào)整培育基的配方可有目的地培育某種微生物。教學(xué)重點(diǎn)微生物純培育的根本操作要求。酵母菌的純培育。教學(xué)難點(diǎn)酵母菌的純培育。學(xué)問精講學(xué)問點(diǎn)01 培育基及配制培育基：人們依據(jù)微生物對養(yǎng)分物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長生殖的養(yǎng)分基質(zhì)。培育基的類型及用途按物理性質(zhì)分：固體培育基 用于菌種分別、鑒定、計(jì)數(shù)液體培育基 用于工業(yè)生產(chǎn)、連續(xù)培育半固體培育基 用于菌種保存按化學(xué)組成分：自然培育基用于工業(yè)生產(chǎn)合成培育基用于菌種分別、鑒定按目的用途分：選擇培育基 添加或缺少某種化學(xué)成分用于菌種分別鑒別培育基 添加某指示劑或化學(xué)藥劑用于菌種鑒別培育基的養(yǎng)分成分,另外還需要滿足微生物生長對pH、特別養(yǎng)分物質(zhì)(例如:生長因子)以及氧氣的要求。學(xué)問點(diǎn)02 無菌技術(shù)獲得純潔培育物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，防止外來雜菌入侵的保證是無菌技術(shù)。無菌技術(shù)〔操作〕泛指在培育微生物的操作中，全部防止雜菌污染的方法。無菌技術(shù)包括：試驗(yàn)操作空間消毒；操作者的手、衣著消毒；試驗(yàn)用具、器皿、培育基滅菌；試驗(yàn)操作過程，酒精燈火焰四周進(jìn)展；試驗(yàn)操作時(shí)，避開已經(jīng)滅菌處理的材料用具與四周物品相接觸。無菌技術(shù)目的：防止試驗(yàn)室的培育物被其它外來微生物污染；避開操作者被微生物感染。消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)分消毒：指使用較為溫順的物理或化學(xué)方法僅殺死物體外表或內(nèi)部一局部對人體有害的微生物?！膊话ㄑ挎吆玩咦印硿缇菏褂妹土业睦砘蛩貧⑺牢矬w內(nèi)外全部的微生物，包括芽孢和孢子，而到達(dá)完全無菌之過程。常用的消毒與滅菌的方法(1)消毒的方法：煮沸消毒法:100℃5-6min巴氏消毒法：62-65℃30min或80-90℃30s-1min化學(xué)藥劑消毒法:75%酒精進(jìn)展皮膚消毒;氯氣消毒水源紫外線消毒〔2〕滅菌的方法：灼燒滅菌：在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒干熱滅菌：160-170℃下加熱1-2h。滅菌時(shí)保證熱空氣流通?！渤Ｓ?00kPa121℃下維持15-30min.它可以殺滅全部的生物，包括最耐熱的某些微生物的休眠體，同時(shí)可以根本保持培育基的養(yǎng)分成分不破壞。學(xué)問點(diǎn)03 微生物的純培育培育物：將接種于培育基內(nèi)，在適宜條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為培育物。純培育物及純培育：由單一個體生殖所得的微生物群體稱為純培育物，獲得純培育物的過程稱為純培育。純培育步驟：配制培育基、滅菌、接種、分別、培育學(xué)問點(diǎn)04 酵母菌的純培育一、試驗(yàn)原理群體，即菌落。方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法承受平板劃線法和稀釋涂布平板法能將單個微生物分散在固體培育基上，之后經(jīng)培育得到的單菌落一般是由單個微生物生殖形成的純培育物。培育基：馬鈴薯瓊脂培育基二、目的要求三、材料用具四、方法步驟1.制備培育基配制培育基加瓊脂的目的是什么?作為凝固劑滅菌pH：pH7.6〔用0.1%的氫氧化鈉或鹽酸溶液把培育基調(diào)整到所要求的值〕分裝：分裝過程中留意不要使培育基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分裝三角瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。在滅菌前,棉塞，在取出培育基錐形瓶時(shí)也起到隔絕空氣中雜菌污染的作用。倒平板50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰四周倒平板。無菌檢查 將滅菌的培育基放入37℃的溫室中培育24—48小時(shí)，以檢查滅菌是否徹底。假設(shè)有菌落生長，說明培育基已被污染。接種和分別酵母菌原理：通過接種環(huán)在固體培育基外表連續(xù)劃線的操作，將聚攏的菌種逐步稀釋分散到培育基的外表。經(jīng)數(shù)次劃線后培育，可以分別得到單菌落。接種方法：平板劃線法培育酵母菌28℃〔培育溫度因酵母菌種的不同而稍有差異〕的恒溫培育箱中培育24-48h，分別觀看記錄結(jié)果。力量拓展考點(diǎn)01 選擇培育基和鑒別培育基一、定義不同選擇培育基是指一類依據(jù)特定微生物的特別養(yǎng)分要求或其對某理化因素抗性的原理而設(shè)計(jì)的培育基。鑒別培育基是指一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反響的指示劑，從而到達(dá)只須用肉眼區(qū)分顏色就能便利地從近似菌落中找到目的菌菌落的培育基。二、用途不同選擇培育基用于抑制大多數(shù)其他微生物的生長，或者造成有利于該菌生長的環(huán)境，一段時(shí)培育間后使選擇培育基用于抑制大多數(shù)其他微生物的生長，或者造成有利于該菌生長的環(huán)境，一段時(shí)培育間后使得該菌成為優(yōu)勢菌。鑒別培育基用于鑒定不同微生物。選擇培育基應(yīng)用參加青霉素分別酵母菌、霉菌等真菌參加高濃度食鹽分別金黃色葡萄球菌不加氮源分別固氮菌不加含碳有機(jī)物的無碳培育基分別自養(yǎng)型微生物只加尿素為唯一氮源的培育基分別尿素分解菌只加纖維素為唯一碳源的培育基分別纖維素分解菌鑒別培育基鑒別培育基應(yīng)用參加伊紅美藍(lán)大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培育基〔EMB培育基〕：黑色光亮金屬光澤參加剛果紅纖維素分解菌在剛果紅培育基上形成的透亮圈參加酚紅指示劑加了酚紅指示劑的培育基，指示劑變紅，鑒別尿素分解菌【典例1】在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻擋其他種類微生物生長的培育基稱做〔 〕鑒別培育基【答案】C

