新高考生物二輪復(fù)習(xí)綜合提升訓(xùn)練專題十 生物工程含解析

專題十生物工程定考向定考向(1)植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)。(8)DNA的粗提取和鑒定。(2)動物細(xì)胞培養(yǎng)及干細(xì)胞的應(yīng)用。(9)DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定。(3)動物細(xì)胞融合技術(shù)和單克隆抗體的制備。(10)基因工程的應(yīng)用。(4)動物體細(xì)胞核移植技術(shù)。(11)蛋白質(zhì)工程。(5)胚胎工程的理論基礎(chǔ)及應(yīng)用。(12)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性。(6)重組DNA技術(shù)的基本工具。(13)關(guān)注生殖性克隆與治療性克隆。(7)基因工程的基本操作程序。(14)生物武器及其對人類的危害。建網(wǎng)絡(luò)建網(wǎng)絡(luò)判對錯(cuò)判對錯(cuò)(1)植物體細(xì)胞雜交過程中，需先脫分化再誘導(dǎo)融合。(×)(2)肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2刺激細(xì)胞呼吸。(×)(3)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體。(√)(4)再生出細(xì)胞壁是原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志。(√)(5)胚胎移植中，供體和受體相當(dāng)于雙親中的父本和母本。(×)(6)DNA連接酶能將兩堿基通過氫鍵連接起來。(×)(7)載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選的標(biāo)記基因。(×)(8)蛋白質(zhì)工程被廣泛用于改進(jìn)酶的性能或開發(fā)新的工業(yè)用酶。(√)(9)轉(zhuǎn)基因抗蟲棉植株的抗蟲效果必須通過分子檢測進(jìn)行鑒定。(×)(10)PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。(√)回歸教材1.融合后得到的雜種細(xì)胞再經(jīng)過誘導(dǎo)可形成愈傷組織，并可進(jìn)一步發(fā)育成完整的雜種植株。（選擇性必修3.P37）2.動物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH.(選擇性必修3.P44)3.每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，把一種B淋巴細(xì)胞與能在體外大量增殖的骨髓瘤細(xì)胞融合，所得到的融合細(xì)胞就可能大量增殖，產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。（選擇性必修3.P49）4.植物體細(xì)胞雜交是指將不同來源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并將雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。再生出細(xì)胞壁是原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志。（選擇性必修3.P38圖2-4）5.胚胎移植是指將通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。其中提供胚胎的個(gè)體稱為“供體”，接受胚胎的個(gè)體叫“受體”。（選擇性必修3.P61）6.在基因工程操作中，DNA連接酶將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的磷酸二酯鍵。（選擇性必修3.P72）7.在基因工程操作中，真正被用作載體的質(zhì)粒，都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過人工改造的。這些質(zhì)粒上常有特殊的標(biāo)記基因，如四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因等，便于重組DNA分子的篩選。（選擇性必修3.P72）8.在其他工業(yè)方面，蛋白質(zhì)工程被廣泛應(yīng)用于改進(jìn)酶的性能或開發(fā)新的工業(yè)用酶。（選擇性必修3.P95）9.目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后，是否穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性，只有通過檢測與鑒定才能知道，這也是檢查轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否培育成功的一步。首先是分子水平的檢測，其次還需要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。（選擇性必修3.P82）10.上述過程可以在PCR擴(kuò)增儀中自動完成，完成以后，常采用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物。（選擇性必修3.P79）明核心明核心微專題1微專題1細(xì)胞工程與胚胎工程1.植物組織培養(yǎng)的過程原理：植物細(xì)胞的全能性①植物組織培養(yǎng)中添加蔗糖的目的是提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓。②脫分化階段不需光，再分化階段需光。③生長素/細(xì)胞分裂素的比值高時(shí)，促進(jìn)根的分化、抑制芽的形成；比值低時(shí)，促進(jìn)芽的分化、抑制根的形成。④體內(nèi)細(xì)胞未表現(xiàn)全能性的原因：在特定的時(shí)間和空間條件下，基因的表達(dá)具有選擇性。2.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)原理：植物細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動性①與再生細(xì)胞壁密切相關(guān)的細(xì)胞器是高爾基體。②原生質(zhì)體融合后有多種結(jié)果需要篩選。③從變異角度看，植物體細(xì)胞雜交技術(shù)屬于染色體數(shù)目變異，雜種植株的基因型、染色體和染色體組數(shù)目均為原兩植物直接相加。3.動物細(xì)胞培養(yǎng)原理：細(xì)胞增殖①動物細(xì)胞培養(yǎng)中兩次使用胰蛋白酶的作用不同：第一次：處理剪碎的組織，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。第二次：使貼壁細(xì)胞從瓶壁上脫落下來，分散成單個(gè)細(xì)胞。②避免雜菌污染的措施：培養(yǎng)液及培養(yǎng)用具滅菌處理，加入一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液。③區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的關(guān)鍵是是否分瓶培養(yǎng)。4.單克隆抗體的制備原理：細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞的增殖5.動物體細(xì)胞(核移植技術(shù))克隆技術(shù)原理：動物細(xì)胞核的全能性(1)核移植獲得的克隆動物與提供細(xì)胞核的親本性狀可能不同的三個(gè)原因：①克隆動物遺傳物質(zhì)來自兩個(gè)親本；②發(fā)育過程中可能發(fā)生基因突變或染色體變異；③外界環(huán)境可能引起表型改變。(2)克隆動物的產(chǎn)生屬于無性繁殖，而試管動物則是在體外受精形成受精卵，由受精卵發(fā)育成的個(gè)體，因此屬于有性繁殖。6.胚胎移植的操作流程7.胚胎分割無性繁殖或克隆考向1圍繞細(xì)胞工程的進(jìn)展和操作，考查科學(xué)探究能力1．某同學(xué)利用帶頂芽的幼莖為材料進(jìn)行植物離體培養(yǎng)，制作了一個(gè)便攜的“試管植物”掛件，下列關(guān)于制作過程的說法正確的是（

