保健食品毒理_第1頁(yè)
保健食品毒理_第2頁(yè)
保健食品毒理_第3頁(yè)
保健食品毒理_第4頁(yè)
保健食品毒理_第5頁(yè)
已閱讀5頁(yè),還剩24頁(yè)未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶(hù)提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

保健食品平安性毒理學(xué)評(píng)價(jià)1.主要內(nèi)容一、審評(píng)根本要求二、毒理學(xué)試驗(yàn)工程的選擇三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇四、樣品的預(yù)處理原那么五、各試驗(yàn)工程應(yīng)注意的要點(diǎn)六、審評(píng)結(jié)論七、毒理學(xué)平安性評(píng)價(jià)時(shí)應(yīng)考慮的問(wèn)題2.一、審評(píng)根本要求1.配方原〔輔〕料、用量、理化性質(zhì)2.劑量食用方法及用量3.工藝規(guī)格化產(chǎn)品符合配方、工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)4.批號(hào)注意批號(hào)是否一致,益生菌、奶制品等保質(zhì)期短的除外3.二、毒理學(xué)試驗(yàn)工程的選擇1.毒理學(xué)評(píng)價(jià)的四個(gè)階段2.普通食品及藥食同源的原料3.可用于保健食品的原料4.新原料4.1.毒理學(xué)評(píng)價(jià)的四個(gè)階段第一階段:LD50,聯(lián)合急性毒性,一次最大耐受量試驗(yàn)第二階段:遺傳毒性試驗(yàn)、30天喂養(yǎng)試驗(yàn)、傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)其中,遺傳毒性試驗(yàn)的組合應(yīng)該考慮原核細(xì)胞與真核細(xì)胞、體內(nèi)試驗(yàn)與體外試驗(yàn)相結(jié)合的原那么。第三階段:亞慢性毒性試驗(yàn)——90天喂養(yǎng)試驗(yàn)、繁殖試驗(yàn)、代謝試驗(yàn)。第四階段:慢性毒性試驗(yàn)〔包括致癌試驗(yàn)〕5.2.以普通食品及藥食同源的原料生產(chǎn)的保健食品分以下情況:以下情況免做毒理學(xué)試驗(yàn)〔1〕以傳統(tǒng)工藝加工而成,食用方法與傳統(tǒng)方式相同?!?〕以水提物配制,服用量與常規(guī)用量相同,有關(guān)資料未提示其不平安?!?〕列入營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑或營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑名單的化合物,其原料來(lái)源、生產(chǎn)工藝、質(zhì)量符合國(guó)家相關(guān)要求,配方中含量也符合有關(guān)規(guī)定。在生產(chǎn)加工過(guò)程中用水提工藝以外的需做毒理學(xué)試驗(yàn)〔1〕服用量與常規(guī)用量相同急性毒性、三項(xiàng)致突變?cè)囼?yàn)〔2〕服用量大于常規(guī)用量還需加做30天喂養(yǎng)試驗(yàn),必要時(shí)進(jìn)行傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)和第三階段毒性試驗(yàn)

6.3.可用于保健食品的原料一般只要求做急性毒性、三項(xiàng)致突變?cè)囼?yàn)、30天喂養(yǎng)試驗(yàn),特殊情況除外。特殊情況:孕婦、乳母單一成份,人參、西洋參、蜂王漿等4.新原料〔1〕定義:以普通食品和可用于保健食品范圍以外的動(dòng)植物或提取物、微生物、化學(xué)合成物等物品的原料簡(jiǎn)稱(chēng)新原料?!?〕毒理學(xué)試驗(yàn)原那么:對(duì)新原料及該原料生產(chǎn)的保健食品分別進(jìn)行毒理學(xué)平安性評(píng)價(jià),單一新原料生產(chǎn)的保健食品可替代。

7.〔3〕試驗(yàn)工程選擇①無(wú)食用史需做四階段試驗(yàn)②局部地區(qū)有食用史需做三階段試驗(yàn)其中,100倍<攝入量<300倍需做第四階段試驗(yàn)③有食用史需做二階段試驗(yàn)經(jīng)評(píng)價(jià)后下一階段試驗(yàn)④廣泛食用的原料二階段試驗(yàn)