加富培育基 C.選擇培育基 D.根底培育基【解析】解：A、鑒別培育基是在培育基中參加某種試劑或化學(xué)藥品，使培育后會發(fā)生某種變化，從而區(qū)分不同類型的微生物。鑒別培育基用于鑒別不同類型微生物的培育基，A錯誤；B、在根底培育基中參加某些特別養(yǎng)分物質(zhì)制成的一類養(yǎng)分豐富的培育基，這些特別養(yǎng)分物質(zhì)包括血液、血清、酵母浸膏、動植物組織液等，B錯誤；C、選擇培育基是指在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻擋其他種類微生物生長的培育基。使用選擇培育基可以富集篩選目的微生物，D正確；D、根底培育基是用人工方法配制而成的，專供微生物生長生殖的混合養(yǎng)分物制品，D錯誤。應(yīng)選：C。選擇培育基是指在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻擋其他種類微生物生長的培養(yǎng)基．使用選擇培育基可以富集篩選目的微生物．此題主要考察微生物培育基的類型及其區(qū)分，意在加強(qiáng)學(xué)生對相關(guān)培育基的生疏和運(yùn)用．考點(diǎn)02 無菌技術(shù)、消毒和滅菌無菌操作，是指在無菌室或超凈臺中進(jìn)展以防止微生物進(jìn)入人體或污染供試菌的操作技術(shù)。無菌操作是各種生物試驗(yàn)和生產(chǎn)實(shí)踐中一項(xiàng)重要的根本操作。無菌操作的要求是：操作前將操作空間中的細(xì)菌和病毒等微生物殺滅；操作過程中保證操作空間與外界隔離，避開微生物的侵入。無菌操作原則：1、環(huán)境要清潔，進(jìn)展無菌操作前半小時(shí)，須停頓清掃地面等工作。避開不必要的人群流淌，防止塵埃飛揚(yáng)。2、在執(zhí)行無菌操作時(shí)，必需明確物品的無菌區(qū)和非無菌區(qū)。3、執(zhí)行無菌操作前，先戴帽子、口罩、洗手，并將手擦干，留意空氣和環(huán)境清潔。4、夾取無菌物品，必需使用無菌鑷子等無菌器具。進(jìn)展無菌操作時(shí)，凡未經(jīng)消毒的手、臂、均不行直接接觸無菌物品或超過無菌區(qū)取物。5、無菌物品不行暴露在空氣中過久。無菌物與非無菌物應(yīng)分別放置。無菌物品一經(jīng)使用即不能視為確定無菌，應(yīng)盡早使用。凡已取出的無菌物品雖未使用也不行再放回?zé)o菌容器內(nèi)。無菌操作技術(shù)及留意事項(xiàng)無菌技術(shù)包括：試驗(yàn)操作空間消毒；操作者的手、衣著消毒；試驗(yàn)用具、器皿、培育基滅菌；試驗(yàn)操作過程，酒精燈火焰四周進(jìn)展；試驗(yàn)操作時(shí)，避開已經(jīng)滅菌處理的材料用具與四周物品相接觸。在無菌操作過程中，最重要的是要保持工作區(qū)的無菌、清潔。因此，在操作前20～30分鐘要先啟動超凈臺和紫外燈，并認(rèn)真洗手和消毒。在操作時(shí)，嚴(yán)禁喧嘩，嚴(yán)禁用手直接拿無菌物品等。應(yīng)在超凈臺內(nèi)操作，并且在開啟和加蓋瓶塞時(shí)需反復(fù)用酒精燈灼燒。消毒是指殺滅或去除傳播媒介上的病原微生物，使之到達(dá)無害化的處理。〔包括芽胞“無菌物品”。芽孢：有些細(xì)菌在肯定的條件下，細(xì)胞里面形成一個橢圓形的休眠體，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。當(dāng)環(huán)境適宜〔如溫度、水分適宜〕的時(shí)候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個細(xì)菌.例如，有的細(xì)菌的芽孢，煮沸3小時(shí)以后才死亡。孢子：細(xì)菌、原生動物、真菌和植物等產(chǎn)生的一種有生殖作用的生殖細(xì)胞。能直接發(fā)育成個體。最常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，用高溫加高壓滅菌，最常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，用高溫加高壓滅菌，100kPa、121℃15-30min.它可以殺滅全部的生物，包括最耐熱的某些微生物的休眠體，同時(shí)可以根本保持培育基的養(yǎng)分成分不被破壞，是最可靠、應(yīng)用最普遍的物理滅菌法。主要用于能耐高溫的物品，如培育基、金屬器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡膠及一些藥物的滅菌。高壓蒸汽滅菌器的分類，依據(jù)樣式大小分為手提式高壓滅菌器、立式壓力蒸汽滅菌器、臥式高壓蒸汽滅菌器等。滅菌時(shí)留意：①包裹不應(yīng)過大、過緊；②高壓鍋內(nèi)的包裹不要排得太密，以免阻礙蒸氣透入，影響滅菌效果；③壓力、溫度和時(shí)間到達(dá)要求時(shí)，指示帶上和化學(xué)指示劑即應(yīng)消滅已滅菌的色澤或狀態(tài)；④易燃，易爆物品，如碘仿，苯類等，禁用高壓蒸氣滅菌；⑤銳械，如刀、剪不宜用此法滅菌，以免變鈍；⑥瓶裝液體滅菌時(shí)，要用玻璃紙包扎瓶口；⑦應(yīng)有專人負(fù)責(zé)，每次滅菌前，應(yīng)檢查安全閥的性能，以防壓力過高發(fā)生爆炸，保證安全使用；⑧注明滅菌日期和物品保存時(shí)限。另外，被滅菌物品應(yīng)待枯燥后才能取出備用；滅菌鍋密閉前，應(yīng)將冷空氣充分排空；隨時(shí)觀看壓力及溫度狀況；留意安全操作，每次滅菌前，應(yīng)檢“0”后才可翻開蓋或門。1】以下有關(guān)無菌技術(shù)的說法，其中正確的有幾項(xiàng)〔〕①無菌技術(shù)的關(guān)鍵是殺滅試驗(yàn)室中全部的微生物100℃5-6分鐘可以殺死微生物細(xì)胞和全部芽孢、孢子③經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底消滅，所以不能在常溫長期保存④高壓蒸汽滅菌時(shí)假設(shè)不將鍋內(nèi)冷空氣排出則達(dá)不到預(yù)期的滅菌效果⑤將接種環(huán)直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以快速徹底地滅菌⑥無菌技術(shù)中，假設(shè)處理對象為液體，則只能消毒，不能滅菌2項(xiàng)【答案】B【解析】【分析】

3項(xiàng) C.4項(xiàng) D.5項(xiàng)此題考察無菌技術(shù)，意在考察學(xué)生對學(xué)問的理解和記憶力量?！窘獯稹竣贌o菌技術(shù)的關(guān)鍵是承受消毒或滅菌的方法消滅微生物，防止雜菌污染，并非殺滅試驗(yàn)室中全部的微生物，①錯誤；100℃5-6分鐘可以殺死微生物細(xì)胞和一局部芽孢、孢子，②錯誤；③經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底消滅，所以不能在常溫長期保存，③正確；④在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時(shí)，由于空氣的膨脹壓大于水蒸汽的膨脹壓，所以假設(shè)不將鍋內(nèi)冷空氣排出則達(dá)不到預(yù)期的滅菌效果，④正確；⑤酒精燈火焰的充分燃燒層溫度高，將接種環(huán)直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以快速徹底地滅菌，⑤正確；⑥無菌技術(shù)中，假設(shè)處理對象為液體，可消毒，也可滅菌，⑥錯誤。綜上所述，B符合題意，ACD不符合題意。應(yīng)選B。【典例2】關(guān)于滅菌和消毒的表達(dá)，錯誤的選項(xiàng)是〔〕接種環(huán).接種針用灼燒的方法滅菌滅菌是殺死物體內(nèi)外全部微生物消毒是殺死物體內(nèi)外絕大多數(shù)的微生物高壓蒸汽滅菌的原理是使細(xì)菌DNA變性【答案】D【解析】試題分析：微生物試驗(yàn)中肯定要防止雜菌污染，接種環(huán)、接種針常用灼燒的方法滅菌，A正確；滅菌是為了殺死物體內(nèi)外全部微生物，B正確；消毒是殺死物體內(nèi)外絕大多數(shù)的有害微生物，C正確；高壓蒸汽滅菌的原理是使細(xì)菌蛋白質(zhì)和DNA變性，D錯誤?？