不同劑量hcg對(duì)水培黃瓜繁殖性能的影響

不同劑量hcg對(duì)水培黃瓜繁殖性能的影響

鰻魚，又名日本魚類、長(zhǎng)魚、蛇魚和池魚，屬于硬骨魚科、甲狀腺素科和甲狀腺素科。只有少數(shù)省份分布在中國(guó)。黃鱔肉質(zhì)細(xì)嫩,無肌間刺,可食部分達(dá)65%以上。鱔肉營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)高達(dá)18%以上;鮮味氨基酸含量較高,故味道鮮美;脂肪含量低(質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.9%),具有健腦作用的二十二碳六烯酸(DHA)含量高(質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.63%)。黃鱔一直是人們喜食的經(jīng)濟(jì)魚,是著名的食用滋補(bǔ)和藥用水產(chǎn)品,同時(shí)也是我國(guó)傳統(tǒng)的出口商品之一。隨著國(guó)際市場(chǎng)黃鱔需求量的增加,黃鱔將是新的水產(chǎn)養(yǎng)殖熱點(diǎn)品種之一。目前黃鱔養(yǎng)殖不能形成規(guī)模產(chǎn)量,其主要原因是苗種難以大批量供應(yīng)。黃鱔的人工繁殖已有一些報(bào)道,但由于黃鱔具獨(dú)特的生物學(xué)特性(性逆轉(zhuǎn)、吐泡營(yíng)巢、懷卵量低),使得人工繁殖未能得到根本性突破,不能大批量生產(chǎn)苗種。已報(bào)道的人工繁殖所使用的激素種類、劑量不盡相同,受精方式也不盡相同[5,6,7,8,9,10,11,12]。不同劑量絨毛膜促性腺激素(HCG)對(duì)黃鱔催產(chǎn)率的影響以及不同受精方式(自然產(chǎn)卵受精和人工授精)對(duì)黃鱔卵受精率和孵化率的影響均未見報(bào)道。本研究采用不同劑量HCG注射黃鱔親體,讓其自然產(chǎn)卵、受精、孵化,篩選出最適的HCG催產(chǎn)劑量催產(chǎn)注射,比較自然產(chǎn)卵受精和人工授精對(duì)黃鱔卵受精率和孵化率的影響,為黃鱔繁殖生物學(xué)研究積累理論資料,為黃鱔規(guī)?；绶N生產(chǎn)提供理論依據(jù)和參考。1材料和方法1.1親魚的繁殖效果從農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)收購后備親魚,雌雄分養(yǎng),經(jīng)3~4個(gè)月強(qiáng)化培育,再選擇性腺發(fā)育良好的親魚作繁殖用。雌魚體長(zhǎng)25~40cm,平均28cm,體質(zhì)量90~150g,平均112g;雄魚體長(zhǎng)45~70cm,平均53cm,體質(zhì)量160~280g,平均192g。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1催產(chǎn)劑量的確定選擇性腺發(fā)育良好的親魚進(jìn)行人工催產(chǎn),注射藥物為HCG,設(shè)置5個(gè)劑量組,分別是100、1000、2000、3000、4000IU/kg。每組劑量注射15對(duì)親魚,雌魚注射24h后再用減半劑量注射雄魚,雌雄均一次注射。每組設(shè)3個(gè)平行,求平均值,根據(jù)催產(chǎn)率選定適宜催產(chǎn)劑量。此時(shí)水溫21~23℃。1.2.2產(chǎn)卵網(wǎng)箱的準(zhǔn)備用選出的最適HCG劑量催產(chǎn)注射。一部分親魚注射后放入產(chǎn)卵網(wǎng)箱內(nèi),讓其自然產(chǎn)卵、受精,雌雄比1∶1,密度4組/m2,及時(shí)觀察吐泡筑巢和產(chǎn)卵情況。產(chǎn)卵網(wǎng)箱規(guī)格2m×1m×1m,箱內(nèi)放有已消毒的水花生、水葫蘆等水草。另一部分注射后雌雄分養(yǎng)于不同產(chǎn)卵網(wǎng)箱內(nèi),準(zhǔn)備進(jìn)行人工授精。經(jīng)一定時(shí)間(約50h)后開始檢查,用手觸摸雌魚腹部有卵粒流動(dòng)感、輕擠雌魚腹部有少量卵粒流出、輕擠雄魚腹部有少量乳白色精液流出,這時(shí)便可進(jìn)行人工授精。采用魚用生理鹽水半干法人工授精,雌雄比例為2~3∶1。少量雌魚卵不易擠出,可用剪刀將生殖孔稍剪開些再擠。雄魚精液量少,采用剖腹取精巢、剪碎精巢、再進(jìn)行人工授精的方法。此時(shí)水溫24~26℃。1.2.3靜水孵化網(wǎng)格分別取自然產(chǎn)卵的受精卵(連同泡沫魚巢)和人工授精的受精卵于自制的孵化網(wǎng)格內(nèi),靜水孵化,孵化密度1400~1500粒/格。