）A．培養(yǎng)基雖然已經(jīng)經(jīng)過滅菌過程，但也會有部分試管苗出現(xiàn)褐化現(xiàn)象B．培養(yǎng)過程中帶頂芽的幼莖需經(jīng)脫分化形成愈傷組織，再分化出芽和根C．將消毒好的幼芽切斷接種于培養(yǎng)基表面時(shí)，不能劃破培養(yǎng)基D．若幾天后在幼莖基部觀察到有菌落生長，則原因肯定是培養(yǎng)基滅菌不徹底【答案】A【詳解】A、褐變又稱褐化，是指培養(yǎng)材料向培養(yǎng)基釋放褐色物質(zhì)，致使培養(yǎng)基逐漸褐變，培養(yǎng)材料也隨之褐變甚至死亡的現(xiàn)象，故褐化并不是培養(yǎng)基被雜菌污染引起的，A正確；B、培養(yǎng)過程中帶頂芽的幼莖不需要經(jīng)過脫分化的過程就可以長出芽和根，B錯(cuò)；C、將消毒好的幼芽切斷接種于培養(yǎng)基表面時(shí)，劃破培養(yǎng)基才能把幼芽插入到培養(yǎng)基中，C錯(cuò)誤；D、若幾天后在幼莖基部觀察到有菌落生長，原因可能是培養(yǎng)基滅菌不徹底，也可能是接種時(shí)有雜菌污染等，D錯(cuò)誤。2．科學(xué)家利用馬鈴薯和西紅柿葉片分離原生質(zhì)體并進(jìn)行細(xì)胞雜交，最終獲得了雜種植株，相關(guān)過程如圖所示。有關(guān)分析正確的是（

）A．過程①應(yīng)將葉片上表皮向上，置于含纖維素酶和果膠酶的等滲或略高滲溶液中B．過程②中的原生質(zhì)體由細(xì)胞膜、液泡膜及兩層膜之間的細(xì)胞質(zhì)構(gòu)成C．④過程常用滅活病毒誘導(dǎo)法，目的是促進(jìn)原生質(zhì)體融合D．⑤進(jìn)行脫分化和再分化過程，雜種植株一定具有馬鈴薯和西紅柿的優(yōu)良性狀【答案】A【詳解】A、過程①應(yīng)將葉片下表皮的一面朝下（能與溶液接觸），置于含有纖維素酶和果膠酶的溶液中去除細(xì)胞壁，原生質(zhì)體沒有細(xì)胞壁，為避免原生質(zhì)體吸水漲破，將葉片置于等滲或略高滲溶液中，A正確；B、原生質(zhì)層是由細(xì)胞膜、液泡膜以及這兩層膜之間的細(xì)胞質(zhì)組成，而原生質(zhì)體是指植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁后的剩余部分，B錯(cuò)誤；C、誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法等，滅活病毒是用于誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法，C錯(cuò)誤；D、由于基因的選擇性表達(dá)，獲得的雜種植株不一定能夠表現(xiàn)親本的優(yōu)良性狀，如番茄-馬鈴薯雜種植物，地上沒有結(jié)番茄，地下也沒有長馬鈴薯，D錯(cuò)誤。3．下圖為單克隆抗體制備過程的示意圖。下列相關(guān)敘述，正確的是（

）A．每個(gè)脾B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生多種抗體B．細(xì)胞融合可使用滅活病毒，滅活病毒的抗原結(jié)構(gòu)依然存在C．細(xì)胞篩選和細(xì)胞融合時(shí)所用的培養(yǎng)液在成分上相同D．克隆化培養(yǎng)過程中雜交瘤細(xì)胞會出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象【答案】B【詳解】A、脾B淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生針對相應(yīng)抗原的抗體，每個(gè)脾B淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體，A錯(cuò)誤；B、滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，故滅活病毒的抗原結(jié)構(gòu)依然存在，B正確；C、細(xì)胞篩選時(shí)獲得雜交瘤細(xì)胞需要在選擇培養(yǎng)基上篩選，細(xì)胞融合時(shí)所用的培養(yǎng)液需要再加入誘導(dǎo)劑，兩者的成分上有差異，C正確；D、雜交瘤細(xì)胞具有無限增殖的特點(diǎn)，無接觸抑制現(xiàn)象，因此該細(xì)胞克隆化培養(yǎng)過程中不會出現(xiàn)接觸抑制，D錯(cuò)誤。4．干細(xì)胞是一類具有自我更新能力的細(xì)胞，能產(chǎn)生特定組織甚至生物體的所有細(xì)胞類型。根據(jù)個(gè)體發(fā)育過程中干細(xì)胞出現(xiàn)的次序和發(fā)育潛能的不同，可分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞。下列相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（

）A．胚胎干細(xì)胞分化為完整個(gè)體體現(xiàn)了已分化動物細(xì)胞具有全能性B．已分化細(xì)胞可在體外被誘導(dǎo)成為一種類似于胚胎干細(xì)胞的細(xì)胞C．利用成體干細(xì)胞進(jìn)行疾病治療理論上無需考慮免疫排斥的問題D．將干細(xì)胞用于臨床上的疾病治療可能存在導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)【答案】A【詳解】A、在適當(dāng)條件下，胚胎干細(xì)胞可被誘導(dǎo)分化為多種細(xì)胞、組織、器官，不能分化為完整個(gè)體，A錯(cuò)誤；B、已分化細(xì)胞可在體外被誘導(dǎo)成為一種類似于胚胎干細(xì)胞的細(xì)胞，比如誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），B正確；C、成體干細(xì)胞來源于自體，利用成體干細(xì)胞進(jìn)行疾病治療理論上無需考慮免疫排斥的問題，C正確；D、干細(xì)胞分裂分化能力強(qiáng)，會增加生物體內(nèi)細(xì)胞的分裂能力，將干細(xì)胞用于臨床上的疾病治療可能存在導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，D正確。5．HEK293細(xì)胞是人工改造后的人胚腎細(xì)胞，為細(xì)胞系細(xì)胞，具有貼壁生長的特性。分瓶時(shí)，一瓶細(xì)胞可分到幾瓶中培養(yǎng)，這個(gè)瓶數(shù)稱為分瓶比，分瓶數(shù)越多，分瓶比越大。下列關(guān)于HEK293細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是（

