桉樹促生菌的16S rDNA分析及接種造林試驗的開題報告

桉樹促生菌的16SrDNA分析及接種造林試驗的開題報告一、研究背景和意義桉樹是我國南方地區(qū)十分重要的經(jīng)濟利用樹種之一，也是其它國家熱帶和亞熱帶地區(qū)造林的主要樹種之一。然而，目前國內(nèi)外普遍存在桉樹種植株系之間耐旱、耐寒、抵御病蟲害及土壤肥力利用率等生長表現(xiàn)的較大差異。而菌根真菌作為一種重要的土壤微生物有機體，它們與植物根系結(jié)合能夠增加植物吸收土壤養(yǎng)分的能力，提高植物對抗自然災(zāi)害和環(huán)境逆境的能力，促進植物生長發(fā)育，增加植物產(chǎn)量和促進生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)等。桉樹促生菌作為一類特定的菌根真菌，在桉樹諸多生長與環(huán)境因素中扮演著重要的角色。因此，通過對桉樹促生菌多樣性分析，研究不同環(huán)境條件下桉樹與其生物多樣性之間的關(guān)系，對桉樹的選育、栽培及造林有著重要的意義。二、研究內(nèi)容1.收集桉樹根系樣品，提取并擴增其中的16SrDNA片段2.對16SrDNA序列進行多樣性分析，包括建立系統(tǒng)發(fā)育樹、物種多樣性指數(shù)計算、群落結(jié)構(gòu)分析等，獲得桉樹促生真菌多樣性信息3.對桉樹促生真菌進行培養(yǎng)和鑒定，篩選出適宜接種桉樹的促生真菌菌株4.進行實地調(diào)查與造林試驗，比較接種和未接種菌根真菌的桉樹的生長情況三、研究方法1.采集桉樹根系樣品，提取其DNA，擴增16SrDNA片段，并對其進行PCR純化和測序；2.對所獲得的序列進行測序拼接和質(zhì)量控制；進一步通過序列比對和進化樹構(gòu)建等分析方法，獲取桉樹根系內(nèi)菌根真菌的多樣性信息；3.鑒定菌株的方法包括microculture環(huán)展法和基于ITS和TEF1-α等多個基因的分子生物學(xué)方法；4.對各菌株進行實驗室培養(yǎng)，篩選出最適合桉樹生長的特定種類的菌根真菌。5.平行設(shè)計實驗，選用高產(chǎn)的桉樹品種，接種和不接種菌根真菌兩組，每組50株，在相同條件下進行造林試驗；比較兩組桉樹的變量，如生長情況、葉面積、生物量等。四、預(yù)期成果1.對桉樹促生真菌的多樣性進行分析，深入探討不同環(huán)境條件下菌根真菌群落結(jié)構(gòu)的變化；2.篩選出適宜接種在桉樹上的菌根真菌，提高桉樹的生長速度和抗逆能力；3.比較接種和未接種桉樹的生長情況，為桉樹的栽培和造林提供科學(xué)依據(jù)。五、研究難點和解決方法1.難點:提取、擴增、純化和測序菌根真菌的16SrDNA。解決方法：考慮使用PCR技術(shù)，以及優(yōu)化模板DNA的提取、PCR擴增和測序過程；2.難點:在廣泛應(yīng)用桉樹的地區(qū)收集足夠樣品的難度較大。解決方法：建立合適的采樣方案，并尋求合作伙伴提供樣品；3.難點：實地造林試驗的條件控