孵化網(wǎng)格規(guī)格40cm×30cm×8cm,放在孵化網(wǎng)箱內(nèi),每箱3個(gè)網(wǎng)格。孵化池塘內(nèi)每天小流量加注部分新水、抽出部分老水。此時(shí)水溫24~26℃。1.3催產(chǎn)成蟲魚數(shù)人工繁殖的“三率”計(jì)算參照王武的方法。催產(chǎn)率/%=(產(chǎn)卵雌魚數(shù)×100)/催產(chǎn)雌魚總數(shù);受精率/%=(受精卵數(shù)×100)/總卵數(shù);孵化出苗率/%=(出苗數(shù)×100)/受精卵數(shù)。2結(jié)果2.1不同劑量的hcg對(duì)鰻魚的加速生產(chǎn)影響使用不同劑量的HCG注射后,其催產(chǎn)結(jié)果如表1所示。當(dāng)劑量為3000IU/kg時(shí),其催產(chǎn)率最高且效應(yīng)時(shí)間最集中。2.2出苗情況分析采用自然產(chǎn)卵和人工授精2種方式,黃鱔卵的受精和孵化出苗情況如表2所示。人工授精時(shí)孵化出苗率較低,但受精率明顯高于自然產(chǎn)卵。綜合受精率和孵化出苗率,在產(chǎn)卵數(shù)相同情況下,人工授精時(shí)孵化出苗數(shù)要高于自然受精。3分析與經(jīng)驗(yàn)3.1親肉的催產(chǎn)作用關(guān)于黃鱔人工繁殖催產(chǎn)藥物的研究,趙云芳等結(jié)果表明HCG(2000IU/kg)催產(chǎn)效果最好(催產(chǎn)率70%~90%)、LRH-A(20~40μg/kg)次之(催產(chǎn)率50%以上)、鯉腦垂體最差(反應(yīng)小,一般不受精);陳鵬飛等結(jié)果為L(zhǎng)RH-A5+DOM(每尾5μg+3.3mg)組合和LRH-A5+HWHO-2(每尾5μg+3.3mg)組合效果最佳(催產(chǎn)率58.82%)、HCG(每尾1000IU)效果最差(催產(chǎn)率29.41%);李建國(guó)、蘇建國(guó)認(rèn)為L(zhǎng)RH-A催產(chǎn)效果較好;陳德英認(rèn)為HCG(2000IU/kg)效果較好;邴旭文等結(jié)果表明親鱔繁殖前每尾注射LRH-A12.5μg催熟、7d后再注射DOM0.5μg或LRH-A+HCG(0.5μg+500IU)催產(chǎn)效果最好。前人研究黃鱔人工繁殖時(shí)催產(chǎn)藥物種類、劑量不盡相同,是因?yàn)轸~類人工繁殖的催產(chǎn)率除了受注射藥物的種類、劑量影響外,還與親魚的成熟度、水溫、水質(zhì)、注射次數(shù)等多種因素有關(guān)。最佳的激素種類組合和劑量有待進(jìn)一步探究。本研究?jī)H用HCG1種藥物注射,當(dāng)劑量為3000IU/kg時(shí),催產(chǎn)率高達(dá)95.6%,說明在其它內(nèi)界、外界因子適合的條件下,用HCG對(duì)黃鱔進(jìn)行人工催產(chǎn)是完全可行的。3.2產(chǎn)卵時(shí)間和人工授精方式對(duì)蛋黃卵受精率和孵化出苗率的影響尹紹武等研究不同生態(tài)因子——溫度、pH、不同孵化方式、氨氮濃度等對(duì)黃鱔受精卵孵化率的影響,采用的是人工授精方式,未比較自然產(chǎn)卵受精和人工授精對(duì)黃鱔卵受精率和孵化率的影響,且也未見其它文獻(xiàn)報(bào)道。本文對(duì)此作出比較,綜合受精率和孵化出苗率,在產(chǎn)卵數(shù)相同情況下,人工授精的孵化出苗數(shù)要高于自然受精。但人工授精時(shí)親魚損傷大,尤其雄性全部殺死,增加了生產(chǎn)成本,且人工授精也增加了勞動(dòng)強(qiáng)度。3.3生殖季節(jié)的選擇通過比較發(fā)現(xiàn),后備親魚經(jīng)3~4個(gè)月強(qiáng)化培育后再選擇繁殖用親魚,其性腺發(fā)育成熟度比繁殖季節(jié)在市場(chǎng)直接選購的要好,且產(chǎn)后親魚成活率高。另外,具備充足的后備親魚也是進(jìn)行大批量人繁生產(chǎn)的保障,可避免臨時(shí)市場(chǎng)鱔源不足給生產(chǎn)帶來的不利影響。本次試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)有個(gè)體較大的雌鱔和個(gè)體較小的雄鱔,因此在雌雄配組時(shí),不能單純從體長(zhǎng)上判斷,還應(yīng)綜合考慮形態(tài)學(xué)、生理學(xué)指標(biāo)。生殖季節(jié),雌鱔頭較小、不