）A．在HEK293細(xì)胞培養(yǎng)液中加入血清可補(bǔ)充蛋白質(zhì)和生長因子B．HEK293細(xì)胞的培養(yǎng)需要95%空氣和5%CO2的氣體環(huán)境C．分瓶前應(yīng)用胰蛋白酶處理貼壁生長的HEK293細(xì)胞D．分瓶比越大，HEK293細(xì)胞分瓶換液的周期越短【答案】D【詳解】A、血清中含有蛋白質(zhì)和生長因子，能促進(jìn)細(xì)胞增殖過程，A正確；B、動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)氣體環(huán)境為95％空氣和5％CO2，后者能起到維持培養(yǎng)液pH的作用，B正確；C、分瓶前需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的細(xì)胞，用于制作單細(xì)胞懸液，C正確；D、分瓶比越大，瓶中的細(xì)胞密度越低，形成緊密單層細(xì)胞的周期變長，細(xì)胞分瓶換液的周期越長，D錯(cuò)誤。6．常用的核移植方法主要有細(xì)胞質(zhì)內(nèi)注射法和透明帶下注射法兩種。前者是用微型注射針將供體細(xì)胞的細(xì)胞核吸出注入去核卵母細(xì)胞質(zhì)內(nèi)；后者是直接將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)，然后促使兩個(gè)細(xì)胞融合，從而具有發(fā)育的全能性。我國科學(xué)家于2017年底培育出的體細(xì)胞克隆猴“中中”和“華華”采用的就是后者。下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．供體細(xì)胞注入卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)后，就可自行進(jìn)入卵母細(xì)胞B．“中中”和“華華”的性狀由多個(gè)親本共同決定，屬于有性生殖C．相比之下，透明帶下注射法對供體細(xì)胞核和卵母細(xì)胞的損傷更小D．“中中”和“華華”核DNA均來自供體細(xì)胞，質(zhì)DNA均來自去核卵母細(xì)胞【答案】C【詳解】A、供體細(xì)胞注入卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)后，還需要電融合法誘導(dǎo)才能使供體細(xì)胞進(jìn)入卵母細(xì)胞形成重構(gòu)胚，A錯(cuò)誤；B、體細(xì)胞克隆猴“中中”和“華華”的形成屬于無性繁殖，B錯(cuò)誤；C、微型注射針將供體細(xì)胞的細(xì)胞核吸出可能會破壞細(xì)胞核，而透明帶下注射法是直接將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)，對供體細(xì)胞核和卵母細(xì)胞的損傷更小，C正確；D、“中中”和“華華”是由透明帶下注射法形成的，核DNA均來自供體細(xì)胞，但質(zhì)DNA來自去核卵母細(xì)胞和供體細(xì)胞，D錯(cuò)誤。7．嵌合體在免疫學(xué)上的含義是指一個(gè)機(jī)體身上有兩種或兩種以上染色體組成不同的細(xì)胞系同時(shí)存在，彼此能夠耐受，不產(chǎn)生排斥反應(yīng)，相互間處于嵌合狀態(tài)。如圖表示構(gòu)建嵌合體小鼠的實(shí)驗(yàn)，下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．過程①中的培養(yǎng)液需要適時(shí)更換B．胚胎在囊胚階段開始分化，其中的滋養(yǎng)層細(xì)胞將發(fā)育成胎膜和胎盤C．嵌合體幼鼠的一個(gè)細(xì)胞中同時(shí)有白鼠和黑鼠的基因D．囊胚中分離的胚胎干細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)可發(fā)育成多種組織【答案】C【詳解】A、過程①為早期胚胎培養(yǎng)，為防止培養(yǎng)過程中細(xì)胞代謝廢物對細(xì)胞的毒害作用，需要對培養(yǎng)液適時(shí)更換，A正確；B、胚胎在囊胚階段開始分化，其中的滋養(yǎng)層細(xì)胞發(fā)育成胎膜和胎盤，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)發(fā)育成完整的胚胎，B正確；C、嵌合體幼鼠是由兩種受精卵合并（但沒有融合）發(fā)育而來的，故一個(gè)細(xì)胞中只有白鼠或黑鼠的基因，不會兩種基因同時(shí)存在，C錯(cuò)誤；D、囊胚中分離的胚胎干細(xì)胞是指囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，其經(jīng)誘導(dǎo)能發(fā)育成各種組織，D正確。8．制備敲除小鼠需要將編輯過的敲除基因轉(zhuǎn)入小鼠胚胎干細(xì)胞，移植至正常小鼠的早期胚胎中，植入代孕母鼠子宮。出生的F1小鼠發(fā)育成熟后互相交配，鑒定F2代小鼠基因型，篩選得到純合的基因敲除小鼠。下列相關(guān)說法不正確的是（

）A．實(shí)驗(yàn)中F1代小鼠體細(xì)胞中均含有敲除基因B．利用胚胎分割技術(shù)可以獲得更多的子代個(gè)體C．早期胚胎的體外培養(yǎng)需要無菌、無毒的環(huán)境D．檢測代孕小鼠激素水平的變化可確定胚胎移植是否成功【答案】A【詳解】A、實(shí)驗(yàn)中F1代小鼠是通過將編輯過的敲除基因轉(zhuǎn)入小鼠胚胎干細(xì)胞，移植至正常小鼠的早期胚胎中，植入代孕母鼠子宮，出生后發(fā)育成熟的，是一種嵌合體小鼠，此代小鼠體細(xì)胞有的含有敲除基因，有的體細(xì)胞不含有敲除基因，A錯(cuò)誤；B、胚胎分割借助顯微操作技術(shù)或徒手操作方法切割早期胚胎成二、四或多等份再移植給受體，從而獲得同卵雙胎或多胎的生物學(xué)新技術(shù)，故利用胚胎分割技術(shù)可以獲得更多的子代個(gè)體，B正確；C、早期胚胎的體外培養(yǎng)需要無菌、無毒的環(huán)境，對培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理以及在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作，C正確；D、代孕小鼠胚胎植入后激素水平的變化，通常意味著胚胎植入成功，D正確。微專題2基因工程1.基因工程的3種基本工具2.基因工程的操作流程(1)目的基因的獲取提醒：①從cDNA文庫獲取的目的基因不含啟動子和終止子。②PCR過程中需要耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建——重組質(zhì)粒的構(gòu)建提醒：①基因工程中的載體與細(xì)胞膜上的載體不同。②啟動子、終止子a.啟動子(DNA片段)≠起始密碼子(位于mRNA上)。b.終止子(DNA片段)≠終止密碼子(位于mRNA上)。③目的基因插入位置：啟動子與終止子之間。④利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥物時(shí)，應(yīng)將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動子連接到一起。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞提醒：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法中的“兩個(gè)兩次”(4)目的基因的檢測與鑒定提醒：PCR不僅可用于獲取和擴(kuò)增目的基因，還能用于檢測受體細(xì)胞中是否含有目的基因或受體細(xì)胞中的目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA。3.蛋白質(zhì)工程考向2結(jié)合基因工程的過程，考查分析問題的能力9．在基因工程中可利用PCR進(jìn)行體外DNA片段的擴(kuò)增，PCR產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．PCR利用了DNA熱變性的原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚及與引物的結(jié)合B．PCR擴(kuò)增的特異性一般是由引物的特異性決定的C．瓊脂糖凝膠中的DNA分子和擴(kuò)增的引物被核酸染料染色后，可在紫外燈下檢測出來D．DNA在瓊脂糖凝膠中的遷移速率與凝膠濃度、DNA分子大小和構(gòu)象有關(guān)【答案】C【詳解】A、在PCR技術(shù)的過程中包括：高溫變性（解鏈）→低溫復(fù)性→中溫延伸三個(gè)步驟，因此DNA兩條鏈的解旋過程不需要解旋酶的催化，而是利用了DNA在高溫下變性的原理，通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結(jié)合，A正確；B、由于引物的序列具有特異性，所以PCR擴(kuò)增的特異性一般是由引物的特異性決定的，B正確；C、凝膠中的DNA分子通過染色，可在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，所以瓊脂糖凝膠中的DNA分子和擴(kuò)增的產(chǎn)物（DNA）被核酸染料染色后，可在紫外燈下檢測出來，C錯(cuò)誤；D、DNA分子在凝膠中的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象有關(guān)，一般DNA分子越大，遷移速度越慢，大分子物質(zhì)在通過瓊脂糖時(shí)受到較大阻力，因此雙鏈DNA分子片段長度越大，在瓊脂糖中的移動速率越小，D正確。10．像BclⅠ（-T↓GATCA-）、BglⅡ（-A↓GATCT-）、MboⅠ（-↓GATC-）這樣，識別序列不同、，但能產(chǎn)生相同的黏性末端的一類限制酶被稱為同尾酶。如圖表示目的基因及質(zhì)粒上的酶切位點(diǎn)。選用不同的限制酶對質(zhì)粒和目的基因進(jìn)行切割，并用DNA連接酶進(jìn)行連接。下列分析錯(cuò)誤的是（