键c(diǎn)：此題考察滅菌和消毒的相關(guān)學(xué)問，意在考察考生能理解所學(xué)學(xué)問的要點(diǎn)，把握學(xué)問間的內(nèi)在聯(lián)系，形成學(xué)問網(wǎng)絡(luò)的力量?？键c(diǎn)03 平板劃線法平板劃線法是通過平板劃線而獲得微生物純培育物的方法。是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞，用接種環(huán)在平板外表上作屢次由點(diǎn)到線的劃線稀釋而獲得較多獨(dú)立分布的單個細(xì)胞，并讓其成長為單菌落的方法。通過反復(fù)劃線分別，可獲得微生物的純種。4平板劃線法是通過平板劃線而獲得微生物純培育物的方法。是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞，用接種環(huán)在平板外表上作屢次由點(diǎn)到線的劃線稀釋而獲得較多獨(dú)立分布的單個細(xì)胞，并讓其成長為單菌落的方法。通過反復(fù)劃線分別，可獲得微生物的純種。4120℃左右〔平板轉(zhuǎn)動肯定角度約60℃〕，以便充分利用整個平板的面積，而且承受這種分區(qū)法可使D區(qū)與A區(qū)劃出的線條相平行，并可避開此兩區(qū)線條相接觸。A區(qū)面積最小，作為待分別菌的菌源區(qū)，B和C區(qū)是逐級稀釋的過渡區(qū)，D區(qū)面積最大，是關(guān)鍵區(qū)，以便有時(shí)機(jī)消滅較多的單菌落供選用。留意：平板應(yīng)較硬、較厚、外表枯燥；劃完A區(qū)后必需燒去接種環(huán)上的殘菌，待冷卻后再劃B區(qū)；線條宜平行、密集、整齊，以充分利用平板面積。具體分區(qū)及操作方法如下。劃線時(shí)，操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避開接種環(huán)上可能存在的微生物污染培育物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線完畢后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目漸漸削減，以便得到菌落。劃線完畢后灼燒接種環(huán)，能準(zhǔn)時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避開細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開頭，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步削減，最終能得到由單個細(xì)菌生殖而來的菌落?！镜淅?】微生物接種方法很多，平板劃線法是最常用的一種。以下圖是平板劃線示意圖，劃線的挨次為①②③④。以下操作方法錯誤的選項(xiàng)是〔〕劃線操作時(shí)，將沾有菌種的接種環(huán)插入培育基平板劃線后培育微生物時(shí)要倒置培育不能將第④區(qū)域的劃線與第①區(qū)域的劃線相連在②～④區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)展滅菌【答案】A【解析】【分析】此題考察了微生物分別與培育的有關(guān)學(xué)問，要求考生能夠把握平板劃線法操作的根本步驟，明確每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)展滅菌，再結(jié)合所學(xué)學(xué)問準(zhǔn)確推斷．【解答】將沾有菌種的接種環(huán)快速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，而不能插入培育基，A錯誤；用平板培育基培育微生物時(shí)，為防止水蒸氣凝集滴入培育基造成干擾或污染，應(yīng)將平板倒過來放置培育，B正確；劃線時(shí)要避開最終一區(qū)的劃線與第一區(qū)線連．由于最終一區(qū)是細(xì)菌最稀有的，而第一區(qū)是細(xì)菌最致密的，假設(shè)連在一起則有可能影響單個菌落的分別效果，C正確；在①②③④區(qū)域中劃線前都要對接種環(huán)進(jìn)展灼燒滅菌，保證每次劃線的菌種來自上一區(qū)域的末端，D正確。應(yīng)選A。分層提分分層提分題組A 根底過關(guān)練單項(xiàng)選擇題在分解尿素菌的分別和鑒定中，對先后用到的兩種培育基，表達(dá)正確的選項(xiàng)是〔 〕參加酚紅指示劑作為選擇培育基，再參加唯一碳源作為鑒別培育基參加唯一氮源作為選擇培育基，再參加酚紅指示劑作為鑒別培育基參加唯一氮源作為鑒別培育基，再參加酚紅指示劑作為選擇培育基參加唯一碳源作為選擇培育基，再參加酚紅指示劑作為鑒別培育基【答案】B【解析】解：分別尿素分解菌以參加尿素為唯一氮源作為選擇培育基，鑒定尿素分解菌以參加酚紅指示劑作為鑒別培育基。應(yīng)選：B。1、分解尿素的細(xì)菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素為唯一氮源的培育基上，分解尿素的菌能以尿素為氮源生長，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而無法生長；2、尿素分解菌可以產(chǎn)生脲酶將尿素分解分解為氨，使pH上升，培育基中進(jìn)入酚紅指示劑后，氨可以使指示劑呈紅色，據(jù)此可以用酚紅指示劑鑒別尿素分解菌。此題主要考察尿素分解菌的篩選和鑒定，意在強(qiáng)化學(xué)生對選擇培育基和鑒定培育基的理解運(yùn)用。以下無菌操作技術(shù)的說法正確的選項(xiàng)是〔〕消毒僅能殺死物體外表的芽孢和孢子液態(tài)的牛奶可用巴氏消毒法消毒培育皿、膠頭吸管可用干熱滅菌法滅菌高壓蒸汽滅菌時(shí)間到達(dá)后馬上排氣降溫【答案】B【解析】【分析】此題考察微生物的分別和培育，重點(diǎn)考察無菌技術(shù)，要求考生識記消毒和滅菌的概念，把握消毒和滅菌的方法及實(shí)例，能結(jié)合所學(xué)的學(xué)問做出準(zhǔn)確的推斷。【解答】消毒是使用較為溫順的物理或化學(xué)方法殺死物體外表或內(nèi)部的局部微生物〔不包芽孢和孢子〕，而滅菌是指使用猛烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物〔包括芽孢和孢子〕，A錯誤；液態(tài)的牛奶可用巴氏消毒法消毒，B正確；培育皿可用干熱滅菌法滅菌，膠頭吸管可用高壓蒸汽滅菌，C錯誤；D.高壓蒸汽滅菌時(shí)間到達(dá)后，切斷電源，先降溫后排氣，D錯誤。應(yīng)選B。以下關(guān)于滅菌和消毒的理解不正確的選項(xiàng)是〔 〕滅菌是指殺滅環(huán)境中一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是一樣的用酒精擦拭雙手只能消毒，不能起到滅菌作用常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等【答案】B【解析】解：A、消毒和滅菌的結(jié)果不完全一樣，消毒只能殺滅物體體表或內(nèi)部的一局部微生物，不能殺死孢子和芽孢，而滅菌能殺滅環(huán)境中一切微生物，包括孢子和芽孢，A正確；B、滅菌是將處理物體中的一切生物全部殺滅。