食用史包括地區(qū)、年代、人群、食用量、頻率等情況

確定8.⑤化學(xué)物已有權(quán)威機(jī)構(gòu)進(jìn)行系統(tǒng)的毒理學(xué)平安性評(píng)價(jià)有資料證明所用原料與其一致如試驗(yàn)結(jié)果與權(quán)威機(jī)構(gòu)進(jìn)行的評(píng)價(jià)不一致,需進(jìn)入下階段的試驗(yàn)⑥有新原料的保健食品根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果綜合分析。

二階段試驗(yàn)9.三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇及給樣量1.根據(jù)各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的具體要求,合理選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常用大鼠和小鼠,品系不限,推薦使用近交系。2.動(dòng)物應(yīng)符合?實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例?清潔級(jí)或清潔級(jí)以上動(dòng)物合格證號(hào)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室合格證號(hào)3.灌胃量大鼠:10ml/kg?BW〔假設(shè)以水為溶劑,推薦20ml/kg?BW〕小鼠:20ml/kg?BW10.四、樣品的預(yù)處理原那么1.介質(zhì)的選擇應(yīng)選擇適合于受試動(dòng)物的溶劑、乳化劑、助懸劑,要求無(wú)毒、與受試物不發(fā)生反響、穩(wěn)定性好。常用的介質(zhì)有:蒸餾水、食用植物油、淀粉、明膠及羧甲基纖維素等。2.液體類(lèi)受試物濃縮倍數(shù)應(yīng)符合試驗(yàn)要求。濃縮方法不應(yīng)破壞其有效成份,常用的有60℃~70℃減壓或常壓蒸發(fā)、冷凍枯燥。按工藝要求。3.袋泡茶類(lèi)處理方法與產(chǎn)品推薦飲用方法相同推薦用:80℃~90℃浸泡30min水量為受試物的10倍,提取2次,2次提取液合并濃縮至所需濃度標(biāo)明該濃縮液與受試物的比例常壓,用水11.4.含乙醇類(lèi)〔1〕不需濃縮的受試物乙醇濃度<15%直接進(jìn)行試驗(yàn)乙醇濃度>15%乙醇濃度應(yīng)調(diào)至15%〔2〕需濃縮的受試物乙醇濃度<15%濃縮后調(diào)至原乙醇濃度乙醇濃度>15%濃縮后調(diào)至15%乙醇濃度在進(jìn)行乙醇濃度調(diào)整時(shí)必須用原酒基5.膨脹系數(shù)較高的受試物選擇可溶性介質(zhì)給受試物的方法:灌胃其最高濃度最大灌胃量時(shí)達(dá)不到人體推薦量的100倍,按實(shí)際到達(dá)的倍數(shù)標(biāo)明受試物的膨脹系數(shù)

12.6.益生菌等微生物類(lèi)保健食品在進(jìn)行Ames試驗(yàn)或體外細(xì)胞試驗(yàn)時(shí)需將受試物滅活。需濃縮的應(yīng)采用低溫枯燥法或由企業(yè)提供所需濃度的受試物〔附方法、技術(shù)參數(shù)〕。7.以食品為載體的受試物〔1〕有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值按設(shè)計(jì)量進(jìn)行飼料的營(yíng)養(yǎng)成份調(diào)整,提供詳細(xì)的說(shuō)明?!?〕大豆蛋白、乳清蛋白如質(zhì)量、工藝等符合食品標(biāo)準(zhǔn)和平安要求,允許去除。如僅以該原料生產(chǎn)的,可申請(qǐng)免做毒理學(xué)試驗(yàn)。8.詳細(xì)說(shuō)明受試物處理方法,濃度配制情況,核對(duì)受試物的給予劑量