）選項(xiàng)切割質(zhì)粒切割目的基因結(jié)果分析ABclI和BglⅡBclI和BglⅡ形成的重組質(zhì)粒的堿基排列順序不一定相同BBclI和BglⅡMboI切割后的質(zhì)粒不可自我環(huán)化，切割后的目的基因可以自我環(huán)化CMboIBclI和BglⅡ形成的重組質(zhì)?？杀籑boI再次切開，但可能無法被BclI和BglⅡ再次切開DMboIMboI切割后的質(zhì)?？梢宰晕噎h(huán)化，切割后的目的基因也可以自我環(huán)化A．A B．B C．C D．D【答案】B【詳解】A、切割質(zhì)粒和切割目的基因用均用BclⅠ和BglⅡ，由于兩種酶切割后產(chǎn)生的黏性末端相同，形成的重組質(zhì)粒時(shí)目的基因可能反向連接，形成的堿基排列順序不一定相同，A正確；B、切割質(zhì)粒用BclⅠ和BglⅡ，切割后產(chǎn)生的黏性末端相同，切割后的質(zhì)?？赡茏晕噎h(huán)化；切割目的基因用MboⅠ，切割后產(chǎn)生黏性末端，切割后的目的基因可以自我環(huán)化，B錯(cuò)誤；C、切割質(zhì)粒用MboⅠ，產(chǎn)生黏性末端，切割目的基因用BclⅠ和BglⅡ，產(chǎn)生黏性末端，形成的重組質(zhì)粒中原來的BclⅠ和BglⅡ的切割位點(diǎn)的序列發(fā)生改變，不能再被這兩種酶切割，但不影響MboⅠ的作用，C正確；D、切割質(zhì)粒用MboⅠ，切割目的基因用MboⅠ，產(chǎn)生的均為黏末端，切割后的質(zhì)粒可自我環(huán)化，切割后的目的基因也可以自我環(huán)化，D正確。11．研究人員將大麥細(xì)胞的LTP1基因?qū)虢湍钢校尳湍府a(chǎn)生LTP1蛋白。下圖為該實(shí)驗(yàn)過程的部分流程。下列說法正確的是（

）A．運(yùn)用PCR擴(kuò)增LTP1基因時(shí)，應(yīng)選擇左圖的A和D作為引物B．為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒，可在引物5’端添加限制酶的識別序列C．如圖中為了篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的啤酒酵母，只需配制含青霉素的培養(yǎng)基D．為了讓大麥的基因在酵母中表達(dá)，需要在目的基因兩側(cè)添加大麥的啟動子和終止子【答案】B【詳解】A、結(jié)合題意可知，DNA復(fù)制只能從5’到3’，而DNA聚合酶只能從引物的3’端延伸DNA鏈，因此構(gòu)建前利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，A、B、C、D四種單鏈DNA片段中應(yīng)選取B和C作為引物，A錯(cuò)誤；B、為構(gòu)建重組質(zhì)粒(即將目的基因和質(zhì)粒整合到一起)，在引物5’端需要適當(dāng)增加限制酶識別序列B正確；C、由圖可知，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，四環(huán)素抗性基因被破壞，而青霉素抗性基因沒有被破壞，因此將導(dǎo)入C的酵母菌分別在含有青霉素和四壞素的兩種選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，則在含有青霉素的培養(yǎng)基上能存活，但在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能存活，才能篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的啤酒酵母，C錯(cuò)誤；D、為了讓大麥的基因在酵母中表達(dá)，需要在目的基因兩側(cè)添加酵母的啟動子和終止子，D錯(cuò)誤。12．某課題組為得到青蒿素產(chǎn)量高的新品系，將青蒿素合成過程的某－－關(guān)鍵酶基因fps在野生青蒿中過量表達(dá)，其過程如下圖所示。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．經(jīng)圖示過程得到的fps基因不含啟動子和終止子B．酶1、酶2和酶3作用的化學(xué)鍵都是磷酸二酯鍵C．圖中含fps基因的DNA片段中有酶2的識別序列D．導(dǎo)入fps基因的青蒿植株中該基因都能過量表達(dá)【答案】D【詳解】A、真核細(xì)胞的mRNA轉(zhuǎn)錄后通過加工剪切了啟動子和終止子，故反轉(zhuǎn)錄得到的基因不含啟動子和終止子，A正確；B、酶1促進(jìn)逆轉(zhuǎn)錄的過程，故為逆轉(zhuǎn)錄酶，酶2、酶3用于切割目的基因和質(zhì)粒，為限制酶和DNA連接酶，都能連接兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵，B正確；C、酶2是限制酶，限制酶對于DNA序列的識別具有特異性，故圖中含fps基因的DNA片段中有酶2的識別序列，C正確；D、導(dǎo)入fps基因的青蒿植株中基因不一定能過量表達(dá)，故必須檢測轉(zhuǎn)基因青蒿植株中的青蒿素產(chǎn)量，若產(chǎn)量增高，則說明達(dá)到了目的，D錯(cuò)誤。13．大腸桿菌是基因工程技術(shù)中被廣泛采用的工具，人生長激素的基因工程過程如圖所示。下列敘述正確的是（