在經(jīng)過滅菌后的物體中，不再存在任何活著的生命；消毒是將物體中的微生物削減到不再危害人體〔或其他需要保護(hù)的生物體〕的程度，B錯誤；C、用酒精擦拭雙手只能消毒，不能殺死孢子和芽孢，因而不能起到滅菌作用，C正確；D、常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌等，D正確。應(yīng)選：B。滅菌是指使用猛烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程，常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫順的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一局部微生物的過程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等。此題主要考察微生物培育時(shí)滅菌與消毒的聯(lián)系與區(qū)分，意在強(qiáng)化學(xué)生對相關(guān)概念的識記、理解與運(yùn)用。如圖是平板劃線法接種微生物的示意圖，以下表達(dá)正確的選項(xiàng)是()5次5區(qū)域中才可以得到單個菌體形成的菌落劃線時(shí)，在火焰四周將皿蓋翻開一條縫隙該接種方法也能計(jì)數(shù)培育液中微生物數(shù)量【答案】C【解析】【分析】此題考察的學(xué)問點(diǎn)是平板劃線操作劃線前后的滅菌及目的，平板劃線法接種的結(jié)果預(yù)期，主要考察學(xué)生對平板劃線法的把握程度?！窘獯稹緼、由圖可知:5次線,6次,A錯誤;B、由題圖可知,5區(qū)域是最終一個區(qū)域,5區(qū)域獲得所需要的菌落,4區(qū)域也有可能得到所需要的菌落,B錯誤;C、劃線時(shí),為防止空氣中微生物的污染,在火焰四周將皿蓋翻開一條縫隙,劃線后再通過酒精燈火焰,C正確;D、該接種方法屬于平板劃線法,不能計(jì)數(shù)培育液中微生物數(shù)量,D錯誤。應(yīng)選C。甲、乙、丙是三種微生物，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是三種培育基。甲、乙、丙都能Ⅲ中正常生長生殖；甲能在Ⅰ中正常生長生殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長生殖，甲、丙都不能。以下說法正確的選項(xiàng)是〔 〕成分含量ⅠⅡⅢ粉狀硫10g+++K2HPO44g+++FeSO4蔗糖0.5g10g+++++〔NH4〕2SO40.4g++H2O100mL+++MgSO49.25g+++CaCl20.5g+++甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物 甲、乙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物【答案】C【解析】【解析】此題考察了培育基對微生物選擇作用的相關(guān)學(xué)問，考生要通過分析培育基的成分確定培育基的選擇功能；識記不同微生物的代謝類型，結(jié)合培育基種類進(jìn)展解答，難度不大。I培育基的特點(diǎn)是沒有有機(jī)碳源，是培育自養(yǎng)微生物的培育基；Ⅲ培育基是適宜異養(yǎng)微生物生長的培育基。【解析】依據(jù)題意可知，甲能在Ⅰ中正常生長生殖，而乙和丙都不能，而Ⅰ培育基缺氮源，說明甲能夠自身固氮，屬于固氮微生物；乙能在Ⅱ中正常生長生殖，而甲和丙都不能，Ⅱ培育基中沒有有機(jī)碳源，說明乙能夠合成有機(jī)物，屬于自養(yǎng)微生物；而丙不能在Ⅰ培育基，說明不能固氮；又不能在Ⅱ培育基中生長，說明不能合成有機(jī)物，只能在Ⅲ培育基中生長，說明屬于異養(yǎng)微生物。綜上所述，ABD錯誤，C正確。應(yīng)選C。以下關(guān)于微生物養(yǎng)分物的表達(dá)中，正確的選項(xiàng)是〔 〕A.但凡碳源都能供給能量C.無機(jī)氮源也能供給能量【答案】C【解析】【分析】

B.碳源物質(zhì)不行能同時(shí)是氮源D.除水以外的無機(jī)物只供給無機(jī)鹽此題考察微生物養(yǎng)分相關(guān)學(xué)問，意在考察考生能理解所學(xué)學(xué)問的要點(diǎn)，把握學(xué)問間的內(nèi)在聯(lián)系的力量。【解答】無機(jī)物碳源不供給能量，A錯誤；同一種物質(zhì)可以即作碳源又作氮源，如牛肉膏，B錯誤；能量，叫做化能合成作用，C正確；無機(jī)物也可供給碳源和氮源，如碳酸鹽和硝酸鹽，D錯誤。應(yīng)選C。微生物培育過程中分別承受了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等不同方法殺滅細(xì)菌，這些方法可依次適用于A.接種環(huán)、手、培育基C.培育基、手、接種環(huán)【答案】C【解析】【分析】

B.菌種試管、手、培育基D.菌種試管、手、接種環(huán)此題考察學(xué)生對無菌操作技術(shù)的把握。高壓蒸汽滅菌通常用于培育基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法。火焰灼燒，可以快速徹底地滅菌，適用于微生物的接種工具，如接種環(huán)。【解答】接種針、接種環(huán)應(yīng)用灼燒滅菌，培育基用高壓蒸汽滅菌，試驗(yàn)者的手用酒精消毒。綜上所述ABD錯誤，C正確。應(yīng)選C。微生物〔除病毒外〕需要從外界吸取養(yǎng)分物質(zhì)并通過代謝來維持正常的生長和生殖，以下有關(guān)微生物培育的說法正確的選項(xiàng)是〔〕乳酸菌與硝化細(xì)菌所利用的氮源不同，碳源一樣微生物培育基中通常需要參加肯定量的抗生素培育基中的養(yǎng)分物質(zhì)濃度越高對微生物的增殖越有利微生物的生長除受養(yǎng)分因素影響外，還受到pH、氧等的影響【答案】D【解析】【分析】此題考察了微生物分別與培育以及培育基對微生物的選擇作用的相關(guān)學(xué)問，考生要能夠識記一些特別微生物的代謝類型，如硝化細(xì)菌能夠利用無機(jī)NH3作為氮源和能源物質(zhì)的，并能能夠進(jìn)展化能合成作用利用無機(jī)碳源；局部細(xì)菌能夠分解尿素等?！窘獯稹咳樗峋玫挠袡C(jī)碳源，而硝化細(xì)菌可以利用無機(jī)碳源，A錯誤；抗生素對細(xì)菌生長有抑制作用，通過添加抗生素利于篩選出真菌，B錯誤；培育基中的養(yǎng)分物質(zhì)濃度過高會導(dǎo)致微生物不能從培育基中吸水將消滅失水過多而死亡的現(xiàn)象對生長不利，C錯誤； 微生物的生長除受養(yǎng)分因素影響外，還受到pH、氧等的影響，D正確。應(yīng)選D。以下有關(guān)倒平板的操作正確的選項(xiàng)是〔〕待培育基冷卻到室溫時(shí)才能進(jìn)展倒平板等待培育基冷凝后需要將平板倒置放置倒平板時(shí)培育皿蓋翻開，培育皿蓋倒放在桌面上倒平板時(shí)左手拿裝有培育基的錐形瓶，右手拔出棉塞置于桌面【答案】B【解析】【分析】此題考察培育基相關(guān)學(xué)問，考察學(xué)生的識記力量，題目難度適中。