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文檔簡介

血液生物學

血液是由血漿、血細胞組成的紅色液體,流動于血管,循環(huán)于全身,直接或間接與機體所有組織發(fā)生聯(lián)系。機體的很多疾病都可以引起血液成分的變化,血液中各成分質(zhì)量和數(shù)量的改變,均可由血液檢驗反映出來。如細菌或病毒感染、各種貧血等。所以,血液檢查不僅幫助診斷各種血液病,對其他系統(tǒng)的疾病診斷都有幫助。同時血液檢驗對疾病治療、預防和預后觀察也有重要意義。第一節(jié)血涂片制作

一、目的和要求

熟練掌握血涂片制作和染色方法(Wright染色)。二、內(nèi)容(一)原理Wright’s染料是由美蘭和伊紅的化合物溶于甲醇而制成,伊紅是帶負電荷的酸性染料,美蘭是帶正電荷的鹼性染料,兩種染料結合在一起溶解在甲醇中后,美蘭和伊紅又重新分離開來,成為帶負電荷的伊紅離子與帶正電荷的美蘭離子,以使帶不同電荷的蛋白質(zhì)加以吸附。血細胞內(nèi)含有不同等電點的蛋白質(zhì),在相同的酸度下帶有不同的電荷,因而能選擇性的吸附相應的染料而受染。Wright’s染料對氫離子濃度極為敏感,因此用緩沖液稀釋染液,可使染色作用穩(wěn)定,便于識別和比較細胞的變化。

染色液在PH6.4或PH6.98的溶液中進行,有的蛋白質(zhì)吸附酸性染料伊紅,被染成紅色,這種物質(zhì)叫嗜酸性物質(zhì)(如嗜酸性粒細胞的顆粒),有的物質(zhì)吸附堿性染料美蘭,被染成蘭色,稱為嗜鹼性物質(zhì),如胞核、嗜鹼性粒細胞顆粒。有的蛋白質(zhì)在PH6.4時恰為等電點,既吸附酸性染料,又吸附鹼性染料,稱為嗜中性物質(zhì)。(二)材料1.甲醛、乙醇、二甲苯、Wright’s染料等。2.載玻片、推玻片、滴管、染色架等。(三)操作步驟