）A．經(jīng)①獲得該mRNA的最佳材料是受精卵B．通過①②過程，可以構(gòu)建基因組文庫C．要檢測③⑥過程的產(chǎn)物可分別用PCR技術(shù)和抗原—抗體雜交技術(shù)D．⑤過程要在低溫和較高濃度的氯化鈣溶液中處理使重組DNA易進(jìn)入受體細(xì)胞【答案】C【詳解】A、經(jīng)①獲得該mRNA的最佳材料是特定的組織細(xì)胞，而不是受精卵，A錯(cuò)誤；B、通過①②過程得到cDNA，cDNA所含的基因不是全部基因不能構(gòu)建基因組文庫，B錯(cuò)誤；C、要檢測③的產(chǎn)物生長激素基因可以用PCR技術(shù)擴(kuò)增，要檢測⑥過程的產(chǎn)物可用抗原—抗體雜交技術(shù)，C正確；D、⑤過程要在低溫和低滲氯化鈣溶液中處理，通過增大細(xì)菌細(xì)胞壁通透性使重組DNA易進(jìn)入受體細(xì)胞，D錯(cuò)誤。14．蛋白質(zhì)工程是當(dāng)前的新興分子生物學(xué)技術(shù)，通過改造或合成基因，來改造現(xiàn)有的蛋白質(zhì)或制造新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)、生活的需求。下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法錯(cuò)誤的是（

）A．蛋白質(zhì)工程技術(shù)會改變組成蛋白質(zhì)的氨基酸的種類、數(shù)目和排列順序B．蛋白質(zhì)工程獲得的蛋白質(zhì)都是自然界已存在的蛋白質(zhì)（天然蛋白質(zhì)）C．蛋白質(zhì)工程不直接改造蛋白質(zhì)的原因是改造基因易于操作且改造后可遺傳D．蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)出來的蛋白質(zhì)的活性與天然蛋白質(zhì)相似，而且穩(wěn)定性更高【答案】B【詳解】A、蛋白質(zhì)工程技術(shù)蛋是根據(jù)人們對蛋白質(zhì)功能的特定需求，對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，會改變組成蛋白質(zhì)的氨基酸的種類、數(shù)目和排列順序，A正確；B、基因工程獲得的蛋白質(zhì)都是自然界已存在的蛋白質(zhì)（天然蛋白質(zhì)），而蛋白質(zhì)工程是根據(jù)人們的需求獲得的蛋白質(zhì)，所以都是非天然的蛋白質(zhì)，B錯(cuò)誤；C、由于基因決定蛋白質(zhì)，因此要對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，最終還必須通過改造或合成基因來完成，故蛋白質(zhì)工程不直接改造蛋白質(zhì)的原因是改造基因易于操作且改造后可遺傳，C正確；D、蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)出來的蛋白質(zhì)在天然蛋白質(zhì)的基礎(chǔ)上經(jīng)過改造，品質(zhì)更加優(yōu)良，活性與天然蛋白質(zhì)相似，而且穩(wěn)定性更高，D正確。15．生物安全是指與生物有關(guān)的各種因素對社會、經(jīng)濟(jì)、人類健康以及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險(xiǎn)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．消除生物武器威脅、防止生物武器擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面B．由于技術(shù)問題，生殖性克隆可能孕育出有嚴(yán)重生理缺陷的克隆動物C．為避免可能產(chǎn)生的基因歧視，基因檢測機(jī)構(gòu)不能隨意泄露基因檢測的結(jié)果D．從外來入侵害蟲的原產(chǎn)地引入天敵進(jìn)行治理，不會對入侵地造成生態(tài)影響【答案】D【詳解】A、在生物恐怖威脅不斷上升、全球傳染病疫情頻發(fā)的情況下，消除生物武器威脅、防止生物武器擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面，A正確；B、由于克隆技術(shù)尚不成熟，現(xiàn)在做克隆人很可能孕育出有嚴(yán)重生理缺陷的孩子。理由是重構(gòu)胚胎成功率低，移植入母體子宮后胚胎著床率低、流產(chǎn)率高、胎兒畸形率高，出生后死亡率高等，正常的個(gè)體極少，B正確；C、為了盡力規(guī)避基因診斷的風(fēng)險(xiǎn)，避免可能產(chǎn)生的基因歧視，基因檢測機(jī)構(gòu)不能隨意泄露基因檢測的結(jié)果，C正確；D、從外來入侵害蟲的原產(chǎn)地引入天敵進(jìn)行治理，由于短期內(nèi)天敵沒有資源和空間等的限制，可能會對入侵地造成生態(tài)影響，D錯(cuò)誤。規(guī)范寫規(guī)范寫長難句規(guī)范答1.植物體細(xì)胞雜交實(shí)驗(yàn)中，原生質(zhì)體要放在等滲或略高滲溶液中制備的原因答：原生質(zhì)體失去了細(xì)胞壁的保護(hù)，在低滲溶液中，因?yàn)闈B透作用，水分會過多地進(jìn)入原生質(zhì)體，有可能導(dǎo)致原生質(zhì)體破裂。2.動物細(xì)胞培養(yǎng)需要添加血清的原因答：動物血清成分復(fù)雜，可保證細(xì)胞的生長代謝對營養(yǎng)的需要。3.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)及應(yīng)用答：能準(zhǔn)確地識別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可大量制備。具體應(yīng)用：(1)作為診斷試劑，如“早早孕診斷試劑盒”；(2)用于治療疾病和運(yùn)載藥物，如“抗體─藥物偶聯(lián)物”，借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用。4.對囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割的原因答：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)一般到囊胚階段才出現(xiàn)，它是發(fā)育為胚胎的基礎(chǔ)細(xì)胞，其他細(xì)胞為滋養(yǎng)層細(xì)胞，只為胚胎和胎兒發(fā)育提供營養(yǎng)。若分割時(shí)不能將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，會出現(xiàn)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)多的部分正常發(fā)育的能力強(qiáng)，少的部分發(fā)育受阻或發(fā)育不良，甚至不能發(fā)育等問題。5.質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件答：能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制、具有標(biāo)記基因、具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)。6.基因工程檢測目的基因是否導(dǎo)入、轉(zhuǎn)錄、翻譯的方法依次為答：是否導(dǎo)入和轉(zhuǎn)錄通過PCR技術(shù)檢測、是否翻譯用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交。綜合訓(xùn)練1．下列關(guān)于植物細(xì)胞工程的說法錯(cuò)誤的是（

