050-ACTH檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

XX醫(yī)院檢驗(yàn)科XX醫(yī)院檢驗(yàn)科第1頁共4頁ACTH檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編號(hào)：sop-050文件編號(hào)：sop-050文件名稱：ACTH起草人：審核人：批準(zhǔn)人：起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：目的：用于體外定量測(cè)定人EDTA-血漿樣本中促腎上腺皮質(zhì)激素的含量適用機(jī)型：LIAISON測(cè)定原理：承受免疫夾心化學(xué)發(fā)光檢測(cè)方法。在磁微?！补滔唷成习挥刑禺愋缘氖髥慰寺】贵wN-端，另一種單克隆抗體〔ACTH的C-端碎片〕與異魯米諾衍生物結(jié)合〔異魯米諾抗體結(jié)合物〕ACTH與固相上的單克隆抗體結(jié)合，然后異魯米諾抗體結(jié)合物與已結(jié)合到固相的ACTH反響。孵育完畢后，未結(jié)合的物質(zhì)會(huì)被清洗移除，最終，參加啟動(dòng)試劑，引發(fā)瞬時(shí)化學(xué)發(fā)光反響，產(chǎn)生光信(RLU)指示異魯米諾-抗體結(jié)合物的數(shù)量，從而得出校準(zhǔn)品、樣本或質(zhì)控品中的ACTH測(cè)定步驟：儀器測(cè)試預(yù)備：按LIAISON操作手冊(cè)翻開系統(tǒng)，進(jìn)展每日使用前的維護(hù)。包括清洗、光路檢測(cè)等。樣本的采集、原料及保存：樣本中的ACTH分子降解速度很快，因此在處理樣本時(shí)必需嚴(yán)格遵循以下要求。必需使用冷凍儲(chǔ)存的人EDTA承受靜脈穿刺方法采集血樣并保存在含EDTA抗凝劑的硅化玻璃試管、真空采血管〔紫帽〕或類似的容器里。避開溶血。樣本采集后應(yīng)馬上將樣本管置于冰浴中低溫保存。樣本采集后120存在塑料或硅化玻璃試管里并于-20°C或以下低溫冷凍。每份分裝的上清液的最小體積300L。檢測(cè)前，慎重解凍混勻樣本，檢查是否有氣泡并去除氣泡。解凍的樣本應(yīng)置于2-8℃并6高度溶血、高度脂血、含有顆粒物質(zhì)或明顯被微生物污染的樣本不能用于檢測(cè)。制止使用凝血樣本。避開反復(fù)凍融。任何沒有用完的分裝液都應(yīng)當(dāng)丟棄。檢測(cè)樣本一次需要的最小量為300L(150L樣本+150L保護(hù)體積)試劑的預(yù)備：在揭開密封紙之前，先輕輕地水平搖擺試劑整盒〔為了防止泡沫形成。粒重懸浮。將試劑盒放入儀器試劑區(qū)，等待30分鐘。在此期間，磁顆粒自動(dòng)地被攪拌并完全地重懸浮。定標(biāo):該測(cè)試已經(jīng)用國際參考標(biāo)準(zhǔn)NIBSC1stIRR84/510〔重定標(biāo)為一個(gè)的、儀器特異的測(cè)量水平。以下狀況需要定標(biāo)：每轉(zhuǎn)變一次批號(hào)〔指試劑整盒或者激發(fā)試劑而言每使用一個(gè)的試劑盒，LIAISON的每次維護(hù)之后，當(dāng)質(zhì)控值不在期望范圍之5℃時(shí)。質(zhì)控：請(qǐng)使用適當(dāng)?shù)馁|(zhì)控作為內(nèi)部質(zhì)控。測(cè)試：嚴(yán)格依據(jù)LIAISON的操作說明操作。每一個(gè)測(cè)試參數(shù)都由試劑盒上的條形碼識(shí)別。需要進(jìn)一步的信息請(qǐng)參考LIAISON反響步驟：150μl 樣本，定標(biāo)物或質(zhì)控+200μl 示蹤物+20μl 磁顆粒20min 溫育，洗滌3s 測(cè)量結(jié)果計(jì)算：LIAISON借助于由主曲線兩點(diǎn)定標(biāo)而得到的一條定標(biāo)曲線，自動(dòng)地計(jì)算每一個(gè)樣本的ACTHpg/ml1pg/ml0.2202pmol/l.需要更進(jìn)一步的信息請(qǐng)參考LIAISON結(jié)果說明參考范圍測(cè)量范圍：直接計(jì)算ACTH濃度，其濃度范圍為1.61500pg/mL。1pg/mL相當(dāng)于0.2202pmol/L。LIAISON?ACTH589個(gè)歐洲個(gè)體樣本送往試驗(yàn)室進(jìn)展ACTH相關(guān)的臨床爭(zhēng)論。這些樣本〔男=270，女=313，不明=6〕在使用參考方法檢測(cè)后被歸類為正常個(gè)體樣本。