13.五、各試驗(yàn)工程應(yīng)注意的要點(diǎn)1.急性毒性試驗(yàn)動(dòng)物:大鼠或小鼠體重:大鼠180~200g,小鼠18~22g適應(yīng)環(huán)境3~5天試驗(yàn)前應(yīng)空腹〔一般禁食16h左右,不限制飲水〕劑量:一次性給予受試物或一日屢次給予〔間隔4~6h,24h不超過(guò)3次,合并1次劑量計(jì)算〕,設(shè)計(jì)劑量應(yīng)到達(dá)人體可能攝入量100倍以上。14.2.骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)〔1〕動(dòng)物:一般選用小鼠7~12周齡,體重25~30克,兩種性別,至少各5只,環(huán)境適應(yīng)3~5天。〔2〕劑量設(shè)計(jì):能求出LD50,高、中、低劑量分別為1/2,1/4,1/8LD50,低劑量組不應(yīng)該出現(xiàn)任何毒性表現(xiàn)。求不出LD50,高劑量10g/kg?BW人可能攝入量的100倍一次最大灌胃劑量再下設(shè)中、低劑量組,另設(shè)溶劑對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照組〔3〕閱片:盲法閱片,計(jì)算微核率應(yīng)計(jì)數(shù)1000個(gè)以上PCE,同時(shí)計(jì)算PCE/RBC的比值。PCE/RBC:是評(píng)價(jià)細(xì)胞毒性的指標(biāo),它的比值不低于陰性對(duì)照組的20%。15.3.小鼠精子畸形試驗(yàn)〔1〕實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:成年雄性小鼠6~8周齡,體重25~35克,適應(yīng)環(huán)境3~5天,每組至少5只存活動(dòng)物?!?〕劑量:劑量設(shè)計(jì)原那么同微核試驗(yàn)〔3〕時(shí)間:動(dòng)物的處死一般在首次給樣量后第35天〔3〕試驗(yàn)結(jié)果:應(yīng)詳細(xì)列出畸形類(lèi)型畸形類(lèi)型:無(wú)鉤、香蕉形、胖頭、無(wú)定形、尾折疊、雙頭、雙尾等陰性對(duì)照組的精子異常率為0.8~3.4%16.4.哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)〔1〕實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、劑量設(shè)計(jì)同微核試驗(yàn)〔2〕每只動(dòng)物分析100個(gè)中期相細(xì)胞,每個(gè)劑量組不少于1000個(gè)中期相細(xì)胞?!?〕觀察工程:染色體數(shù)目的改變非整倍體、多倍體、內(nèi)復(fù)制染色體結(jié)構(gòu)的改變斷裂、微小體、有著絲點(diǎn)環(huán)、無(wú)著絲點(diǎn)環(huán)、單體互換、雙微小體、裂隙等。17.

5.小鼠睪丸染色體畸變?cè)囼?yàn)〔1〕實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、劑量設(shè)計(jì)同精子畸形試驗(yàn)?!?〕各組均于第一次給予受試物后的第12~14天將受試動(dòng)物處死、制片。注意:性染色體早熟別離、常染色體早熟別離、細(xì)胞染色體結(jié)構(gòu)畸變必須分別列表計(jì)算,其中細(xì)胞染色體結(jié)構(gòu)畸變是最重要的觀察指標(biāo)。6.Ames試驗(yàn)(1)試驗(yàn)菌株TA97TA98TA100TA102自發(fā)回變菌落數(shù)(+S9)90~18030~50120~200240~320(2)劑量設(shè)計(jì):要求有5個(gè)劑量組,外加陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、溶劑對(duì)照。最高劑量組5mg/皿、飽和濃度、對(duì)細(xì)菌產(chǎn)生最小毒性濃度。對(duì)最高劑量組5mg/皿的正確理解最低劑量組0.2μg/皿每劑量組間隔<5倍