(1)清洗:將載玻片放入清潔液浸泡→流水沖洗→95%乙醇浸泡→拭凈待用。(2)取血:用75%乙醇消毒耳垂或手尖皮膚,刺破,取血,置于載玻片一端。(3)涂片:取邊緣平整載玻片一張,使其一邊與載有血滴的載玻片呈35~45o角相交于血滴,血滴沿載玻片的邊緣展開,將斜置的載玻片向前推動,血滴即在載玻片上被鋪成血膜。(4)晾干:血涂片必須完全干燥后,才能染色,染色前先在涂片上用特種鉛筆:畫出染色區(qū)域,然后滴加染液,使染液完全淹沒在畫定的區(qū)域內(nèi)。(5)染色:滴加Wright’s染料靜止1~2分鐘后,加等量的雙蒸水或磷酸鹽緩沖液于染液中,染色5~10分鐘。染液上若出現(xiàn)金屬薄膜,這說明染料有效。染色時間視染料的成熟程度及室溫條件而定。染色時不要搖動,否則易于產(chǎn)生沉淀。(6)沖洗:用滴管吸蒸餾水洗去染液,或用普通水洗,便可在油鏡下觀察。三、作業(yè)制作一張血涂片,并進行Wright’s染色。四、思考題簡述Wright氏染色的原理和方法。光鏡下,如何鑒別三種有粒白細胞及兩種無粒白細胞?進行血細胞計數(shù)要注意什么?第二節(jié)血涂片觀察和計數(shù)一、目的和要求1.掌握顯微鏡油鏡的操作程序。2.掌握各種血細胞的鏡下形態(tài)特征和計數(shù)方法。二、內(nèi)容(一)油鏡使用方法先在低倍鏡下找到白細胞最多的部位,在該部位加一滴香柏油,將油鏡頭接觸油滴,再用微調(diào)調(diào)至清楚為止,即可觀察。使用完畢,用二甲苯清洗油鏡頭和血片。(二)觀察血液有形成分1.紅細胞紅細胞為圓形無核的桔紅色細胞,數(shù)目最多,細胞中央著色淺,周緣著色較深。有時可見幾個紅細胞連在一起,似串錢狀。2.中性粒細胞白細胞中數(shù)目最多的細胞,易于找到。體積較紅細胞大,呈圓形。細胞質(zhì)內(nèi)有分布均勻的細小的染成淺紅色或淺紫色顆粒。細胞核呈桿狀或分葉狀,分葉核之間有染色質(zhì)絲相連,分2~5葉不等,細胞核著色較深,染色質(zhì)呈團塊狀。3.嗜酸性粒細胞數(shù)目較少,胞體較中性粒細胞稍大,呈圓形。細胞質(zhì)中充滿粗大而均勻的染成亮紅色的嗜酸性顆粒,細胞核多為2葉,染色質(zhì)較致密。4.嗜堿性粒細胞數(shù)目最少,涂片中不易找到。胞體大小與中性粒細胞相近,核形狀不規(guī)則,常呈S型,核著色較淺,輪廓常不清楚。胞質(zhì)中可見大小不等、分布不均、呈深藍紫色的嗜堿性顆粒。5.淋巴細胞以小淋巴細胞居多,核圓或橢圓形,一側常有凹痕。染色質(zhì)呈粗塊狀,著色深;胞質(zhì)很少,呈天藍色,可見少量淺紫色的嗜天青顆粒。6.單核細胞是血細胞中體積最大的細胞,呈圓形或橢圓形,核為腎形或馬蹄形,染色質(zhì)稀疏。胞質(zhì)較豐富,呈灰藍色,也可見少量淺紫色的嗜天青顆粒。7.血小板其形狀不規(guī)則,大多聚集在一起,周圍部分呈透明淺藍色,中央部分有紫藍色顆粒。(三)紅細胞計數(shù)1.制備紅細胞懸液取20ul血液,稀釋于1.8ml紅細胞稀釋液(生理鹽水)中,制成紅細胞懸液。2.加樣取一付擦拭干凈的血球計數(shù)槽,將蓋玻片蓋在計數(shù)槽上(光潔透亮的區(qū)域)。用吸管將制備好的紅細胞懸液吹勻,吸管頭緊挨蓋玻片邊緣。滴1滴懸液于血球計數(shù)板的斜坡和蓋玻片之間的縫隙中,使之自然滲入到計數(shù)槽內(nèi)。細胞懸液不可滴得過多,如果計數(shù)槽內(nèi)有氣泡則需擦干血球計數(shù)板重新再做。3.計數(shù)

在低倍鏡下調(diào)暗光線,觀察血球計數(shù)槽上的格紋,共由9個大格組成,計數(shù)中間大方格中的4個角上的中方格及中央一個中方格內(nèi)的所有紅細胞數(shù),注意順小格依次計數(shù)。壓線的細胞遵循“數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右”的原則,以免重復計數(shù)或漏數(shù)。4.計算按以下公式可計算出每毫升紅細胞懸液中所含細胞數(shù):五個中格內(nèi)的紅細胞總數(shù)

×1010=紅細胞數(shù)/升5.正常值成人4~10×109/L兒童5~12×109/L新生兒15~20×109/L6.臨床意義

(四)白細胞計數(shù)1.用刻度吸管吸取0.01M鹽酸或0.02M醋酸0.38ml,置于小試管內(nèi)。

2.用定量采血管吸血到20ul刻度處,擦去管外余血,將血液輕輕排入試管內(nèi)稀釋液中,并用上清液洗管三次,立即混勻,待液體顯褐色后再輕輕振蕩混勻,用吸管取此稀釋液充入計數(shù)池內(nèi),靜置2~3min。3.用低倍鏡觀察,計數(shù)計算池內(nèi)四角的四個大方格內(nèi)的白細胞數(shù),將其總和乘50乘106,即得每升血液內(nèi)白細胞數(shù)。

