脂溶性茶色素提取工藝研究

脂溶性茶色素提取工藝研究

目前，中國(guó)使用的大多數(shù)食用色素都是合成色素，副作用巨大，不利于人類(lèi)健康。隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展,人民健康意識(shí)逐漸增強(qiáng),合成色素的使用會(huì)逐漸被禁止,因而開(kāi)發(fā)利用安全優(yōu)質(zhì)的天然色素意義重大。茶色素作為一種天然食用色素,具有降血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗脂質(zhì)過(guò)氧化、清除氧自由基、增強(qiáng)免疫功能、改善微循環(huán)及抗腫瘤等藥理作用。茶色素的提取方法中,有關(guān)有機(jī)溶劑提取法的研究較多,但得到的最優(yōu)提取條件相差較大,并且提取物中含有相當(dāng)多的雜質(zhì)。作者在此以乙醇為溶劑從低檔綠茶中提取脂溶性茶色素,并對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行了研究,以更深一步認(rèn)識(shí)茶色素穩(wěn)定性條件、提高茶色素的含量,發(fā)揮其最大的功效。1研磨法制備出亞胺類(lèi)提取物稱(chēng)取5g茶葉粉末置于燒杯中,加入一定量的95%乙醇,然后加入0.1g碳酸鈣,放入研缽中研磨至綠色變淡,再加入一定量的95%乙醇,靜置數(shù)小時(shí);過(guò)濾,將濾液倒入小燒瓶中。安裝蒸餾裝置,將濾液進(jìn)行蒸餾,待濾液快蒸完時(shí),轉(zhuǎn)入蒸發(fā)皿中蒸干,得到提取物。稱(chēng)取提取物0.1054g溶于80%乙醇中,即得黃綠色0.1%的脂溶性茶色素乙醇溶液。2可靠性研究2.1脂溶性茶色素乙醇溶液的吸光度分別取3mL0.1%的脂溶性茶色素乙醇溶液于7支25mL的具塞試管中,然后加入80%乙醇至刻度線,置于水浴鍋中,分別于60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、85℃、90℃加熱10min后冷卻至室溫。在特征吸收波長(zhǎng)664nm下,以80%乙醇作為參比液,用分光光度計(jì)測(cè)脂溶性茶色素乙醇溶液的吸光度,并觀察顏色變化。結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知,隨著溫度的升高,脂溶性茶色素乙醇溶液的吸光度變化不大。表明溫度對(duì)脂溶性茶色素的穩(wěn)定性影響不大,該色素的熱穩(wěn)定性較好。2.2脂溶性茶色素乙醇溶液ph值的確定分別取2mL0.1%的脂溶性茶色素乙醇溶液于10支具塞試管中,然后加入pH值分別為3.0、3.6、4.2、4.8、5.4、6.0、6.6、7.2、7.8、8.0的0.2mol·L-1磷酸氫二鈉-0.1mol·L-1檸檬酸鈉緩沖溶液,加蒸餾水至刻度,混勻,靜置。在特征吸收波長(zhǎng)664nm下,以蒸餾水作為參比液,用分光光度計(jì)測(cè)脂溶性茶色素乙醇溶液的吸光度,并觀察顏色變化。結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可知,隨著pH值的增大,脂溶性茶色素乙醇溶液的吸光度逐漸升高;在pH值為4.8～6.6時(shí),吸光度變化不大;繼續(xù)增大pH值,吸光度減小。