【解答】50℃左右倒平板，A錯誤；平板冷凝后，要將平板倒置，是防止皿蓋上的冷凝水落入培育基造成污染，B正確；倒平板時(shí)不能把培育皿蓋完全翻開并放到桌面上，這樣會污染培育皿中的培育基，C錯誤；右手拿裝有培育基的錐形瓶，左手拔出棉塞，D錯誤。應(yīng)選B。題組B 力量提升練一、單項(xiàng)選擇題以下關(guān)于纖維素分解菌分別和鑒定的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是〔 〕要從土壤中將纖維素分解菌分別出來，應(yīng)當(dāng)將它們接種在含指示劑的鑒別培育基上分別分解纖維素的微生物時(shí)把纖維素作為唯一氮源對纖維素分解菌進(jìn)展選擇培育時(shí)，要選用液體培育基，緣由是纖維素分解菌在固體培育基上不能生長剛果紅染色法篩選纖維素分解菌使用的培育基屬于鑒別培育基【答案】D【解析】解：A、要從土壤中將纖維素分解菌分別出來，應(yīng)當(dāng)將它們接種在以纖維素為唯一碳源的選擇培育基上，A錯誤；B、分別分解纖維素的微生物時(shí)把纖維素作為唯一碳源，B錯誤；C、對纖維素分解菌進(jìn)展選擇培育時(shí)，要選用液體培育基，緣由是纖維素分解菌在液體培育基上生殖速度更快，C錯誤；D、剛果紅染色法篩選纖維素分解菌使用的培育基屬于鑒別培育基，D正確。應(yīng)選：D。纖維素分解菌分別試驗(yàn)的原理：1、土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培育基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。2、在培育基中參加剛果紅，可與培育基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培育基中會消滅以纖維素分解菌為中心的透亮圈，從而可篩選纖維素分解菌。此題考察微生物的分別和培育，對于此類試題，需要考生留意的細(xì)節(jié)較多，照試驗(yàn)的原理、試驗(yàn)承受的方法、試驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)論等，需要考生在尋常的學(xué)習(xí)過程中留意積存。以下關(guān)于微生物試驗(yàn)操作的表達(dá)，錯誤的選項(xiàng)是〔 〕培育微生物的試劑和器具都要進(jìn)展高壓蒸汽滅菌接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)展灼燒接種后的培育皿要倒置，以防培育基污染菌種分別和菌落計(jì)數(shù)都可以使用固體培育基【答案】A【解析】【分析】此題主要考察微生物的養(yǎng)分物質(zhì)及接種和培育，要求考生能夠把握微生物試驗(yàn)操作方法，把握微生物分別與培育過程中的無菌技術(shù)，難度適中?！窘獯稹拷臃N室、接種箱等常用紫外線消毒法處理，接種環(huán)等常用灼燒滅菌法處理，吸管、培育皿等常用干熱滅菌法處理，培育基及多種器材用高壓蒸汽滅菌法處理，A錯誤；為了防止雜菌污染，每次接種前后，接種環(huán)都要進(jìn)展灼燒滅菌，B正確；C.接種后，培育皿需要倒置，以防皿蓋上水珠落入培育基造成污染，C正確；D.分別菌種可以用平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者還可以用于微生物的計(jì)數(shù)，所用培育基為固體培育基，D正確。 微生物培育過程中，要格外重視無菌操作，現(xiàn)代生物學(xué)試驗(yàn)中的很多方面也要進(jìn)展無菌操作，防止雜菌污染，請分析以下操作，錯誤的選項(xiàng)是〔 〕①煮沸消毒可以殺死微生物的養(yǎng)分細(xì)胞和局部芽孢②接種操作要在酒精燈火焰四周進(jìn)展③無菌生殖脫毒苗時(shí)，植物的外植體要進(jìn)展消毒④家庭制作葡萄酒時(shí)要將容器和葡萄進(jìn)展滅菌⑤培育基要進(jìn)展高壓蒸汽滅菌⑥參加培育基中的指示劑和染料不需要滅菌．①③【答案】D

B.②④ C.③⑤ D.④⑥【解析】解：①100℃5～6min可以殺死微生物細(xì)胞和一局部芽孢，①正確；②酒精燈火焰四周存在一個無菌區(qū)，為了無菌操作，接種操作要在酒精燈火焰四周進(jìn)展，②正確；③無菌生殖脫毒苗，植物的外植體要進(jìn)展消毒，③正確；④利用葡萄制作葡萄酒利用的是附著于葡萄皮外表的野生型酵母菌，所以制作葡萄酒時(shí)葡萄不進(jìn)展滅菌，以免殺死酵母菌，④錯誤；⑤培育基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，⑤正確；⑥指示劑和染料混有微生物，故參加培育基前需滅菌，⑥錯誤．所以，④⑥錯誤．應(yīng)選：D．使用猛烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程稱為滅菌，常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌．消毒是指用較為溫順的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一局部微生物的過程．常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等．此題主要考察消毒和滅菌的相關(guān)學(xué)問，意在強(qiáng)化學(xué)生對無菌操作的相關(guān)學(xué)問的識記、理解與運(yùn)用．題目難度中等．以下有關(guān)微生物試驗(yàn)室培育的表達(dá)，不正確的選項(xiàng)是()在熔化瓊脂時(shí)，需要掌握火力并不斷攪拌，以免發(fā)生焦糊灼燒、高壓蒸汽滅菌、紫外線照耀等都屬于無菌技術(shù)樣品中活菌數(shù)量統(tǒng)計(jì)時(shí)，接種方法應(yīng)承受平板劃線法用平板培育基培育微生物時(shí)，應(yīng)將平板倒過來放置【答案】C 【解析】【分析】此題主要考察培育基的制作、無菌技術(shù)、微生物的計(jì)數(shù)及微生物的培育，意在強(qiáng)化學(xué)生對相關(guān)學(xué)問的識記、理解與運(yùn)用。試驗(yàn)室常用的消毒方法煮沸消毒；化學(xué)藥物消毒；紫外線消毒。試驗(yàn)室常用的滅菌方法①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以快速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等簡潔被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持枯燥的物品，如玻璃器皿〔吸管、培育皿〕和金屬用具等，可以承受這種方法滅菌；③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為到達(dá)良好的滅菌效果，一般在壓100kPa121℃15～30min。微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培育基倒入培育皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培育。在線的開頭部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延長，菌數(shù)漸漸削減，最終可能形成單個菌落。【解答】瓊脂屬于多糖，在熔化瓊脂時(shí)，需要掌握火力并不斷攪拌，以免發(fā)生焦糊，A正確；用紫外線照耀等都屬于無菌技術(shù)，B正確；樣品中活菌數(shù)量統(tǒng)計(jì)時(shí)，接種方法應(yīng)承受稀釋涂布平板法，C錯誤；D.用平板培育基培育微生物時(shí)，應(yīng)將平板倒過來放置，D正確。應(yīng)選C。廣泛用于牛奶、奶酪、啤酒等產(chǎn)品的消毒方法是〔〕高壓蒸汽滅菌【答案】B【解析】【分析】