4.計算白細胞/L=W/4(變?yōu)?.1u1)×10(變?yōu)?ul)×20(稀釋倍數(shù))×106(變?yōu)?L)=W×50×106

(w為四個角大方格白細胞數(shù)總和)5.正常值成人4~10×109/L兒童5~12×109/L新生兒15~20×109/L6.臨床意義第三節(jié)血液檢查

一、紅細胞及血紅蛋白測定的臨床意義血紅蛋白是紅細胞的主要成分,因此紅細胞數(shù)量和血紅蛋白濃度有密切關系。一般情況下,紅細胞增多和減少,血紅蛋白也發(fā)生相應變化,兩者的臨床意義基本相同,但是在貧血時,紅細胞和血紅蛋白濃度下降的程度可不一致。利用這一性質(zhì)可區(qū)別不同貧血的類型。

1.紅細胞及血紅蛋白的增多(1)相對增多:連續(xù)嘔吐、反復腹瀉、大量失水,使血漿濃縮。(2)絕對增多:多由于缺氧而致的紅細胞代償性增多,紅細胞增多的程度與缺氧的程度成正比,少數(shù)病例是造血系統(tǒng)疾病所致。

①生理性增多:胎兒、新生兒、高原居民、劇烈的體力勞動和體育活動、情緒激動時,紅細胞可一時性增多。②病理性增多:見于肺氣腫、肺原性心臟病及某些紫紺型先天性心臟病,如紫紺型四聯(lián)癥(法樂氏四聯(lián)癥)等嚴重的心肺疾患。此外,在真性紅細胞增多癥時,紅細胞增多可達7.0~10.0×1012/L,血紅蛋白增多達170~250g/L。2.紅細胞和血紅蛋白的減少(1)生理性貧血:見于妊娠的中后期。(2)病理性貧血;見于造血原料不足,如缺鐵性貧血;造血功能障礙,如再生障礙性貧血;破壞增加,如溶血性貧血;失血。二、紅細胞的形態(tài)改變正常的紅細胞經(jīng)瑞氏染色后,在血涂片上為淡紅色圓形無核細胞,中心著色較淡,周邊著色較深,直徑6~9um,平均7.2um。在各種貧血時由于不同原因,紅細胞可有不同形態(tài)的改變。借助于形態(tài)的觀察可診斷不同類型的貧血。

1.紅細胞大小不均凡直徑大于10um者稱為大細胞,大于15um者稱巨紅細胞,小于6um者稱小紅細胞。在缺鐵性貧血時,血片內(nèi)以小細胞為主;在巨幼紅細胞貧血時,片內(nèi)以大紅細胞及巨紅細胞為主,同一血片中紅細胞大小不均,差異顯著。2.紅細胞形態(tài)不整嚴重貧血,尤其是營養(yǎng)性巨幼紅細胞性貧血,紅細胞可呈梨形、新月形、啞鈴形、水滴狀等變異,稱異形紅細胞。3.紅細胞染色異常紅細胞內(nèi)血紅蛋白含量不足時,中心淺染區(qū)擴大,甚至呈中空現(xiàn)象,是低色素性貧血的表現(xiàn);如果紅細胞著色過深,中心淺染區(qū)縮小或消失,是高色素性貧血的特征;若紅細胞胞漿被染為灰藍色,稱為嗜多色性紅細胞,它是一種未成熟的紅細胞,它的增多表示骨髓造血功能活躍。

4.靶形紅細胞紅細胞中心深染,而其外圍為蒼白區(qū)域,紅細胞邊緣處又深染,形如射擊靶,稱為靶形紅細胞,常見于地中海貧血。5.嗜堿性點彩紅細胞(點彩紅細胞)在染色正?;蚴榷嗌约t細胞內(nèi)有大小不等、染色不定的深藍色顆粒者稱為點彩紅細胞。正常人血中極少見,占0.01%。鉛中毒病人此種細胞明顯增多。6.染色質(zhì)小體(Howell-Jolly小體)在紅細胞的胞漿中,出現(xiàn)一個或數(shù)個圓形紫紅色小體,大小約1~2um,稱染色質(zhì)小體,它是胞核的殘余物。見于溶血性貧血、巨幼紅細胞貧血、脾切除術后。

