基于ctDNA的無(wú)創(chuàng)檢測(cè)在腫瘤臨床治療中的應(yīng)用

基于ctDNA的無(wú)創(chuàng)檢測(cè)

在腫瘤臨床治療中的應(yīng)用ctDNA的生物學(xué)特性用于解決哪些問(wèn)題

ctDNA臨床應(yīng)用其他常見(jiàn)的靶基因檢測(cè)ctDNA(循環(huán)腫瘤DNA)

ctDNA的含量總游離DNA上皮組織5-10%腫瘤0.01-10%胃腸道5-10%血細(xì)胞80-90%largely<1.0%

ctDNA存在部位血漿

?

水91%

?

蛋白

7%

?

代謝物(微量)

?

Cell-freeDNA(微量)細(xì)胞層

?

白細(xì)胞2-3%

?

血小板塊

2-3%

?

紅細(xì)胞90%

?

CTC(微量)

ctDNA(cfDNA)的片段分析

ctDNA半衰期短（2小時(shí)）ctDNA的生物學(xué)特性用于解決哪些問(wèn)題

ctDNA臨床應(yīng)用其他常見(jiàn)的靶基因檢測(cè)1、部分晚期患者無(wú)手術(shù)機(jī)會(huì)

2、無(wú)足夠的組織標(biāo)本進(jìn)行基因分型3、重復(fù)活檢患者依從性差

作為金標(biāo)本的組織靶基因檢測(cè)也存在局限性

一、取材困難二、腫瘤異質(zhì)性：同一腫瘤組織中，各部位的細(xì)胞突變情況不一樣三、無(wú)法對(duì)療效進(jìn)行監(jiān)測(cè)組織標(biāo)本無(wú)法用于動(dòng)態(tài)檢測(cè)基于血液的靶基因檢測(cè)可惠及每一位患者指導(dǎo)用藥勻質(zhì)標(biāo)本實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)作為無(wú)法獲取組織標(biāo)本的補(bǔ)充，無(wú)創(chuàng)檢測(cè)結(jié)果指導(dǎo)臨床用藥循環(huán)而勻質(zhì)的ctDNA標(biāo)本，在一定程度克服了異質(zhì)性實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，提高全程管理水平ctDNA的生物學(xué)特性用于解決哪些問(wèn)題

ctDNA臨床應(yīng)用其他常見(jiàn)的靶基因檢測(cè)ctDNA的臨床意義——液體活檢14指導(dǎo)靶向治療腫瘤療效動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)-靶向治療終點(diǎn)-化療療效的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移監(jiān)測(cè)預(yù)后評(píng)估腫瘤篩查和早診ctDNA的臨床意義——液體活檢15指導(dǎo)靶向治療腫瘤療效動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)-靶向治療終點(diǎn)-化療療效的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移監(jiān)測(cè)預(yù)后評(píng)估腫瘤篩查和早診ctDNA和腫瘤組織的一致性？106patientsTissueBloodKRASandBRAFV600E

mutationRoutinegold-standardmethodsIntplex

100%concordance(BRAFmutation)96%concordance(KRASmutation)ThierryARetal.NatMed2014,20;430-5.液體活檢：ctDNA和腫瘤組織的比較轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌16First-linegefitinibinCaucasianEGFRmutation-positiveNSCLCpatients:aphase-IV,open-label,single-armstudy

推動(dòng)EGFR突變血液檢測(cè)的重要文獻(xiàn)BritishJournalofCancer(2014)110,55–62|doi:10.1038/bjc.2013.721共入組1060位高加索人群非小細(xì)胞肺癌患者，來(lái)自5個(gè)國(guó)家652例患者同時(shí)具有腫瘤組織和血液樣本，采用Qiagen試劑盒進(jìn)行檢測(cè)這兩者EGFR突變狀態(tài)吻合率為94.3%，敏感性為65.7%，特異性為99.8%。文章簡(jiǎn)介：IRESSA藥品說(shuō)明書(shū)更新中國(guó)Gefitinib說(shuō)明書(shū)更新（2015年2月13日cFDA批準(zhǔn)更新）第4頁(yè)<注意事項(xiàng)>

當(dāng)考慮本品用于晚期或轉(zhuǎn)移性NSCLC患者的一線(xiàn)治療時(shí)，推薦對(duì)所有患者的腫瘤組

織進(jìn)行EGFR突變檢測(cè)，如果腫瘤標(biāo)本不可評(píng)估，則可使用血液（血漿）標(biāo)本中獲得的循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)用于EGFR突變檢測(cè)。

只能使用經(jīng)論證可用于測(cè)定腫瘤或ctDNA的EGFR突變的檢測(cè)方法，檢測(cè)方法須穩(wěn)定、可靠并且靈敏，以避免出現(xiàn)假陰性或假陽(yáng)性的測(cè)定結(jié)果

ctDNA伴隨診斷寫(xiě)進(jìn)我國(guó)的專(zhuān)家共識(shí)19若腫瘤標(biāo)本不可評(píng)估，可從血液標(biāo)本中評(píng)估ctDNA，以盡最大可能明確最可能從吉非替尼治療中收益的NSCLC患者目前成熟且最常用的血液EGFR突變檢測(cè)方法為：突變擴(kuò)增阻滯（ARMS）ctDNA的臨床意義——液體活檢20靶向治療指導(dǎo)腫瘤療效動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)-靶向治療終點(diǎn)-化療療效的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移監(jiān)測(cè)預(yù)后評(píng)估腫瘤篩查21ctDNA的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)-晚期非小細(xì)胞肺癌療效評(píng)估非小細(xì)胞肺癌ctDNA融合基因標(biāo)記物檢測(cè)：CAPP-SeqctDNA可以很好地監(jiān)測(cè)NSCLC的療效NewmanAMetal.NatMed2014,20(5):548-54.

ChemtherapyCarbo/Pem/BevPem/BevCrizotinibMonthCTctDNA(pgmL-1)Tumorvolume(cm3)Time(months)TumorvolumeFusionsNDctDNA的臨床意義——液體活檢22靶向治療指導(dǎo)腫瘤療效動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)-靶向治療終點(diǎn)-化療療效的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移監(jiān)測(cè)預(yù)后評(píng)估腫瘤篩查和早診ctDNA對(duì)早期直腸癌的術(shù)后監(jiān)測(cè)23ctDNA檢測(cè)：SSV(體細(xì)胞結(jié)構(gòu)變異)ReinertTetal.Gut2016,65(4):625-34.

ResectionstageⅡrectumRecto-scopyRecto-scopy分子復(fù)發(fā)CT臨床復(fù)發(fā)Colono-scopyRadiationtherapyPreDay8303mth691215182124273033C12D1C12I2CEACEAthresholdCEAug/LTumorGEs/mlplasma基于血液的肺癌EGFR突變檢測(cè)III、IV期肺腺癌易瑞沙?、特羅凱?、凱美納?等方法：ARMS-PCRQIAGEN試劑盒為主收費(fèi)：2760元T790M突變檢測(cè)（Digital-PCR)檢測(cè)極限小于0.01%，并可實(shí)現(xiàn)絕對(duì)定量22基因列表優(yōu)勢(shì)：高通量，覆蓋了大部分非小細(xì)胞肺癌和結(jié)直腸癌的驅(qū)動(dòng)基因劣勢(shì)：敏感度高于Sanger測(cè)序，但稍低于A(yíng)RMS-PCR特殊保存方式1、抑制核酸酶介導(dǎo)的ctDNA降解2、防腐劑穩(wěn)定有核血細(xì)胞標(biāo)本送檢流程采用專(zhuān)用