巴氏消毒法 C.酒精消毒 D.火焰灼燒此題考察無菌技術(shù)，要求考生識記消毒和滅菌的相關(guān)技術(shù)，能準(zhǔn)確推斷各種工具、器皿等所承受的消毒或滅菌方法，相關(guān)學(xué)問點(diǎn)只需考生識記即可，屬于考綱識記層次的考察?！窘獯稹俊案邏赫羝麥缇睂儆跍缇?，不屬于消毒，A錯誤；養(yǎng)分物質(zhì)，B正確；牛奶、奶酪、啤酒等產(chǎn)品假設(shè)承受酒精消毒，達(dá)不到消毒的目的，并且會導(dǎo)致酒精殘留，C錯誤；D.火焰灼燒屬于滅菌，不屬于消毒，D錯誤。應(yīng)選B。尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培育基時(shí)〔〕葡萄糖在培育基中含量越多越好尿素在培育基中含量越少越好尿素分解菌有固氮力量，故培育基中尿素為無機(jī)氮尿素分解菌無固氮力量，故培育基中的尿素為有機(jī)氮【答案】D【解析】【分析】此題主要考察尿素分解菌的篩選，意在強(qiáng)化學(xué)生對選擇培育基的作用的相關(guān)學(xué)問的時(shí)間、理解與運(yùn)用?！窘獯稹緼.尿素既可以作為尿素分解菌的氮源，也可以作為其碳源，葡萄糖在培育基中并不是越多越好，A錯誤；B.越好，過少就失去選擇作用，過多又會使細(xì)胞失水死亡，B錯誤；C.尿素分解菌沒有固氮力量，故培育基中需要添加尿素作為氮源，C錯誤；D.尿素分解菌無固氮力量，故培育基中的尿素為化合態(tài)氮，D正確。應(yīng)選D。如下表所示為某微生物培育基的配方，請答復(fù)錯誤的選項(xiàng)是〔〕依物理性質(zhì)，該培育基屬于液體培育基依用途劃分，該培育基屬于選擇培育基.依據(jù)培育基原料，所培育微生物的同化作用的類型是自養(yǎng)生物該培育基中的碳源是〔CH2O〕【答案】C【解析】【分析】此題的學(xué)問點(diǎn)是培育基的分類及劃分依據(jù)，主要考察學(xué)生解讀圖表獵取有效信息，并利用有效信息結(jié)合基礎(chǔ)學(xué)問解決問題的力量?！窘獯稹糠治鰣D表可知，本培育基無瓊脂等凝固劑，按物理性質(zhì)分屬于液體培育基，A正確；參加了青霉素，只有抗青霉素的微生物才能在上面生長，因此按用途分屬于選擇培育基，B正確；分析圖表可知，本培育基配方中〔CH2O〕作為碳源，因此所培育的微生物同化作用的類型是異養(yǎng)型而不是自養(yǎng)型，C錯誤；分析圖表可知，該培育基中的碳源是〔CH2O〕，D錯誤。應(yīng)選C。以下關(guān)于培育基的表達(dá)正確的選項(xiàng)是〔〕配置培育基時(shí)要依據(jù)微生物的養(yǎng)分需求培育細(xì)菌時(shí)一般需調(diào)整pH為中性或酸性是碳源的物質(zhì)不行能同時(shí)是氮源配置液體培育基的目的是為了觀看菌落特征【答案】A【解析】【分析】此題考察培育基的成分、配置和作用，意在考察學(xué)生對學(xué)問的理解和記憶力量?！窘獯稹坑捎谖⑸镳B(yǎng)分類型簡單，不同微生物對養(yǎng)分物質(zhì)的需求是不一樣的，因此要依據(jù)不同微生物的養(yǎng)分需求配制針對性強(qiáng)的培育基，A正確；一般來講，細(xì)菌適于在pH7～7.5范圍內(nèi)生長，B錯誤；是碳源的物質(zhì)可能同時(shí)是氮源，例如蛋白胨中既有碳，也有氮，C錯誤；在液體培育基中，無法形成菌落，為了觀看菌落特征應(yīng)配置固體培育基，D錯誤。應(yīng)選A。微生物的試驗(yàn)室培育過程中，培育基配制后的分裝一般有兩種：一種為分裝至試管；一種分裝至培育皿，稱為倒平板。以下有關(guān)表達(dá)中正確的選項(xiàng)是〔〕倒平板一般先分裝后滅菌，而分裝至試管，則應(yīng)先滅菌后分裝倒平板應(yīng)在分裝前調(diào)pH值，分裝至試管應(yīng)在分裝后調(diào)pH值無論哪種分裝方式都要進(jìn)展高壓蒸汽滅菌分裝時(shí)，培育基溫度一般掌握在80℃為宜【答案】C【解析】【分析】此題考察培育基與無菌技術(shù)，意在考察學(xué)生對學(xué)問的理解和記憶力量?！窘獯稹緼.倒平板一般先滅菌后分裝，而分裝至試管，則應(yīng)先分裝后滅菌，故A錯誤；B.倒平板應(yīng)在分裝前調(diào)pH值，分裝至試管應(yīng)在分裝前調(diào)pH值，故B錯誤；C.無論哪種分裝方式都要進(jìn)展高壓蒸汽滅菌，故C正確；D.分裝時(shí)，培育基溫度一般掌握在50℃為宜，故D錯誤。應(yīng)選C。二、填空題為提高作物產(chǎn)量，種植業(yè)往往使用大量的氮素化肥，既增加了生產(chǎn)本錢，又易造成環(huán)境污染。自生固氮菌營獨(dú)立生活，為轉(zhuǎn)變這種現(xiàn)狀帶來了期望。某科研小組利用下面的培育基嘗試從土壤中分別固氮力量強(qiáng)的自生固氮菌，以便生產(chǎn)菌肥替代傳統(tǒng)化肥。請答復(fù)以下問題：培育基配方表：成成分葡萄糖KH2PO4MgSO4NaClCuSO4CaCO3瓊脂蒸餾水用量10g 0．2g 0．2g0．2g0．2g 5g 3．5g IL配制培育基時(shí)，按配方表稱量、溶化、定容后需法滅菌后再倒平板。此培育基能分別自生固氮菌的緣由是 。為分別純化自生固氮菌及觀看并計(jì)數(shù)自生固氮菌的菌落數(shù)，需將土樣經(jīng)梯度稀釋后，用滅菌后的 〔填接種工具名稱〕承受 將菌液接種到平板上培育。固氮酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，不同的蛋白質(zhì)在不同濃度的鹽溶液中溶解度不同。為檢測分別得到的自生固氮菌的固氮酶活性?？蓪⒐痰?xì)胞裂開后承受鹽析法分別出固氮酶，該方法的優(yōu)點(diǎn)是?！敬鸢浮俊?〕高壓蒸汽滅菌；該培育基無氮源，只有固氮菌才能在此培育基上生長涂布器；稀釋涂布平板法既能分別出固氮酶，又不會破壞固氮酶的構(gòu)造而保持其活性【解析】【分析】此題考察微生物的培育和分別相關(guān)學(xué)問，意在考察根底學(xué)問的理解和記憶力量。【解答】培育基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。從培育基的養(yǎng)分物質(zhì)來看，此培育基沒有氮源，只有固氮菌才能在此培育基上生長，因而能到達(dá)分別自生固氮菌的目的。