7.卡波環(huán)(cabot環(huán))為一細線狀環(huán),呈圓形成“8”字形紫紅色,位于紅細胞胞漿中。一般認為它是核膜殘余。見于惡性貧血、營養(yǎng)性巨幼紅細胞性貧血和溶血性貧血。8.有核紅細胞正常人血中都是成熟紅細胞,如血片中出現(xiàn)有核紅細胞,多表示紅細胞系統(tǒng)增生活躍。見于溶血性貧血、巨幼紅細胞性貧血、各種白血病,特別是紅白血病。在末成熟兒或新生兒的外周血液中也可見到少量有核紅細胞。三、白細胞測定的臨床意義白細胞總數(shù)高于正常參考值(成人10×109/L)時稱白細胞增多,低于正常參考值(成人4×109/L)時稱白細胞減少。白細胞總數(shù)的增減主要受中性粒細胞數(shù)量的影響,其次是嗜酸性粒細胞、淋巴細胞等數(shù)量的改變。1.中性粒細胞增減的臨床意義(1)中性粒細胞的增多;同時伴有白細胞總數(shù)的增多。A.生理性增多:妊娠末期及分娩時,劇烈運動后,飽餐或沫浴后,過度寒冷或勞動后等,中性粒細胞均可出現(xiàn)一時性增多,白細胞總數(shù)可達10~20×109/L或更多。B.病理性增多:①急性感染:特別是化膿菌(如金黃色顏萄球菌、溶血性鏈球菌、肺炎雙球菌等)感染時,白細胞總數(shù)可達20×109/L或更多。部分病例尚可出現(xiàn)較多的桿狀核、晚幼粒、中幼粒細胞,呈所謂類白血病反應。如肺炎、丹毒、闌尾炎、敗血癥、膿腫等。②中毒:如尿毒癥、糖尿病、酸中毒、急性鉛、汞中毒等。③惡性腫瘤及白血病:慢性粒細胞性白血病,各類惡性腫瘤,特別是消化道惡性腫瘤。④急性大出血,特別是內(nèi)出血時或急性溶血及手術后。⑤心肌梗塞和血管栓塞,腎移植術后的排異現(xiàn)象都可發(fā)生不同程度的中性粒細胞增多。(2)中性粒細胞的減少:①某些傳染病,如傷寒、副傷寒、布氏桿菌病、瘧疾、麻疹、流行性感冒等。②化學藥物中毒與放射線損傷;如X線和鐳照射、抗癌藥物、晚期或嚴重的砷、鉛、汞中毒等。③血液?。喝缭偕系K性貧血,④過敏性休克,高度惡病質(zhì)。⑤脾功能亢進和自身免疫性疾病。2.嗜酸性粒細胞增多和減少(1)嗜酸性粒細胞增多①過敏性疾?。喝缰夤芟?、食物過敏、過敏性肺炎、血管神經(jīng)性水腫等。②皮膚?。喝缗Fぐ_、濕疹、皰疹樣皮炎、霉菌性皮膚病。③寄生蟲?。喝玢^蟲病、蛔蟲病、絲蟲病、絳蟲病、血吸蟲病等。④某些血液病;如慢性粒細胞性白血病、淋巴網(wǎng)狀細胞肉瘤等。⑤其他:猩紅熱、潰瘍性結腸炎、傳染病的恢復期。(2)嗜酸性粒細胞的減少:多見于傷寒、副傷寒、以及應用腎上腺皮質(zhì)激素和促腎上腺皮質(zhì)激素后。3.嗜堿性粒細胞增多多見于慢性粒細胞性白血病及罕見的嗜堿性粒細胞性白血病,其次見于鉛、鉍、鋅中毒、轉移瘤患者。4.淋巴細胞的增多和減少(1)淋巴細胞增多:常見于中性粒細胞減少所致的相對增多,即每升血液中淋巴細胞濃度數(shù)并不增加,由于中性粒細胞顯著減少,使淋巴細胞分類計數(shù)的比值相對增高。淋巴細胞絕對增高指淋巴細胞的分類比值和每升血液中濃度數(shù)都增多??梢娪冢?/p>