16.3pg/mL，ACTH4.7—48.8pg/mL〔5％-95%可信區(qū)間。每個(gè)試驗(yàn)室應(yīng)建立自己的根底參考值范圍。臨床樣本：我們同時(shí)對(duì)51個(gè)病理樣本作了臨床爭(zhēng)論，正常樣本和病理樣本的統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果如下表所示：640例樣本的臨床ACTH臨床病癥樣本數(shù)平均值pg/mL標(biāo)準(zhǔn)差pg/mL2.5th%pg/mL中值(50th%)pg/mL97.5th%pg/mL最小值pg/mL最大值pg/mL〔ST〕1510.315.02.56.746.62.463.0〔AD〕9219.1157.362.8134.3437.059.4450.0ACTH綜合癥〔ES〕8424.6489.9143.7187.71381.0139.01500.0〔CS〕12116.864.752.0103.1236.150.0240.0納爾遜(氏)綜合癥〔NS〕4729.8625.9165.2632.11460.0155.01500.0竇巖導(dǎo)管插入術(shù)〔SPC〕3298.167.7225.9337.1337.3220.0337.0〔N〕58916.314.63.616.360.51.4106.1試劑的保存試劑盒密封狀態(tài)下：2-8°C條件下保存至失效期。翻開密封膜后或2-8°C：至少可穩(wěn)定儲(chǔ)存2周。2周后，假設(shè)質(zhì)控值仍在靶值范圍內(nèi)，試劑盒仍可使用。假設(shè)試劑盒已開封，必需使用同一臺(tái)化學(xué)發(fā)光儀進(jìn)展檢測(cè)。不能冷凍。為便利以后使用時(shí)磁微粒的重懸浮，試劑盒必需直立放置。避開直射光線。校準(zhǔn)品凍干粉：2-8°C條件下保存至失效期。配制后：2-8°C保存3天。配制后冷凍：-20°C可保存1個(gè)月。促腎上腺皮質(zhì)激素分子在液體中抗熱穩(wěn)定性差：重配制后的校準(zhǔn)品置于室溫的時(shí)間不能長(zhǎng)于在LIAISON?儀器上操作需要的時(shí)間。重配制的校準(zhǔn)品溶液必需馬上分裝轉(zhuǎn)移到系列塑料或硅化玻璃試管里并低溫冷凍保存。溶解后的校準(zhǔn)品必需在當(dāng)日全部用完。分裝的最小體積為600L(450L定標(biāo)液+150L死體積)。分裝的每份校準(zhǔn)品僅允許一次冷凍和溶解。校準(zhǔn)品處理過程中，承受適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施避開細(xì)菌污染分析方法的局限性此試劑盒只能用于在LIAISON?。試劑盒組分不能拆分。過效期的試劑盒不能使用。牢靠的結(jié)果依靠嫻熟的技術(shù)人員和嚴(yán)格的操作程序。細(xì)菌污染或熱滅活的樣本可能影響試驗(yàn)結(jié)果。檢測(cè)結(jié)果在正常值范圍內(nèi)并不能排解腎上腺皮質(zhì)功能失常，必需結(jié)合其它診斷程序一起做出推斷。檢測(cè)結(jié)果以定量形式報(bào)告。但是，不能依據(jù)單次的檢測(cè)結(jié)果來推斷是否患有疾病，而應(yīng)當(dāng)結(jié)合臨床觀看結(jié)果和醫(yī)學(xué)推斷來下結(jié)論。每個(gè)治療方案都應(yīng)基于個(gè)體案例來打算。上海市XX醫(yī)院檢驗(yàn)科 ACTH檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第4頁共4頁LIAISON?ACTH檢測(cè)是在分析物完整和不變狀態(tài)下進(jìn)展的影響，故用不用的檢測(cè)試劑測(cè)試可能會(huì)得到不全都的結(jié)果。即使樣本中參加了HAMA中和試劑，極高濃度的HAMA〔人抗鼠抗體〕仍可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。樣本中ACTH水平超出測(cè)量范圍的樣本可用LIAISON?內(nèi)分泌稀釋液〔產(chǎn)品代號(hào)：319133〕預(yù)先稀釋后再測(cè)量。警告及預(yù)防措施-此試劑盒用于檢測(cè)冷凍的EDTA樣本。其根底參考值范圍和全部性能數(shù)據(jù)都是基于冷凍的EDTA遵守處理全部試驗(yàn)試劑的一般性預(yù)防措施應(yīng)當(dāng)依據(jù)當(dāng)?shù)胤蓽?zhǔn)則廢棄全部的廢物全部試劑中包含的人血清均用免疫測(cè)試檢測(cè)過，