分別純化自生固氮菌常用的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法，計(jì)數(shù)自生固氮菌的菌落數(shù)應(yīng)承受稀釋涂布平板法，接種工具分別對應(yīng)接種環(huán)或涂布器，在分別純化之前，均需要將土樣進(jìn)展梯度稀釋。固氮酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，依據(jù)題干信息“不同的蛋白質(zhì)在不同濃度的鹽溶液中溶解度不同”，將固氮細(xì)胞裂開后，可承受鹽析的方法將固氮酶分別出來，這種方法既能分別出固氮酶，又不會破壞固氮酶的構(gòu)造而保持其活性。為了減輕廢棄農(nóng)作物秸稈對農(nóng)村環(huán)境污染,某科研小組使用如以下圖所示接種方法分別純化分解纖維素的微生物并用于生產(chǎn)。請據(jù)圖答復(fù)以下問題:圖中接種工具的名稱是 ,制備培育微生物的培育基時(shí),滅菌與調(diào)pH的先后挨次是 。步驟②中,將接種工具冷卻的緣由是 。圖示接種方法是 。為從富含纖維素的土壤中分別獲得分解纖維素的微生物單個菌落,某同學(xué)配制了一個培育基(成分見下表):成分培育基

酵母膏+

無機(jī)鹽 淀粉+ +

纖維素粉 瓊脂 水+ + +注:“+”表示有。據(jù)表分析,該培育基含有微生物所需的 、氮源、水、無機(jī)鹽四大類養(yǎng)分物質(zhì)。該培育基 (選填“能”或“不能”)用于分別纖維素分解菌,緣由是_。的方法。【答案】〔1〕接種環(huán)先調(diào)pH再滅菌〔2〕避開燙死接種菌種〔3〕平板劃線法〔4〕碳源不能纖維素不是唯一碳源〔5〕甘油管藏【解析】【解析】〔1〕圖中接種工具是接種環(huán)，制備培育基的根本過程為計(jì)算→稱量→溶化→調(diào)pH→滅菌→倒平板五個步驟，所以是先調(diào)pH再滅菌?！?〕接種前需要將灼燒后的接種工具冷卻，避開燙死接種菌種。〔3〕由圖中步驟③可知，接種方法是平板劃線法。〔4〕由表可知，該培育基含有碳源〔酵母膏、淀粉、纖維素粉〕、氮源〔酵母膏〕、水和無機(jī)鹽四大類養(yǎng)分物質(zhì)，但該培育基中纖維素不是唯一碳源，不能用于分別纖維素分解菌?！?〕優(yōu)良菌種假設(shè)頻繁使用可承受臨時(shí)保藏法，假設(shè)長期保存需承受甘油管藏法。題組C 培優(yōu)拔尖練一、單項(xiàng)選擇題用來推斷選擇培育基是否起到了選擇作用需要設(shè)置的比照是〔〕未接種的選擇培育基未接種的牛肉膏蛋白胨(全養(yǎng)分)培育基接種了的牛肉膏蛋白胨(全養(yǎng)分)培育基接種了的選擇培育基【答案】C【解析】【分析】此題考察培育基相關(guān)學(xué)問，要求考生理解把握選擇培育基的作用?！窘獯稹繉⒕合♂屢粯拥谋稊?shù)，由于牛肉膏蛋白胨培育基含全養(yǎng)分物質(zhì)，所以牛肉膏蛋白胨培育基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培育基上的數(shù)目，因此牛肉膏蛋白胨培育基是比照組，比照組遵循的原則是單一變量，所以需要與選擇培育基一樣接種、培育，只是培育基成分不同。綜上所述，C正確，ABD錯誤。應(yīng)選C。某些土壤細(xì)菌可將尿素〔CH4N2O〕分解為CO2和NH3供植物吸取和利用，但分解產(chǎn)物CO2不能為該菌供給養(yǎng)分。以下關(guān)于配置分別這一菌種的選擇培育基的成分符合要求的是〔 〕僅尿素 B.尿素+葡萄糖 C.僅葡萄糖 D.牛肉膏蛋白胨【答案】B【解析】解：依據(jù)題意：“某些土壤細(xì)菌可將尿素〔CH4N2O〕CO2NH3供植物吸取和利用，但分解產(chǎn)物CO2不能為該菌供給養(yǎng)分”說明該土壤細(xì)菌是異養(yǎng)型，需要含碳有機(jī)物作為碳源，以尿素作為氮源。應(yīng)選：B。1、選擇培育基的概念是：在微生物學(xué)中，將允許特定微生物種類生長，同時(shí)抑制或阻擋其他種類微生物生長的培育基，稱為選擇培育基，由于分解尿素的細(xì)菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素為唯一氮源的培育基上，分解尿素的菌能以尿素為氮源生長，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而無法生長。2、常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)展一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液涂布到固體瓊脂培育基上，進(jìn)展培育，在稀釋度足夠高的菌液里，將聚攏在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，獲得由單個細(xì)胞生殖而來的菌落。3、尿素分解菌可以產(chǎn)生脲酶將尿素分解分解為氨，使pH上升，培育基中進(jìn)入酚紅指示劑后，氨可以使指示劑呈紅色，據(jù)此可以用酚紅指示劑鑒別尿素分解菌。此題主要考察尿素分解菌的篩選即培育，意在強(qiáng)化學(xué)生對選擇培育基配制的理解運(yùn)用。關(guān)于微生物培育的表達(dá)正確的選項(xiàng)是〔 〕將允許特定種類的微生物生長的培育基稱作選擇培育基利用參加剛果紅的含纖維素培育基培育細(xì)菌，依據(jù)透亮圈大小來篩選出能分解纖維素的細(xì)菌可以依據(jù)伊紅美藍(lán)培育基上紅棕色菌落的數(shù)目，計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量用參加酚酞指示劑且以尿素為唯一氮源的培育基培育細(xì)菌，假設(shè)培育基變紅，則該細(xì)菌能夠分解尿素【答案】C【解析】解：A、選擇性培育基是依據(jù)某一種或某一類微生物的特別養(yǎng)分要求而設(shè)計(jì)的培育基允許特定種類的微生物生長，同時(shí)又能抑制或者阻擋其他種類微生物生長，利用這種培育基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分別出來，A錯誤；B、剛果紅染液可以與纖維素反響呈紅色，在以纖維素為唯一碳源的培育基中參加剛果紅，依據(jù)透亮圈的有無來篩選出能分解纖維素的纖維素分解菌，B錯誤；C、伊紅美藍(lán)指示劑能夠?qū)Ｒ昏b別大腸桿菌菌落，其菌落呈藍(lán)紫色或黑色且具有金屬光澤，計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量，C正確；D、在以尿素為唯一氮源的培育基中參加酚紅指示劑，假設(shè)PH上升，指示劑將變紅，說明該細(xì)菌能夠分解尿素，D錯誤。應(yīng)選：C。尿素分解菌能夠產(chǎn)生脲酶，在脲酶的作用下能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘?，使pH上升與酚紅指示劑反響呈紅色。剛果紅染液可以與纖維素反響呈紅色，纖維素分解菌能夠?qū)⒗w維素分解而消滅無色的透亮圈。伊紅美藍(lán)指示劑能夠?qū)Ｒ昏b別大腸桿菌菌落，其菌落呈藍(lán)紫色或黑色的且有金屬光澤。淀粉與碘反響呈藍(lán)色，淀粉分解菌能夠分解淀粉而使菌落四周消滅透亮圈。此題主要考察四類微生物的鑒別方法，意在強(qiáng)化學(xué)生對相關(guān)微生物的根本方法的原理的理解與把握。