①某些傳染?。喝绨偃湛?、結核病、水痘、麻疹、風疹、流行性腮腺炎、傳染性肝炎、傳染性單核細胞增多癥、傳染性淋巴細胞增多癥。②某些血液?。毫馨图毎园籽?。③腎移植術后排異前期及許多傳染病的恢復期。(2)淋巴細胞減少:多見于傳染病的急性期、放射病、細胞免疫缺陷病等。此外各種中性粒細胞增多癥時,淋巴細胞相對減少。5.單核細胞增多(1)某些細菌感染:如結核、傷寒、惡急性細菌性心內(nèi)膜炎等。(2)某些寄生蟲病:如瘧疾、黑熱病等。(3)單核細胞白血病、粒細胞缺乏癥恢復期。(4)許多急性傳染病的恢復期。六、中性粒細胞常見形態(tài)變化(一)核象變化正常人周圍血液的中性粒細胞分葉核占絕大多數(shù),以2~3葉為主,在病理狀態(tài)下,中性粒細胞可出現(xiàn)核左移或核右移現(xiàn)象。1.核左移周圍血液中出現(xiàn)不分葉核(包括桿狀核及晚幼粒、中幼?;蛟缬琢5龋┑陌俜直嚷试龈撸ǔ^5%)時,稱為核左移。常見于各種感染,特別是急性化膿性感染時。輕度核左移伴白細胞百分率增高者,表示感染較輕,說明病人的抵抗力在增強;明顯核左移伴白細胞總數(shù)及中性粒細胞比值增高者,表示感染嚴重;顯著核左移但白細胞總數(shù)不高甚至降低音,說明感染極為嚴重,在白血病或類白血病反應,也可出現(xiàn)極度左移現(xiàn)象?!駰U狀核以前的幼稚細胞增多>5%為核左移?!窈俗笠泼黠@提示感染。2.核右移周圍血液中若中性粒細胞出現(xiàn)5葉或更多分葉,其比值超過3%者,稱為核右移。此時常伴有白細胞總數(shù)減少??捎捎谌狈υ煅镔|(zhì)或骨髓造血功能減退所致,主要見于營養(yǎng)性巨幼紅細胞性貧血、惡性貧血時,但在其他疾病的病情進展過程中,如突然出現(xiàn)核右移,常表示預后不良;而在炎癥的恢復期中,一過性地出現(xiàn)核右移是正?,F(xiàn)象。此外,在應用抗代謝藥如阿糖胞苷或6-巰基嘌呤等之后,也可出現(xiàn)核右移現(xiàn)象?!裰行粤<毎霈F(xiàn)5葉以上超過3%為核右移。●核右移說明造血物質(zhì)缺乏或造血功能減退。(二)中性粒細胞的毒性變化中性粒細胞在理化及生物學等致病因索下,可出現(xiàn)下列形態(tài)學改變。1.大小不均見于病情較長的化膿性炎癥或慢性感染時。2.中毒顆粒胞漿中出現(xiàn)粗大的分布不均勻的黑藍色顆粒,是一種變性顆粒,見于較嚴重的感染及大面積燒傷等。3.空泡胞漿內(nèi)出現(xiàn)一個或數(shù)個空泡,是胞漿脂肪變性所致,最常見于嚴重感染,特別是敗血癥。4.杜勒(Dohle)體中性粒細胞嚴重毒性變時,胞漿中呈圓形、梨形或云霧狀直徑1~2um、深藍色或灰藍色的嗜堿性區(qū)域。5.核變性細胞核可發(fā)生深藍色塊狀凝固或出現(xiàn)細胞核膨脹著色淺淡的溶解現(xiàn)象,常伴有輪廓不清的核破碎現(xiàn)象。見于嚴重感染。