）A．圖中的“馬鈴薯番茄”目前沒有什么生物技術(shù)可以成功獲得，是人們處理圖片偽造出來的B．“馬鈴薯番茄”通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得了成功，但沒有獲得人們預(yù)期的性狀C．成功培養(yǎng)原生質(zhì)體是植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的基礎(chǔ)D．通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，能克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和障礙，獲得新品種【答案】A【詳解】A、圖中的“馬鈴薯番茄”目前可以通過無性繁殖嫁接技術(shù)獲得成功（關(guān)鍵點(diǎn)），A錯(cuò)誤；B、馬鈴薯和番茄的屬間體細(xì)胞雜種“馬鈴薯番茄”通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得了成功，但沒有獲得人們預(yù)期的性狀，這與基因的相互作用及雜交細(xì)胞容易丟失染色體有關(guān)，B正確；C、細(xì)胞融合需要去除細(xì)胞壁，因此成功培養(yǎng)原生質(zhì)體是植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的基礎(chǔ)，C正確；D、植物體細(xì)胞雜交能克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和障礙，獲得新品種，D正確。2．重組人血小板生成素（rhTPO）是一種新發(fā)現(xiàn)的造血生長因子，科學(xué)家利用雙酶切法構(gòu)建重組載體后導(dǎo)入到山羊受精卵中，獲得轉(zhuǎn)基因山羊后通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)rhTPO。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．雙酶切法可防止目的基因的自身環(huán)化和目的基因與質(zhì)粒的任意連接B．目的基因不能直接注入受精卵中的原因之一是不能在受體細(xì)胞中自主復(fù)制C．轉(zhuǎn)基因受精卵在前三次分裂過程中每個(gè)細(xì)胞的體積變小，核中遺傳物質(zhì)減少D．乳腺作為生物反應(yīng)器的優(yōu)點(diǎn)是乳汁成分簡單，便于提純等【答案】C【詳解】A、雙酶切法即用兩種不同的限制酶切割含目的基因的DNA和質(zhì)粒載體，優(yōu)點(diǎn)是防止目的基因的自身環(huán)化和目的基因與質(zhì)粒的任意連接，A正確；B、如若一個(gè)目的基因上沒有復(fù)制的原點(diǎn)、標(biāo)記基因等，將不能在宿主細(xì)胞中自主復(fù)制，B正確；C、轉(zhuǎn)基因受精卵的前三次分裂是特殊的有絲分裂（卵裂），每個(gè)細(xì)胞的體積變小，但核中遺傳物質(zhì)不變，C錯(cuò)誤；D、乳腺作為反應(yīng)器的優(yōu)點(diǎn)是乳汁成分簡單、便于提純、頻繁采集幾乎不會對動物產(chǎn)生危害等，D正確。3．如圖是動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中可能出現(xiàn)的接觸抑制現(xiàn)象，對此下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．正常動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中均會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象B．癌細(xì)胞無接觸抑制因而培養(yǎng)時(shí)可形成多層細(xì)胞C．出現(xiàn)接觸抑制時(shí)細(xì)胞將停止分裂活動D．出現(xiàn)接觸抑制后需利用胰蛋白酶消化后才可進(jìn)行傳代培養(yǎng)【答案】A【詳解】A、接觸抑制是體外細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)貼附型細(xì)胞生長的特性，故正常動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中不都會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，A錯(cuò)誤；B、癌細(xì)胞培養(yǎng)過程中不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，因而癌細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)可形成多層細(xì)胞，B正確；C、出現(xiàn)接觸抑制時(shí)細(xì)胞將停止分裂活動，C正確；D、出現(xiàn)接觸抑制后需利用胰蛋白酶消化后是貼壁生長的細(xì)胞變?yōu)閱蝹€(gè)游離細(xì)胞才可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，D正確。4．如圖是培育抗除草劑玉米的技術(shù)路線圖，含有內(nèi)含子的報(bào)告基因只能在真核生物中正確表達(dá)，其產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。轉(zhuǎn)化過程中愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，會導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．過程①中除草劑抗性基因插入T－DNA中，導(dǎo)致T－DNA片段失活B．過程②用Ca2＋處理使農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性改變，成為感受態(tài)細(xì)胞C．檢測是否轉(zhuǎn)化成功，過程③應(yīng)在培養(yǎng)基中加入除草劑和物質(zhì)KD．轉(zhuǎn)化過程中未轉(zhuǎn)化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長是因?yàn)榛蚱啤敬鸢浮緾【詳解】A、T－DNA的作用是將目的基因從農(nóng)桿菌中轉(zhuǎn)移并穩(wěn)定整合到植物染色體DNA中，因此需要把目的基因插入T－DNA片段中，這樣目的基因才可以轉(zhuǎn)移并整合到植物的染色體DNA中，A錯(cuò)誤；B、用氯化鈣處理農(nóng)桿菌使其細(xì)胞膜通透性改變，成為感受態(tài)細(xì)胞，而不是改變農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性，B錯(cuò)誤；C、檢測是否轉(zhuǎn)化成功，篩選時(shí)在培養(yǎng)基中加入除草劑和物質(zhì)K，除草劑是用來檢測目的基因是否正確表達(dá)，物質(zhì)K是用來檢測有沒有導(dǎo)入真核植物細(xì)胞中，C正確；D、基因漂移是目的基因轉(zhuǎn)移到近緣作物中去的現(xiàn)象，轉(zhuǎn)化過程中愈傷組織表面殘留有農(nóng)桿菌導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長的現(xiàn)象不屬于基因漂移，D錯(cuò)誤。5．胚胎工程中的很多技術(shù)手段可用于高等動物繁殖，下列敘述錯(cuò)誤的是()A．精子在自然受精時(shí)也有獲能的過程B．胚胎分割時(shí)要均等分割，分割次數(shù)不能太多C．胚胎工程的采卵技術(shù)可分為手術(shù)采卵和非手術(shù)采卵D．胚胎移植只能把發(fā)育過程中的胚胎移植到受體子宮內(nèi)，才有可能成功【答案】D【詳解】A、精子自然受精也有獲能過程，發(fā)生在雌性的生殖道內(nèi)，A正確；B、胚胎分割的次數(shù)不能太多，而且一定要均等分割，這樣才能保證胚胎分割的成功率，B正確；C、胚胎工程中從母體內(nèi)采卵是一個(gè)重要的過程，分為手術(shù)采卵（沖洗輸卵管采卵）和非手術(shù)采卵（子宮沖卵），C正確；D、胚胎移植也可把胚胎移植到受體的輸卵管中，D錯(cuò)誤。6．下列關(guān)于小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的敘述，正確的是（

