不同助表面活性劑對(duì)納米乳形成的影響

不同助表面活性劑對(duì)納米乳形成的影響

微乳液（me）是由水、油、表面活性劑和表面活性劑組成的流動(dòng)、透明、穩(wěn)定的、各向同性的液體。20世紀(jì)70年代以來(lái),微乳作為藥物載體的研究日益受到人們的關(guān)注,出現(xiàn)了新型給藥系統(tǒng)—自微乳藥物傳遞系統(tǒng)(self-microemulsifyingdrugdeliverysystem,SMEDDS)。微乳制劑具有低粘度、穩(wěn)定、吸收迅速、靶向釋藥等特點(diǎn),并提高藥物的生物利用度,降低不良反應(yīng),臨床應(yīng)用前景廣闊。目前,關(guān)于微乳的形成機(jī)理尚無(wú)定論,關(guān)于微乳中不同組分之間相互關(guān)系的研究報(bào)道極少。本實(shí)驗(yàn)采用擬三元相圖對(duì)有助表面活性劑參與的O/W型微乳劑的形成做了研究性描述,對(duì)其形成規(guī)律做了系統(tǒng)的分析和總結(jié),為研究O/W型微乳劑提供了可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1儀器、試劑和儀器HA1004型電子天平(上海天平儀器廠);85-2型恒溫磁力攪拌器(杭州儀表電機(jī)廠);偏光顯微鏡(中國(guó)杭州);激光粒度分析儀(德國(guó));JEM1200EX透射分析電鏡(日本電子光學(xué)公司)。聚氧乙烯氫化蓖麻油(cremophorRH-40,天津市福晨化學(xué)試劑廠);十四酸異丙酯[isopropylmyristate(IPM),天津市福晨化學(xué)試劑廠];無(wú)水乙醇;聚乙二醇-400;正丁醇;異丙醇;丙三醇;1,2丙二醇;純化水(本實(shí)驗(yàn)室自制);蘇丹紅Ⅱ(SRⅡ);亞甲基蘭。2方法2.1u3000微乳的滴定將表面活性劑、助表面活性劑和油按一定比例充分混合,對(duì)不能充分混合的組分則采用不同的溫度(30～60℃)加熱使其充分混合。在恒溫磁力攪拌器攪拌下用純化水滴定3種成分的混合物,直至澄清透明的微乳形成。記錄加水量,以確定微乳區(qū)界限。在滴定過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)粘度較大的狀態(tài),用偏光鏡分辨是否發(fā)亮,發(fā)亮為液晶,不發(fā)亮為凝膠。選用擬三元相圖來(lái)表示微乳區(qū),把水作為一個(gè)頂點(diǎn),表面活性劑與助表面活性劑的總量作為一個(gè)頂點(diǎn),油作為一個(gè)頂點(diǎn),所形成的左上角閉合區(qū)域?yàn)槲⑷閰^(qū),標(biāo)記為M。2.2助表面活性劑的內(nèi)部比根據(jù)微乳形成的基本原理和預(yù)實(shí)驗(yàn)初步確定如下實(shí)驗(yàn)用數(shù)據(jù):表面活性劑與助表面活性劑的內(nèi)部比(Km值)為:1∶1,2∶1,3∶1。油、表面活性劑和助表面活性劑的總量以適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行設(shè)組,作為實(shí)驗(yàn)用統(tǒng)一數(shù)據(jù)。用Origin7.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理并繪制擬三元相圖。2.3染料亞甲藍(lán)在微乳中的擴(kuò)散速度采用染色法,用油溶性染料蘇丹紅和水溶性染料亞甲藍(lán)在微乳中的紅色和藍(lán)色的擴(kuò)散速度快慢可以來(lái)判斷微乳的類型,若紅色擴(kuò)散快于藍(lán)色則為W/O型微乳,反之為O/W型微乳。2.4穩(wěn)定性試驗(yàn)的內(nèi)容將制備完成的微乳劑在12000r·min-1轉(zhuǎn)速下離心10～20min觀察是否分層、是否透明,如果不分層、透明則說(shuō)明穩(wěn)定。同時(shí),按照《藥物穩(wěn)定性試驗(yàn)技術(shù)規(guī)范》,在不同溫度下密閉保存觀察是否分層、是否透明。若在不同溫度下均不分層、透明則穩(wěn)定。2.5粒度分析采用激光粒度分析儀進(jìn)行粒度分析。將待測(cè)樣品稀釋10～20倍然后進(jìn)行觀察粒度并記錄數(shù)據(jù)。2.6微乳劑的制備采用透射電子顯微鏡對(duì)微乳劑進(jìn)行形態(tài)學(xué)評(píng)價(jià)。將制備好的微乳劑稀釋100倍,滴加在銅網(wǎng)上,自然干燥,然后用2%磷鎢酸復(fù)染,待干燥后觀察。3結(jié)果3.1形態(tài)混亂,僅出現(xiàn)形態(tài)規(guī)定化采用上述實(shí)驗(yàn)方法制備的微乳劑通過(guò)透射電鏡觀察,形態(tài)規(guī)整。