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文檔簡介
茄科酸漿的藥用價(jià)值研究
酸漿是指含有大量草本植物(p.alkati)的酸漿屬(p.alkati)。酸漿花萼寬大、宿存、連生呈闊鐘形囊狀,漿果藏于其中,呈球狀,為橙紅色,種子小,呈扁腎形。酸漿原產(chǎn)于中國,南北方均有野生品種。酸漿的根及全草入藥,具有清熱、利咽、化痰、利尿等功能。宿存的花萼有顯著的清熱解毒功能。酸漿的漿果青色時(shí)即可食用,味微苦,紅果亦可生食、糖制、醋漬或制果漿。全草亦可供觀賞。酸漿的果實(shí)和宿萼中含有豐富的類胡蘿卜素。已有的證據(jù)表明,這類化合物具有多種防治疾病的功能,例如清除體內(nèi)的自由基、調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能和防治腫瘤等。因此,評估我國的酸漿資源中類胡蘿卜素的含量和組成,探討其作為天然類胡蘿卜素資源的可能性具有十分重要的實(shí)際意義。1材料和方法1.1ransetiii試驗(yàn)酸漿果實(shí)購于北京昌平區(qū)市場,由我國東北佳木斯地區(qū)引種(PhysalisalkekengiL.var.franchetii)栽培而得,由北京聯(lián)合大學(xué)應(yīng)用文理學(xué)院惠伯棣教授鑒定。正己烷、丙酮、KOH和乙醚等試劑均為分析純。乙酸乙酯(色譜純)。做為參比樣品使用的玉米黃素[20%,DSM(China)Limited]、葉黃素(70%,Sigma-Aldrich)和β-隱黃質(zhì)(97%,Hoffmann-laRoche)。1.2溶劑輸送系統(tǒng)紫外可見分光光度計(jì)(Multispec-1501,ShimadzuCOPORATION),HPLC(Waters600E溶劑輸送系統(tǒng),PDA-996二極管陣列檢測器,WatersCo.)。1.3方法1.3.1萃取稱重6取帶宿萼的酸漿洗凈,將宿萼與漿果分離。將宿萼延長軸均分為二,一份稱重后置于表面皿中放入烘箱(60℃)中烘干至恒重;另一份稱重后用于萃取。將漿果延縱軸縱切為二,一份用于含水量測定(條件同前),另一份用于萃取。1.3.2酸漿制備樣品稱重后的宿萼及漿果分別置于研缽內(nèi),加入少量石英砂及4倍(V/W樣品重)丙酮研磨后靜置,用滴管小心移出上清液,重復(fù)2~3次后,再用等量正己烷多次研磨萃取,至上清液和殘?jiān)鶠闊o色,分別收集上清液。合并、收集漿果萃取液于分液漏斗中,加入少量蒸餾水,分層后收集上相,用正己烷定容至40mL,其中20mL放入4℃冰箱中,作為酸漿漿果萃取液皂化前樣品;其余20mL加等量10%(W/V)氫氧化鉀-乙醇溶液后封口避光攪拌過夜。將皂化液置于分液漏斗中,加入乙醚和水進(jìn)行萃取,收集上相,并用水洗至中性,用正己烷定容至80mL,作為酸漿漿果萃取液皂化后樣品。宿萼萃取液的皂化同上。1.3.3類化合物含量的計(jì)算以正己烷為空白對照,用分光光度計(jì)收集350~550nm內(nèi)漿果和宿萼萃取液皂化前、后樣品的電子吸收光譜。根據(jù)在最大吸收波長處的吸光值,按朗伯-比爾定律,按下列公式計(jì)算其總類胡蘿卜素含量。x=(A×y)/(E1%1cm1cm1%×100)其中:x=樣品中所含的葉黃素類化合物數(shù)量(g);y=樣品溶液的體積(mL);A=樣品的吸光度值。E1%1cm1cm1%=吸光系數(shù),在此采用值為E=2500。1.3.4u3000letm使用HPLC對漿果和宿萼萃取液皂化前、后樣品進(jìn)行類胡蘿卜素組成分析。色譜條件:色譜柱:DiamonsilTM(4.6mm×25cm,5μm);流動相A:乙腈-水(9∶1);流動相B:乙酸乙酯;線性梯度洗脫:B在25min內(nèi)由0%增加至100%;流速:1.0mL·min-1;檢測波長:450nm;波長范圍250~550nm;進(jìn)樣量:25μL。根據(jù)各組分的色譜行為和光譜特征對其進(jìn)行鑒定。2結(jié)果2.1總類胡蘿卜素含量漿果及宿萼含水量分析見表1。應(yīng)用比色法測定漿果及宿萼萃取液在450nm處的吸光值計(jì)算二者的總類胡蘿卜素含量,結(jié)果為漿果的總類胡蘿卜素含量為2.1937mg·g-1干重;宿萼中的含量為8.1869mg·g-1干重。由此可見,宿萼中含有豐富的類胡蘿卜素,含量接近1%。2.2廢水的類胡蘿卜素單體組分漿果及宿萼萃取液皂化前、后的HPLC色譜圖見圖1及2。皂化前樣品主要組分出峰時(shí)間在15min后,主要是類胡蘿卜素酯。皂化后樣品3個(gè)主要組分出峰時(shí)間均在15min前,而在酯的保留時(shí)間上已無組分洗出,說明酯的水解皂化完全。通過圖1及2的比較可以看出,漿果及宿萼萃取液中的類胡蘿卜素單體組成相似,化合物種類一致,比例不同。漿果及宿萼萃取液中3個(gè)類胡蘿卜素單體組分的電子吸收光譜,見圖3,4。根據(jù)3個(gè)組分的色譜行為和光譜特征,組分Ⅰ,Ⅱ及Ⅲ分別定性為葉黃素、玉米黃素和β-隱黃質(zhì)。三者峰面積為:漿果4.71%,72.52%和22.77%;宿萼:8.80%,74.61%和16.60%。3酸漿與玉米黃質(zhì)的聯(lián)合應(yīng)用高等植物中類胡蘿卜素生物合成的化學(xué)過程(即異戊二烯代謝途經(jīng))已經(jīng)被許多實(shí)驗(yàn)所證明。本項(xiàng)研究中所鑒定的類胡蘿卜素類化合物中,葉黃素(lutein)與玉米黃質(zhì)(zeaxanthin)均為雙羥基化合物,互為同分異構(gòu)體,β-隱黃質(zhì)(β-cryptoxanthin),比玉米黃質(zhì)少一個(gè)羥基,為玉米黃質(zhì)的合成前體。近年來葉黃素和玉米
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