）A．精子在獲能溶液中于37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)的目的是使精子獲得能量B．分割的胚胎細(xì)胞有相同的遺傳物質(zhì)，因此發(fā)育成的個(gè)體沒有表型差異C．小鼠體外受精獲得的胚胎發(fā)育成的幼鼠屬于克隆鼠D．注射到囊胚腔中的胚胎干細(xì)胞可以參與個(gè)體器官的發(fā)育【答案】D【詳解】A、精子獲能指的是獲得受精的能力，并不是指精子獲得能量，A錯(cuò)誤；B、分割的胚胎細(xì)胞雖然有相同的遺傳物質(zhì)，但由于發(fā)育過程中所處環(huán)境可能不同，以及可能發(fā)生不同的變異，發(fā)育成的個(gè)體也可能有表型的差異，B錯(cuò)誤；C、小鼠體外受精獲得的胚胎發(fā)育成的幼鼠屬于有性生殖，并不是克隆鼠，克隆鼠指的是通過無性繁殖，如核移植等得到的小鼠，C錯(cuò)誤；D、注射到囊胚腔中的胚胎干細(xì)胞可以參與個(gè)體器官的發(fā)育，D正確。7．兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會導(dǎo)致一方的染色體被排出。若其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理，將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，過程如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是（）A．紫外線照射可誘導(dǎo)中間偃麥草的染色體發(fā)生斷裂B．過程③中常用滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C．耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段D．該育種技術(shù)打破了不同物種間的生殖隔離，克服了遠(yuǎn)緣雜交障礙【答案】B【詳解】A、若在細(xì)胞融合前染色體發(fā)生斷裂，形成的染色體片段可能不會被全部排出，而是整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上留存在雜種細(xì)胞中。所以過程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂，并進(jìn)一步整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上留存在雜種細(xì)胞中，A正確；B、過程③為誘導(dǎo)融合，植物細(xì)胞一般不用滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，常采用化學(xué)法（聚乙二醇）或物理法（振動、離心、電刺激）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，B錯(cuò)誤；C、由題可知，經(jīng)過體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，說明中間偃麥草的染色體被紫外線照射后發(fā)生了斷裂，且其片段已經(jīng)整合到了耐鹽小麥的染色體上，C正確。D、該育種技術(shù)為植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，該技術(shù)獲得耐鹽小麥的理論意義在于突破了物種間的生殖隔離，大大擴(kuò)展了可用于雜交的親本組合的范圍，D正確。8．某研究小組為測定藥物對肝腫瘤細(xì)胞的治療效果，準(zhǔn)備對某種動物的肝腫瘤細(xì)胞（甲）和正常肝細(xì)胞（乙）進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)。下列有關(guān)說法正確的是（）A．在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時(shí)，可用胃蛋白酶處理B．細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是作為細(xì)胞代謝原料C．取甲細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，傳至10~50代就會完全停止D．乙細(xì)胞在原代培養(yǎng)過程中，最終會出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象【答案】D【詳解】A、胃蛋白酶的最適pH大約為2，這一環(huán)境下細(xì)胞往往會受到破壞，不利于培養(yǎng)，所以一般用胰蛋白酶而不用胃蛋白酶處理細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、培養(yǎng)箱中CO2的作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH，B錯(cuò)誤；C、在適宜條件下，肝腫瘤細(xì)胞可以無限增殖，C錯(cuò)誤；D、正常肝細(xì)胞在原代培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，停止增殖，D正確。9．CD47是一種跨膜糖蛋白。它可與巨噬細(xì)胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1．6~5倍，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱。為證明抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細(xì)胞的抑制作用，科學(xué)家按照如下流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述不正確的是（）A．多次進(jìn)行步驟①的目的是獲得更多分泌抗CD47抗體的漿細(xì)胞B．步驟②中可以利用聚乙二醇或滅活的病毒誘導(dǎo)完成細(xì)胞融合C．經(jīng)篩選可得到既能產(chǎn)生抗CD47抗體又能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞D．對照組應(yīng)在巨噬細(xì)胞＋正常細(xì)胞共培養(yǎng)體系中加入單克隆抗體【答案】D【詳解】A、多次進(jìn)行步驟①的目的是加強(qiáng)免疫，獲得更多分泌抗CD47抗體的漿細(xì)胞，A正確；B、誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合可以利用聚乙二醇或滅活的病毒，B正確；C、經(jīng)兩次篩選可得到既能產(chǎn)生抗CD47抗體又能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞，C正確；D、對照組應(yīng)在巨噬細(xì)胞＋腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)體系中不加入單克隆抗體，D錯(cuò)誤。10．下圖表示研究人員利用胚胎工程培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過程，下列相關(guān)說法正確的是（）A．①代表體外受精，與體內(nèi)受精不同的是體外受精前精子需要獲能B．②代表早期胚胎培養(yǎng)，該過程中細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，無細(xì)胞分化C．③代表胚胎分割，需均等分割桑椹胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，以免影響胚胎發(fā)育D．為選育出能泌乳的母奶牛，移植前需從胚胎的滋養(yǎng)層部位取樣，做DNA分析鑒定性別【答案】D【詳解】A、體外受精和體內(nèi)受精前精子都需要獲能，A錯(cuò)誤；B、②代表早期胚胎培養(yǎng)，該過程中細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂和分化，B錯(cuò)誤；C、③代表胚胎分割，需均等分割囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，以免影響胚胎發(fā)育，C錯(cuò)誤；D、進(jìn)行胚胎性別鑒定需取樣滋養(yǎng)層細(xì)胞，做DNA分析性別鑒定，D正確。11．動物細(xì)胞培養(yǎng)是動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，如圖所示，a、b、c表示現(xiàn)代工程技術(shù)，①、②、③表示其對應(yīng)的結(jié)果，下列說法正確的是（

）A．若a是核移植技術(shù)，①反映了動物細(xì)胞也具有全能性B．若c是胚胎分割技術(shù)，③中個(gè)體的基因型和表現(xiàn)型一定相同C．①②③中作為受體的動物品種是珍稀的或存量少的雌性動物D．若b是體外受精技術(shù)，則②為良種家畜快速大量繁殖提供了可能【答案】D【詳解】A、通過核移植技術(shù)獲得動物個(gè)體只能證明動物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，A錯(cuò)；B、胚胎分割技術(shù)是將一個(gè)囊胚或者桑椹胚分割成多份，獲得多個(gè)后代個(gè)體，屬于無性繁殖系，獲得的個(gè)體的基因型一定相同，但是表現(xiàn)型是基因型和環(huán)境條件共同作用的結(jié)果，B錯(cuò)誤；C、珍稀的或存量少的雌性動物屬于保護(hù)動物，不能作為生物工程的受體，應(yīng)該用本地中數(shù)量較多的雌性動物，C錯(cuò)誤；D、若b是體外受精技術(shù)，則②為試管動物，這為良種家畜快速大量繁殖提供了可能，D正確。12．將某病毒的外殼蛋白（L1）基因與綠色熒光蛋白（GFP）基因連接，構(gòu)建L1-GFP融合基因，再將融合基因與質(zhì)粒連接構(gòu)建下圖所示表達(dá)載體。圖中限制酶E1～E4處理產(chǎn)生的黏性末端均不相同。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．構(gòu)建L1-GFP融合基因需要用到限制酶有E1、E2、E4B．E1、E4雙酶切確保L1-GFP融合基因與載體的正確連接C．GFP可用于檢測受體細(xì)胞中目的基因是否表達(dá)D．培育乳汁中含L1的轉(zhuǎn)基因羊需將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入乳腺細(xì)胞【答案】D【詳解】A、構(gòu)建L1-GFP融合基因需要先用限制酶處理獲得L1基因和GFP基因，并將二者連接，故需要用到E1、E2、E4三種酶，A正確；B、根據(jù)題意，限制酶E1～E4處理產(chǎn)生的黏性末端均不相同，E1、E4雙酶切可以有效減少載體自身連接和融合基因自身連接，保證L1-GFP融合基因與載體準(zhǔn)確連接，B正確；C、GFP基因可作為標(biāo)記基因用于檢測目的基因是否表達(dá)，根據(jù)表達(dá)出的熒光蛋白（GFP）在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光，利用這一特性可用于檢測細(xì)胞中目的基因是否表達(dá)，C正確；D、為了獲得L1蛋白，因?yàn)槭芫丫哂腥苄?，因而可將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入受精卵中而不是乳腺細(xì)胞，用于培育乳汁中含有L1蛋白的轉(zhuǎn)基因羊，D錯(cuò)誤。13．囊性纖維病的診斷陣列是表面結(jié)合有單鏈DNA探針的特殊濾紙（其中“0”處放置正常基因的探針，“1～10”處放置不同突變基因的探針）將#1～#3待測個(gè)體DNA用有色分子標(biāo)記，然后將診斷陣列浸泡在溶解有單鏈標(biāo)記DNA的溶液中，檢測結(jié)果如下圖所示。下列敘述正確的是（