●中性粒細胞出現(xiàn)中毒性顆粒、空泡、杜勒體、核變性為嚴重感染的跡象。(三)棒狀小體(Auer)為紅色細桿狀物質(zhì),一個或數(shù)個,長約1~6um,內(nèi)含酸性磷酸酶及過氧化酶。此種棒狀小體存在于原始粒細胞、早幼粒細胞及原始單核細胞胞漿中。對鑒別急性白血病的類型有重要價值,在急性淋巴細胞白血病時,不見此小體,在急性粒細胞性和急性單核細胞性白血病則可見到?!癜魻钚◇w見于急粒、急單,而急淋則不見。四、淋巴細胞的形態(tài)變化部分病毒感染性疾病病人的血液中,淋巴細胞發(fā)生空泡、不規(guī)則、幼稚細胞型變化,稱為異型淋巴細胞。常見于傳染性單核細胞增多癥、風疹、病毒性肺炎等病人的血片中。異型淋巴細胞分三型:(一)Ⅰ型(空泡型)此型較常見,似淋巴細胞大小,也可稍大,圓或卵圓形。核略變異,但屬淋巴結構。胞漿較多,染深藍色,無顆粒,呈含小空泡的泡沫樣。(二)Ⅱ型(不規(guī)則型)細胞較Ⅰ型大,核型不規(guī)則,染色質(zhì)比Ⅰ型疏松,仍粗糙。胞漿量多,染均勻淺藍或灰藍色,有透明感,邊緣較深,無空泡,偶見少數(shù)紫紅色顆粒。(三)Ⅲ型(幼稚型)細胞較大,直徑18um。核大,較規(guī)則,染色質(zhì)細致均勻,似幼稚細胞,能見核仁者,稱原始型。胞漿豐富,染藍色或深藍色,一般無顆粒,偶有小空泡?!癞愋土馨图毎譃榭张菪?、不規(guī)則型、幼稚型第四節(jié)骨髓片觀察一、目的和要求學會觀察骨髓片,并熟悉血細胞形態(tài)發(fā)生的共同變化規(guī)律。二、內(nèi)容(一)紅細胞發(fā)生紅細胞發(fā)生起始于紅系祖細胞,經(jīng)原紅細胞、早幼紅細胞、中幼紅細胞、晚幼紅細胞,后者脫去細胞核成為網(wǎng)織紅細胞,最終為成熟紅細胞。紅細胞發(fā)生過程中,其形態(tài)變化特點:胞體由大→??;核由大→小→丟失;染色質(zhì)由細疏→粗密;胞質(zhì)由墨水藍→淡藍→紅藍相間→紅色。1.原紅細胞:胞體大,核大,染色質(zhì)呈細顆粒狀,有2~3個核仁,胞質(zhì)嗜堿性強,呈墨水藍。2.早幼紅細胞:胞體較大,核較大,染色質(zhì)呈粗粒狀,偶見核仁,胞質(zhì)嗜堿性較強,呈墨水藍。3.中幼紅細胞:胞體較小,核較小,染色質(zhì)呈粗塊狀,核仁消失,胞質(zhì)嗜堿性減弱,呈紅藍相間色。4.晚幼紅細胞:胞體小,核更小,染色質(zhì)呈致密塊狀,核仁消失,胞質(zhì)呈紅色。(二)粒細胞發(fā)生粒細胞發(fā)生起始于粒一巨噬細胞祖細胞,經(jīng)原粒細胞、早幼粒細胞、中幼粒細跑、晚幼粒細胞,進而分化成熟的粒細胞入血。其形態(tài)變化為:胞體由大→??;核由大→小,其形態(tài)由圓形→卵圓形→腎形→分葉;染色質(zhì)由細疏→粗密;胞質(zhì)嗜堿性由強→弱,并產(chǎn)生特殊顆粒,顆粒數(shù)量逐步增多。1.原粒細胞:胞體較大,核大,呈圓形,染色質(zhì)呈細網(wǎng)狀,可見2~6個核仁,胞質(zhì)嗜堿性強,呈天藍色,無顆粒。2.早幼粒細胞:胞體大,核呈卵圓形,染色質(zhì)粗網(wǎng)狀,偶見核仁,跑質(zhì)嗜堿性減弱,呈淡藍色,內(nèi)有大量嗜天青顆粒及少量特殊顆粒。