粒度在70nm左右。電鏡下觀察微乳滴之間界限清晰,表面平滑。不同組分在形成微乳后粒度與形態(tài)差異不顯著。見圖1。3.2透射電鏡或透射電鏡觀察實(shí)驗(yàn)制備的微乳劑粒度在70nm左右,分布較為集中,與透射電鏡觀察結(jié)果基本一致。不同組分在形成微乳后粒度與形態(tài)差異不顯著。見圖2。3.3微乳液的類型識(shí)別通過(guò)用蘇丹紅和亞甲藍(lán)染色觀察,藍(lán)色在體系中的擴(kuò)散速度明顯快于紅色,說(shuō)明該方法制備的微乳為O/W型。3.4穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果凡是在制備過(guò)程中形成的微乳體系均在在12000r·min-1離心20min,結(jié)果微乳體系不分層、無(wú)沉淀。按照《藥物穩(wěn)定性試驗(yàn)技術(shù)規(guī)范》,在不同溫度下密閉保存觀察IPM-RH40-乙醇體系、IPM-RH-40-異丙醇體系的各Km組均出現(xiàn)不同程度的渾濁和分層。其他已經(jīng)形成微乳的各組方均穩(wěn)定透明、均一。3.5不同成分的微乳液的制備和現(xiàn)象3.5.1主體難記錄加水量該體系在加樣后流動(dòng)性好、透明能夠充分混勻。但在加水時(shí)未能出現(xiàn)渾濁、透明的相變過(guò)程,不易記錄加水量。以Km=1∶1時(shí)形成的微乳區(qū)域最大,在長(zhǎng)期不同溫度保存時(shí)體系有渾濁、分層現(xiàn)象。3.5.2微乳體系的不同澄清該體系加樣后能夠充分混合,流動(dòng)性非常好,在加水時(shí)不能觀察到渾濁、澄清的變化,制備的微乳體系在長(zhǎng)期不同溫度下保存均出現(xiàn)不同程度的渾濁。Km=1∶1時(shí)形成的微乳區(qū)域較大。3.5.3水浴下助溶微乳該體系加樣后不能在室溫下充分混勻,需要在50～60℃水浴下助溶,加水時(shí)體系容易形成膠團(tuán)不便于觀察加水量。從相圖觀察各Km值下形成的微乳區(qū)域均較小。優(yōu)點(diǎn)是形成微乳后體系穩(wěn)定。3.5.4微乳相圖觀察該體系在加樣后流動(dòng)性較強(qiáng),加水時(shí)有明顯的相變現(xiàn)象,有利于觀察并記錄加水量,準(zhǔn)確繪制微乳相圖。Km=3∶1條件下更容易形成微乳,長(zhǎng)期放置穩(wěn)定。3.5.5助溶時(shí)要注意在5060水浴下助溶該體系在加樣后較粘稠、渾濁,室溫下不能充分混合,需要在50～60℃水浴下助溶。在加水時(shí)也出現(xiàn)渾濁、粘稠現(xiàn)象,但容易形成膠團(tuán),不利于觀察加水量。Km=3∶1條件下更容易形成微乳,微乳區(qū)域較大,長(zhǎng)期放置穩(wěn)定。3.5.6微乳體系該體系加樣后在室溫下能充分混勻,而且體系較為透明、流動(dòng)。形成微乳后在不同溫度下長(zhǎng)期放置穩(wěn)定、透明、流動(dòng)。Km=1∶1條件下更容易形成微乳。3.6不同的成分形成了最佳微乳液相圖見圖3。4助表面活性劑的用量是確定最佳微乳形成的前提微乳的形成需要表面活性劑、助表面活性劑的參與,而且其HLB值及Km值對(duì)微乳的形成都有影響。實(shí)驗(yàn)證明,通過(guò)準(zhǔn)確選擇表面活性劑和適當(dāng)?shù)挠鸵约爸砻婊钚詣┑那‘?dāng)種類和配比能夠?qū)崿F(xiàn)較低的表面活性劑的用量形成微乳,通過(guò)對(duì)擬三元相圖的分析認(rèn)為:一般微乳形成的區(qū)域大小與表面活性劑和助表面活性劑的總量成正比,與油的用量成反比,與助表面活性劑的用量成反比。微乳的形成是自發(fā)的過(guò)程,不需要外力。但是在實(shí)際實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,由于助表面活性劑、表面活性劑的流動(dòng)性以及互溶性不同,需要在加熱攪拌下形成微乳。微乳在制備過(guò)程中一般會(huì)出現(xiàn)渾濁、透明、粘稠、流動(dòng)等相變現(xiàn)象,這也是人們?cè)谘兄莆⑷榈倪^(guò)程中判斷形成微乳的依據(jù)。但是微乳相圖法制備過(guò)程中存在部分組分在加水時(shí)沒有明顯的相變過(guò)程的現(xiàn)象,不利于準(zhǔn)確判斷加水量,所以需要在微乳制備中建立一套更加完善準(zhǔn)確的觀察方法。微乳制備時(shí)用擬三元相圖作為確定最佳微乳形成條件還不夠全面,微乳區(qū)域的大小不是唯一的判斷微乳形成的最佳處方的依據(jù),需要進(jìn)行穩(wěn)定性考察。微乳的形成需要有恰當(dāng)?shù)闹砻婊钚詣﹨⑴c,助表面活性劑能夠降低界面張力