）A．診斷陣列可應(yīng)用于產(chǎn)前診斷中染色體篩查B．若#2與#3婚配，則后代攜帶突變基因的概率為3/4C．將標(biāo)記的待測雙鏈DNA分子直接與診斷陣列混合后即可完成診斷D．診斷陣列上放置不同病毒的基因探針可診斷人體感染病毒的類型【答案】D【詳解】A、囊性纖維病是基因突變引起的疾病，所以診斷陣列不能用于染色體的篩查，A錯(cuò)誤；B、根據(jù)分析，#2與#3婚配（Aa4×a2a4），則后代攜帶突變基因的概率為100%，B錯(cuò)誤；C、DNA分子雜交的原理是利用堿基互補(bǔ)配對原則，與單鏈DNA探針特異性的結(jié)合，所以要將待測雙鏈DNA分子加熱，形成單鏈DNA分子，C錯(cuò)誤；D、若將診斷陣列上放置不同病毒的基因探針，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則，也可診斷病毒的類型，D正確。14．關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是（

）A．蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)B．體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體C．植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒D．動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動物的培育【答案】B【詳解】A、蛋白質(zhì)工程可通過對現(xiàn)有基因進(jìn)行改造后而合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)，A正確；B、克隆動物利用了細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)，體細(xì)胞雜交技術(shù)目前主要用于制備單克隆抗體，B錯(cuò)誤；C、莖尖和根尖等分生區(qū)幾乎不含病毒，所以將植物分生區(qū)（莖尖、根尖等）進(jìn)行組織培養(yǎng)可以獲得脫毒苗，C正確；D、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞工程中基本的技術(shù)手段，可為動物的轉(zhuǎn)基因技術(shù)提供受體細(xì)胞等，并且基因工程中的受精卵同樣需要用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)成早期胚胎進(jìn)行移植，D正確。15．干燥綜合征（SS）是一種自身免疫病，患者血清中存在多種抗體，其中SSB抗體特異性最強(qiáng)。科研人員為生產(chǎn)SSB抗體的檢測試劑，利用基因工程獲得重組SSB蛋白，流程如下，請回答：(1)利用RNA通過①過程獲得cDNA需要______酶，從而獲得SSB基因，這是通過構(gòu)建______文庫獲取目的基因的一種方法。通過PCR技術(shù)擴(kuò)增SSB基因的前提是要有____________，以便合成引物。(2)目的基因片段擴(kuò)增n代，共需要個(gè)______引物，共獲得______個(gè)短鏈、等長的目的基因。(3)參與PCR過程的延伸階段的TaqDNA聚合酶具有______特點(diǎn)，dGTP的作用____________。(4)PCR循環(huán)之前，常要進(jìn)行一次預(yù)變性，預(yù)變性的目的是增加______的概率。用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)______（填“必須”或“不必”）知道基因的全部序列。(5)為與PET4la質(zhì)粒連接，獲得的目的基因A兩端要含有______（寫出限制酶名稱）酶切位點(diǎn)。(6)獲得含SSB基因的重組質(zhì)粒后，進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)切割原質(zhì)粒和重組質(zhì)粒，獲得片段大小見表格（1kb=1000堿基對），分析數(shù)據(jù)，計(jì)算可得SSB基因的長度為______。與人基因組文庫中的SSB基因相比，通過①過程獲得的SSB基因結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是______。限制酶EcoRⅠBamHⅠ和XhoⅠ原質(zhì)粒8.1kb2.7kb、5.4kb重組質(zhì)粒3.4kb、5.0kb未做該處理(7)②過程目的是將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入到處于______的大腸桿菌內(nèi)，并接種于添加______的培養(yǎng)基上，收集菌落進(jìn)行鑒定，將陽性菌落進(jìn)一步純化后再將菌體破碎處理，篩選得到重組SSB蛋白。【答案】(1)逆轉(zhuǎn)錄

cDNA

一段已知的SSB基因（目的基因）的核苷酸序列(2)SKIPIF1<0

SKIPIF1<0(3)耐高溫

為DNA復(fù)制提供能量和原料(4)模板DNA徹底變性

不必(5)BamHⅠ和XhoⅠ(6)3kb

沒有啟動子和內(nèi)含子等(7)感受態(tài)

卡那霉素【詳解】（1）利用RNA通過①獲得cDNA是逆轉(zhuǎn)錄過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶，從而獲得SSB基因，這是通過構(gòu)建cDNA文庫獲取目的基因的一種方法。通過PCR技術(shù)擴(kuò)增SSB基因的前提是要有一段已知的SSB基因（目的基因）的核苷酸序列，以便合成引物。（2）復(fù)制n代，得到2n個(gè)DNA分子，則單鏈DNA有2n+1個(gè)，再減去2條模板單鏈DNA，所以需要的引物數(shù)為2n+1-2個(gè)；經(jīng)過n輪PCR后，總共得到DNA分子數(shù)為2n個(gè)，其中含長鏈或中鏈的DNA分子數(shù)為2n個(gè)，只含短鏈的DNA分子（目的基因）數(shù)為2n-2n個(gè)。（3）PCR過程的延伸階段（