18.(3〕受試物處理含有組氨酸的受試物:1〕根據(jù)測(cè)得的組氨酸含量,假設(shè)能誘發(fā)回復(fù)突變率增加,加設(shè)組氨酸平行對(duì)照組。2〕將受試物經(jīng)XAD-Ⅱ過(guò)濾洗脫預(yù)處理。對(duì)可能抑菌的受試物根據(jù)預(yù)試驗(yàn),假設(shè)在5mg/皿或以下開(kāi)始抑菌,需將抑菌劑量、回變列入表中,在此劑量以下再設(shè)4個(gè)劑量。含有乙醇的受試物先將乙醇去除再進(jìn)行試驗(yàn)。受試物除菌方法高壓滅菌、濾膜除菌等,所選用的方法應(yīng)根據(jù)工藝確定?!?〕試驗(yàn)結(jié)果:陰性結(jié)果重復(fù)2次,陽(yáng)性結(jié)果重復(fù)3次。19.7.30天、90天喂養(yǎng)試驗(yàn)〔1〕動(dòng)物選擇原那么上選用剛斷乳的大鼠,體重不應(yīng)超過(guò)100g具有特殊功能,如輔助降血脂、減肥功能、通便功能的受試物,大鼠的初始體重應(yīng)適當(dāng)大些?!?〕劑量設(shè)計(jì)三個(gè)劑量組和一個(gè)對(duì)照組,每劑量至少20只動(dòng)物,雌雄各半。能求出LD50的受試物:以LD50的10~25%作為最高劑量組,在此根底上下設(shè)幾個(gè)劑量,最低劑量組至少是人的可能攝入量的3倍。不能求出LD50的受試物:應(yīng)盡可能涵蓋人的可能攝入量100倍。體重:成人以60kg,兒童〔3~7歲〕以20kg計(jì)。對(duì)于人體攝入量較大的受試物,高劑量可以按最大灌胃劑量或在飼料中的最大摻入量〔30天,10%;90天,8%〕進(jìn)行設(shè)計(jì)。試驗(yàn)報(bào)告中應(yīng)說(shuō)明劑量設(shè)計(jì)的根據(jù)和計(jì)算方法。20.〔3〕受試物摻入:摻入不含營(yíng)養(yǎng)的受試物且攝入量較大〔>5%〕或摻入糖類(lèi)及其它營(yíng)養(yǎng)素應(yīng)考慮調(diào)整各劑量組飼料與對(duì)照在熱量、營(yíng)養(yǎng)素等方面一致,且各種營(yíng)養(yǎng)素的含量應(yīng)符合動(dòng)物飼料的有關(guān)要求。對(duì)生理需要量與毒作用劑量相近的人體必需營(yíng)養(yǎng)素〔如VA、硒等〕,在按其推薦量設(shè)計(jì)劑量時(shí),如該物質(zhì)的劑量到達(dá)的毒作用劑量,在原有劑量設(shè)計(jì)的根底上,增設(shè)去除該物質(zhì)或降低該物質(zhì)劑量〔如降至NOAEL〕,聯(lián)合毒性作出評(píng)價(jià)。推薦量大的受試物可根據(jù)配方去除輔料或有資料證明平安的原料,說(shuō)明處理方法、理由,且與生產(chǎn)工藝一致。〔4〕實(shí)驗(yàn)操作:嚴(yán)格按照?保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)〔2003年版〕?執(zhí)行,首選飼料摻入法,單籠飼養(yǎng)。21.〔5〕觀察指標(biāo):動(dòng)物生長(zhǎng)、活動(dòng)的一般狀況觀察。動(dòng)物的體重、增重、每周進(jìn)食量、總進(jìn)食量、每周食物利用率。體重、進(jìn)食量、食物利用率三項(xiàng)指標(biāo)密切相關(guān),需綜合分析與判斷指標(biāo)的改變是否為受試物的毒性表現(xiàn)。血液學(xué)和血生化指標(biāo)血液學(xué)必測(cè)指標(biāo)包括血紅蛋白、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類(lèi),必要時(shí)測(cè)定血小板數(shù)和網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)等。血生化各項(xiàng)必測(cè)指標(biāo)包括:谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、尿素氮、肌酐、血糖、血清白蛋白、總蛋白、總膽固醇和甘油三酯。其中血糖受禁食時(shí)間的影響較大,動(dòng)物應(yīng)隔夜禁食;與人相比大鼠的白蛋白/球蛋白比值變異較大,以該指標(biāo)判斷產(chǎn)品的平安性需謹(jǐn)慎。22.〔6〕大體解剖及組織病理學(xué)檢查大體解剖觀察:應(yīng)對(duì)所有動(dòng)物進(jìn)行大體解剖觀察,觀察異常表現(xiàn)。