高效液相色譜法測(cè)定農(nóng)產(chǎn)品滅多威殘留量

高效液相色譜法測(cè)定農(nóng)產(chǎn)品滅多威殘留量

為了監(jiān)測(cè)永久性殘余對(duì)農(nóng)產(chǎn)品的影響，評(píng)估永久性殘余留在農(nóng)產(chǎn)品中的情況，防止其污染，本實(shí)驗(yàn)對(duì)廣州不同品種的農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行了測(cè)定。從不同程度上講，需要調(diào)查不同程度的分散殘余，為分析和解決當(dāng)前市場(chǎng)上農(nóng)產(chǎn)品的農(nóng)藥和衛(wèi)生問題提供了一定的基礎(chǔ)。1實(shí)驗(yàn)部分1.1儀器美國(guó)Biorad700高效液相色譜儀、1706UV檢測(cè)器,7125進(jìn)樣器,C18色譜柱,分析天平,恒溫水浴箱。1.2甲醇溶液現(xiàn)用滅多威標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.17mg/ml,滅多威儲(chǔ)備液1.00mg/ml甲醇溶液均由廣東省植保站提供;乙酸乙酯、石油醚、正己烷、氯仿、NaCl、無水硫酸鈉均為分析純,甲醇為色譜純,實(shí)驗(yàn)用水均為雙蒸水。1.3實(shí)驗(yàn)步驟1.3.1選擇樣品,購(gòu)買樣品從廣州市農(nóng)林市場(chǎng)購(gòu)買菜心、菠菜、白菜、番茄、茄子、四季豆、蕃石榴等樣品,中華廣場(chǎng)吉之島超市購(gòu)買生菜、芥藍(lán)、菜心、青椒、布林、貢梨、砂糖桔、蘋果、煙葉等樣品。1.3.2提取液的制備稱取樣品20g,攪碎,用50ml乙酸乙酯分次洗入250ml具塞三角燒瓶中,浸泡、振蕩半小時(shí)。將提取液過濾,濾液移入蒸發(fā)皿,用15ml乙酸乙酯分次洗滌殘?jiān)?洗液并入蒸發(fā)皿。在60℃水浴中蒸發(fā)除去乙酸乙酯后,用25ml雙蒸餾水分次洗入125ml分液漏斗中,加入2.5gNaCl,用30ml石油醚分次萃取水層后棄去,再用20ml正己烷分兩次萃取水層后棄去,水層用50ml氯仿分3次萃取,萃取液流經(jīng)5g無水硫酸鈉干燥后,移入蒸發(fā)皿,于60℃水浴蒸發(fā)除去氯仿,用甲醇溶解定容至3ml,待上機(jī)分析。加標(biāo)樣是攪碎的樣品在用乙酸乙酯洗入三角燒瓶后加入50μl滅多威標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,其余處理同樣品。1.3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定色譜柱為100×8mmC18反相鍵合柱,流動(dòng)相為甲醇∶水(V/V)=1∶1,流速為1.0ml/min,檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm,進(jìn)樣20μl,在上述條件下,用滅多威的保留時(shí)間定性,用峰面積,按標(biāo)準(zhǔn)曲線定量。2結(jié)果2.1不同色譜條件下滅多威的保留時(shí)間取20μl滅多威標(biāo)準(zhǔn)液(1.17μg/ml),在上述的色譜條件下得到滅多威的保留時(shí)間為3.73min±0.4min,及其標(biāo)準(zhǔn)色譜圖。2.2標(biāo)準(zhǔn)工作曲線用標(biāo)準(zhǔn)滅多威儲(chǔ)備液配成1.17μg/ml,11.7μg/ml,23.4μg/ml,46.8μg/ml標(biāo)準(zhǔn)工作液,按照上述色譜條件進(jìn)樣分析,繪出標(biāo)準(zhǔn)工作曲線,回歸方程為Y=-0.880+1.053×10ˉ2X,r=0.998,滅多威在1.17～46.80μg/ml范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。按產(chǎn)生二倍噪聲信號(hào)時(shí)的最小進(jìn)樣量測(cè)得最小檢出限為2.0ng,最低檢出濃度為0.4μg/ml。2.3加標(biāo)回收率的測(cè)定選取未受滅多威污染的農(nóng)產(chǎn)品做加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn),按表1加入一定量的滅多威標(biāo)準(zhǔn)溶液,按實(shí)驗(yàn)方法處理后,在上述的色譜條件下測(cè)定滅多威的殘留量,結(jié)果見表1,滅多威在農(nóng)產(chǎn)品樣中的平均加標(biāo)回收率為71%～98%,變異系數(shù)小于7.0%。2.4殘留量測(cè)定取多種農(nóng)產(chǎn)品樣品,按實(shí)驗(yàn)方法處理后,在上述的色譜條件下測(cè)定滅多威的殘留量,見表2、3。滅多威在市場(chǎng)來源樣品中的檢出率為42.86%,在超市來源樣品中的檢出率為33.33%,總樣品檢出率為37.50%。