高中生物學(xué)試驗(yàn)中，在接種時(shí)不進(jìn)展嚴(yán)格無菌操作對試驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)為哪一項(xiàng)〔 〕將少許干酵母參加到穎的葡萄汁中將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無菌培育基上將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培育基上【答案】C【解析】釀葡萄酒時(shí)的無氧環(huán)境以及酵母菌產(chǎn)生的酒精對酵母菌以外的雜菌有抑制作用；腐乳制作時(shí)，將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上，放在15～18℃下，此溫度不適于細(xì)菌、酵母菌和曲霉的生長，而適于毛霉的生長。因此，不進(jìn)展嚴(yán)格無菌操作對A、B生物生長生殖能利用、而不需要的微生物生長生殖不能利用的物質(zhì)，雜菌在選擇培育基上很難生存，因此不進(jìn)展嚴(yán)格無菌操作對D項(xiàng)試驗(yàn)影響也不大。外植體的培育必需在嚴(yán)格的無菌環(huán)境中進(jìn)展，而且操作的各環(huán)節(jié)都要留意嚴(yán)格滅菌，否則，外植體就會因感染雜菌而腐爛，導(dǎo)致試驗(yàn)失敗，所以，不進(jìn)展嚴(yán)格無菌操作對C項(xiàng)試驗(yàn)影響最大。微生物培育過程中消毒和滅菌環(huán)節(jié)格外重要，以下滅菌或消毒方法不正確的選項(xiàng)是〔 〕ABCD儀器或試劑固體培育基接種環(huán)〔針〕菌種稀釋液滴管消毒或滅菌方法A.A高溫高壓B.B火焰灼燒C.C紫外光照耀D.D酒精消毒【答案】C【解析】解：A、固體培育基應(yīng)當(dāng)用高壓蒸汽滅菌，A正確；B、接種環(huán)應(yīng)當(dāng)承受灼燒滅菌，B正確；C、菌種稀釋液不能用紫外光照耀，這樣會導(dǎo)致目的菌死亡，C錯誤；D、滴管應(yīng)當(dāng)用酒精消毒，D正確。應(yīng)選：C。消毒滅菌消毒滅菌使用較為溫順的物理或化學(xué)方法殺死物體外表或使用猛烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微概念內(nèi)部的局部微生物〔不包芽孢和孢子〕生物〔包括芽孢和孢子〕常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌線消毒法適用對象操作空間、某些液體、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培育基等此題考察微生物的分別和培育，要求考生把握無菌技術(shù)，屬于考綱識記和理解層次的考察。為純化菌種，在鑒別培育基上接種纖維素降解細(xì)菌，培育結(jié)果如下圖。以下表達(dá)正確的選項(xiàng)是〔 〕倒平板后需間歇晃動，以保證外表平坦接種過程中接種環(huán)共需四次灼燒處理可選擇Ⅲ30～300的平板進(jìn)展計(jì)數(shù)Ⅲ區(qū)菌落四周的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色【答案】B【解析】解：A、倒平板后無需晃動，A錯誤；BB正確；C、假設(shè)對菌落進(jìn)展計(jì)數(shù)，應(yīng)當(dāng)承受稀釋涂布平板法接種，C錯誤；D、剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和纖維素水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反響，D錯誤。應(yīng)選：B。分析平板結(jié)果可知，承受的接種方法為平板劃線法，且劃線挨次為Ⅰ區(qū)、Ⅱ區(qū)、Ⅲ區(qū)，可以看到Ⅲ區(qū)中出現(xiàn)了單菌落。此題結(jié)合圖解，考察微生物的分別和培育，要求考生識記接種微生物常用的兩種方法，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的學(xué)問準(zhǔn)確答題。以下有關(guān)微生物培育的表達(dá)，錯誤的選項(xiàng)是〔〕培育基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法培育基中必需包含碳源、氮源、水、無機(jī)鹽及瓊脂等成分純化培育微生物常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法以尿素為唯一氮源的培育基可以選擇培育分解尿素的微生物【答案】B【解析】【分析】此題主要考察培育基的成分、微生物的分別，意在考察學(xué)生對微生物培育過程中的無菌操作、培育基的成分、微生物分別方法的識記、理解與把握?！窘獯稹颗嘤鶞缇Ｓ玫姆椒ㄊ歉邏赫羝麥缇?，A正確；微生物培育基的主要養(yǎng)分物質(zhì)有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等半固體培育基需要瓊脂，液體培育基不需要瓊脂，B錯誤；純化培育微生物常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，C正確；以尿素為唯一氮源的培育基可以選擇培育分解尿素的微生物，D正確。應(yīng)選B。以下圖是高壓蒸汽滅菌鍋構(gòu)造示意圖。有關(guān)操作正確的選項(xiàng)是〔〕滅菌桶內(nèi)參加的水量要適中軟管應(yīng)置于滅菌桶內(nèi)121kPa滅菌完成后，馬上翻開蓋子【答案】B【解析】【分析】此題考察微生物的分別和培育，重點(diǎn)考察無菌技術(shù)，只有考試識記高壓蒸汽滅菌的具體操作步驟即可正確答題，屬于考綱識記層次的考察?！窘獯稹扛邏赫羝仠缇牟僮鞑襟E：首先將內(nèi)層滅菌桶取出，再向外層鍋內(nèi)參加適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。〔3〕加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。用電爐或煤氣加熱，并同時(shí)翻開排氣閥，使水沸騰以排解鍋內(nèi)的冷空氣。滅菌所需時(shí)間到后，切斷電源或關(guān)閉煤氣，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表的壓力降至0時(shí)，翻開排氣閥，旋松螺栓，翻開蓋子，取出滅菌物品。假設(shè)壓力未降到0時(shí)，翻開排氣閥，就會因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培育基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培育基而發(fā)生污染。6〕37℃24小時(shí)，經(jīng)檢查假設(shè)無雜菌生長，即可待用。綜上所述，B正確，ACD錯誤。應(yīng)選B。以下有關(guān)菌落的表述，不正確的選項(xiàng)是〔 〕每個菌落可由一種或多種細(xì)菌大量生殖而成各種霉菌在面包上生長形成不同顏色的斑塊也是菌落噬菌體能使固體培