臟器重量及臟器相對(duì)重量:肝、腎、脾、睪丸的絕對(duì)和相對(duì)重量為必測(cè)指標(biāo);主要審查臟器的相對(duì)重量。絕對(duì)重量和相對(duì)重量均改變,那么有重要的生物學(xué)意義。應(yīng)使用動(dòng)物處死時(shí)的體重作為計(jì)算臟器體重比。組織病理學(xué)檢查:報(bào)告中應(yīng)該是描述性的,應(yīng)包括正常組織和異常組織的詳細(xì)病理學(xué)描述。其它指標(biāo)觀察:根據(jù)受試物的性質(zhì)及所觀察到的毒性反響,判定是否增加其它敏感指標(biāo),如增加神經(jīng)毒性指標(biāo)的觀察。23.六、審評(píng)結(jié)論的判定1.認(rèn)可毒理學(xué)試驗(yàn):試驗(yàn)設(shè)計(jì)合理,操作標(biāo)準(zhǔn),試驗(yàn)結(jié)果能夠證明受試物的平安性。2.屬以下幾種情況之一,補(bǔ)充資料后建議〔1〕檢驗(yàn)報(bào)告格式不標(biāo)準(zhǔn),需要重新出具檢驗(yàn)報(bào)告毒理學(xué)試驗(yàn)報(bào)告?!?〕數(shù)據(jù)偏離歷史對(duì)照較大,需檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)做出解釋?!?〕未提供某些試驗(yàn)數(shù)據(jù),需要補(bǔ)充提供。3.重做試驗(yàn),大會(huì)再審,屬以下幾種情況之一:〔1〕由于實(shí)驗(yàn)操作不標(biāo)準(zhǔn),根據(jù)提供的檢驗(yàn)報(bào)告無(wú)法評(píng)價(jià)產(chǎn)品的平安性,需要做除30天/90天喂養(yǎng)試驗(yàn)以外的毒理學(xué)試驗(yàn);〔2〕已有數(shù)據(jù)提示可能存在平安性問(wèn)題,但難以下結(jié)論,需要重復(fù)試驗(yàn)。24.4.對(duì)產(chǎn)品的平安性不予認(rèn)可的情況如下:〔1〕毒理學(xué)評(píng)價(jià)的結(jié)果說(shuō)明產(chǎn)品在推薦劑量下對(duì)人體具有一定的毒性,存在平安性問(wèn)題。〔2〕產(chǎn)品的原料、配方存在明顯的平安性問(wèn)題,如配方含有“可用于保健食品的原料〞名單以外的原料,且未進(jìn)行新資源食品平安性毒理學(xué)評(píng)價(jià)?!?〕選擇平安性毒理學(xué)試驗(yàn)不符合程序規(guī)定,未完成相應(yīng)階段的毒理學(xué)試驗(yàn)。〔4〕毒理、功能、興奮劑與衛(wèi)生學(xué)、穩(wěn)定性試驗(yàn)樣品的批號(hào)不一致。〔5〕未按規(guī)定提供平安性毒理學(xué)評(píng)價(jià)資料的?!?〕30天/90天喂養(yǎng)試驗(yàn)劑量設(shè)計(jì)不合理或某些指標(biāo)異常,結(jié)果不可信。25.七、毒理學(xué)平安性評(píng)價(jià)時(shí)應(yīng)考慮的問(wèn)題

1.試驗(yàn)指標(biāo)的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和生物學(xué)意義在分析試驗(yàn)組與對(duì)照組指標(biāo)統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性時(shí),應(yīng)根據(jù)其有無(wú)劑量反響關(guān)系及與本實(shí)驗(yàn)室的歷史性對(duì)照值范圍比較的原那么來(lái)綜合考慮指標(biāo)差異有無(wú)生物學(xué)意義。2.生理作用與毒性作用對(duì)實(shí)驗(yàn)中某些指標(biāo)的異常改變,在結(jié)果分析評(píng)價(jià)時(shí)要

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶(hù)所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶(hù)上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶(hù)上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶(hù)因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論