3關(guān)于消滅滅多威的農(nóng)業(yè)殘留情況滅多威,也稱萬靈,是一種廣譜性氨基甲酸酯類殺蟲劑,可用于防治多種作物的菜青蟲、蚜蟲、跳甲、斜紋夜蛾、甜菜夜蛾、薊馬、潛葉蛾、煙青蟲等,在我國(guó)登記的作物為甘藍(lán)、柑桔、煙草、棉花等。通過對(duì)我省農(nóng)藥使用情況的調(diào)查,以及廣東省植保站2003年農(nóng)藥需求的統(tǒng)計(jì)得知,2003年滅多威在我省的需求量為150噸,折100%含量為75噸。近年來,滅多威作為一種新型氨基甲酸酯類殺蟲劑,在廣大農(nóng)村地區(qū)開始被逐漸用于防治蔬菜、瓜果、棉花病蟲害。由于滅多威是一種高毒殺蟲劑,其毒性強(qiáng),氣味小,無色,易溶于水,易因滅多威在農(nóng)作物中的殘留而引起食物中毒事件的發(fā)生,因此應(yīng)建立對(duì)滅多威在農(nóng)產(chǎn)品中的殘留情況進(jìn)行監(jiān)測(cè)。目前有關(guān)滅多威殘留量的分析方法,國(guó)內(nèi)外報(bào)道較少,且大都前處理過程操作繁雜,回收率也較低。3.1檢測(cè)方法的選擇根據(jù)國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道,目前滅多威的測(cè)定方法主要為氣相色譜法和高效液相色譜法,由于滅多威的熱穩(wěn)定性差,使氣相色譜法的應(yīng)用受到了一定的限制。因此,近年來國(guó)內(nèi)外對(duì)高效液相色譜法檢測(cè)滅多威殘留量的研究較為活躍,多為柱后衍生-熒光檢測(cè)器檢測(cè)的高效液相色譜法。但是使用柱后衍生-熒光檢測(cè)器方法需要專門的衍生反應(yīng)裝置,有的需要使用昂貴的全自動(dòng)凝膠滲透色譜凈化儀(GPC),而且操作過程十分繁瑣,不易普及推廣。所以本實(shí)驗(yàn)選用高效液相色譜法-紫外檢測(cè)器方法檢測(cè)滅多威殘留量,該方法操作比較簡(jiǎn)便,選擇的檢測(cè)波長(zhǎng)為滅多威最大吸收波長(zhǎng)235nm,用石油醚除去農(nóng)作物中的酯溶性強(qiáng)的色素及其它雜質(zhì),再用正己烷進(jìn)一步除去酯溶性稍弱些的色素等雜質(zhì),經(jīng)過前處理雜質(zhì)已經(jīng)分離較完全,滅多威和雜質(zhì)峰也有很好分離效果;再用滅多威的保留時(shí)間定性,用峰面積,按標(biāo)準(zhǔn)曲線定量,檢測(cè)方法精密度高,準(zhǔn)確度好。而且本方法沒有使滅多威和熱水直接接觸,避免滅多威在熱水中的水解,使加標(biāo)回收率提高到71%～98%,高于國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道的70%左右。3.2實(shí)驗(yàn)殘留結(jié)果在所測(cè)農(nóng)產(chǎn)品樣中滅多威的殘留檢出率為33%～43%,其檢出量為0.45～7.88mg/kg,如果按照回收率約為80%計(jì)算,其實(shí)際含量約為0.56～9.85mg/kg。本實(shí)驗(yàn)殘留結(jié)果分析說明,滅多威作為高毒殺蟲劑,在我國(guó)廣大地區(qū)仍有一定的使用量,在市售產(chǎn)品中的殘留問題仍然比較嚴(yán)重。根據(jù)我國(guó)農(nóng)業(yè)部頒布的《農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)》,限制滅多威僅限用于甘藍(lán)、柑桔、煙草和棉花的殺蟲,而本實(shí)驗(yàn)測(cè)得含有滅多威的樣品中,除了砂糖桔是在滅多威的使用范圍內(nèi),菜心、白菜、蕃石榴、芥藍(lán)和布林均是在滅多威的使用范圍之外,這是違反了我國(guó)《農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則》和《農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)》的。3.3預(yù)防農(nóng)藥殘留問題根據(jù)我國(guó)農(nóng)藥毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),滅多威屬高毒殺蟲劑,原藥大鼠急性經(jīng)口LD50為17～24μg/kg,而本實(shí)驗(yàn)測(cè)得含有滅多威的樣品中實(shí)際最高殘留量高達(dá)9.85mg/kg左右,檢出率達(dá)33%～43%,可見滅多威在市售農(nóng)產(chǎn)品中的殘留問題仍比較嚴(yán)重,這是不容忽視的。有調(diào)查顯示,種植的農(nóng)民一般都是在收獲期前10～15d內(nèi)使用農(nóng)藥,甚至有在收獲前4d使用農(nóng)藥的,結(jié)果使農(nóng)產(chǎn)品上農(nóng)藥殘留量濃度高,影響食用者的健康,特別是高毒農(nóng)藥,更有引起中毒的可能。福建省就曾報(bào)道過一起因空心菜殘留滅多威所引起的食物中毒事件,其當(dāng)時(shí)測(cè)得空心菜樣的滅多威殘留含量為9.8mg/kg。因此,應(yīng)警惕違規(guī)