表明,脂溶性茶色素在pH值為4.8～6.6(弱酸性條件)時(shí)最穩(wěn)定。2.3脂溶性茶色素的穩(wěn)定性測(cè)定分別取10mL1mg·mL-1的不同金屬離子溶液(氯化鉀、氯化銅、三氯化鐵、氯化亞錫、氯化鋅、氯化鎂、三氯化鋁)于7支具塞試管中,然后加入2mL0.1%的脂溶性茶色素乙醇溶液,加蒸餾水至刻度。在特征吸收波長(zhǎng)664nm下,以蒸餾水作為參比液,用分光光度計(jì)測(cè)脂溶性茶色素乙醇溶液的吸光度,并觀察顏色變化。結(jié)果見(jiàn)表3。由表3可知,加入K+、Cu2+、Zn2+、Mg2+、Al3+,脂溶性茶色素乙醇溶液的吸光度變化不大;加入Fe3+、Sn2+,溶液的吸光度變化較大,且Fe3+溶液中產(chǎn)生褐色沉淀,可能是由于脂溶性茶色素中含有的大量酚類(lèi)物質(zhì)與Fe3+發(fā)生反應(yīng)。表明,K+、Cu2+、Zn2+、Mg2+、Al3+對(duì)脂溶性茶色素的穩(wěn)定性影響較小,Fe3+、Sn2+對(duì)脂溶性茶色素的穩(wěn)定性影響明顯。2.4脂溶性茶色素乙醇溶液的吸光度分別取10mL1%的次氯酸鈉和0.1mol·L-1的重鉻酸鉀于具塞試管中,然后各加入3mL0.1%的脂溶性茶色素乙醇溶液,加蒸餾水至刻度,搖勻,靜置。在特征吸收波長(zhǎng)664nm下,以蒸餾水作為參比液,用分光光度計(jì)測(cè)脂溶性茶色素乙醇溶液的吸光度,并觀察顏色變化。結(jié)果見(jiàn)表4。由表4可知,當(dāng)加入氧化劑次氯酸鈉和重鉻酸鉀時(shí),脂溶性茶色素乙醇溶液的顏色發(fā)生明顯變化,且兩者的吸光度相差很大。表明脂溶性茶色素的抗氧化性較弱。2.5脂溶性茶色素乙醇溶液的吸光度分別取10mL0.1mol·L-1的硫化鈉和無(wú)水亞硫酸鈉于具塞試管中,然后各加入3mL0.1%的脂溶性茶色素乙醇溶液,加蒸餾水至刻度,搖勻,靜置。在特征吸收波長(zhǎng)664nm下,以蒸餾水作為參比液,用分光光度計(jì)測(cè)脂溶性茶色素乙醇溶液的吸光度,并觀察顏色變化。結(jié)果見(jiàn)表5。由表5可知,當(dāng)加入還原劑硫化鈉和無(wú)水亞硫酸鈉時(shí),脂溶性茶色素乙醇溶液的顏色變化不明顯,兩者的吸光度相差不大。表明脂溶性茶色素的抗還原性較強(qiáng)。2.6脂溶性茶色素乙醇溶液的穩(wěn)定性測(cè)定結(jié)果分別取2mL0.1%的脂溶性茶色素乙醇溶液于12支具塞試管中,用蒸餾水定容到25mL,分別在自然光下和暗處存放不同時(shí)間。在特征吸收波長(zhǎng)664nm下,以蒸餾水作為參比液,用分光光度計(jì)測(cè)脂溶性茶色素乙醇溶液的吸光度,并觀察顏色變化。結(jié)果見(jiàn)表6。由表6可知,暗處存放不同時(shí)間后,脂溶性茶色素乙醇溶液的吸光度變化很小;自然光下存放,脂溶性茶色素乙醇溶液的吸光度逐漸變小。表明暗處存放對(duì)脂溶性茶色素的穩(wěn)定性影響不大,自然光下存放對(duì)脂溶性茶色素的穩(wěn)定性影響較大。3溫度和存放時(shí)間對(duì)脂溶性茶色素穩(wěn)定性的影響以乙醇為溶劑從茶葉中提取脂溶性茶色素,研究了溫度、pH值、金屬離子、氧化劑、還原劑、暗處存放和自然光下存放對(duì)脂溶性茶色素穩(wěn)定性的影響。結(jié)果表明:溫度對(duì)脂溶性茶色素的穩(wěn)定性影響不大;弱酸性條件(pH=4.8～6.6)下,脂溶性茶色素的穩(wěn)定性較好;K+、Cu2+、Zn2+、Mg2+、Al3+