3.中幼粒細胞:胞體較小,核呈半圓形,染色質(zhì)呈塊狀,核仁消失,胞質(zhì)嗜堿性弱,呈淺藍色,有少量嗜天青顆粒,特殊顆粒增多。4.晚幼粒細胞:胞體小,核呈腎形,染色質(zhì)呈塊狀,核仁消失,胞質(zhì)嗜堿性極弱,呈淺紅,有少量嗜天青顆粒及大量特殊顆粒。5.桿狀核粒細胞:胞體小,核呈桿狀,染色質(zhì)粗塊狀,核仁消失,胞質(zhì)嗜堿性消失,呈淡紅色,含少量嗜天青顆粒和大量特殊顆粒。(三)血小板發(fā)生巨核細胞的胞質(zhì)脫落形成血小板。巨核細胞胞體大而不規(guī)則,胞質(zhì)弱嗜酸性,含豐富的血小板顆粒。核呈分葉狀,染色質(zhì)排列密集,著色深。

三、作業(yè)繪制各級原始紅細胞圖。四、思考題1.總結血細胞發(fā)生的共同變化規(guī)律。2.簡述紅細胞發(fā)生各階段形態(tài)特征?!?、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)(一)原理間織紅細胞(reticulocyte,Ret)是未完全成熟的紅細胞,胞漿中含有核糖體(嗜堿性物質(zhì)),經(jīng)煌焦油藍活體染色呈淺藍色或深藍色網(wǎng)狀結構,稱網(wǎng)織紅細胞。(二)方法在載玻片一端,加10g/L煌焦油藍酒精溶液一滴,任其自然干燥備用。加末梢血一滴于已干燥染料上,用推片角攪動混勻后,將兩玻片蓋合,待3~5min后,推制血片。干燥后用油鏡計數(shù)1000個紅細胞中網(wǎng)織紅細胞數(shù),最后按百分率報告。第五節(jié)貧血的一般檢查(三)正常值正常成人網(wǎng)織紅細胞0.5%~1.5%,新生兒3%~6%。(四)臨床意義網(wǎng)織紅細胞增多,表示骨髓紅細胞生成旺盛,常見于溶血性貧血(可達70%),其次為急性失血性貧血。營養(yǎng)性巨幼紅細胞性貧血、缺鐵性貧血和巨幼紅細胞性貧血治療有效時,網(wǎng)織紅細胞迅速增多,一周左右達最高峰,其后即降至正?;蛟龈?。網(wǎng)織紅細胞的減少表示造血功能低下,主要見于再生障礙性貧血。但某些慢性再生障礙性貧血的病人,其網(wǎng)織紅細胞數(shù)可正?;蚵栽觯ㄒ蚬撬柚猩杏写鷥斝栽煅獚u),但給予各種抗貧血藥物后卻不見增長,說明其造血功能低下。二、紅細胞比積測定(一)原理紅細胞比積(hematocrite,Ht)測定是特定量的抗凝血,用一定速度和時間離心沉淀,即得沉積紅細胞和血漿的比例,從而得知每升血中紅細胞所占體積的百分率。正常值:●男42%~49%,●女37%~43%。臨床意義:●增高見于:脫水、大面積燒傷病人,●減少見于:各種貧血。(二)方法1.靜脈采血2m1,注入含干燥EDTA-Na2,2mg的抗凝瓶中,立即混勻。2.用細長毛細管吸取混勻抗凝血,插入溫氏管底部,然后將血液緩慢注入至刻度“10”處,注意防止氣泡產(chǎn)生。3.用水平離心機以3000r/min離心30min,讀取紅細胞層的柱高。(三)正常值男42%~49%女37%~43%(四)臨床意義1.各種貧血時,紅細胞比積隨紅細胞的減少而降低,但因紅細胞大小不同,二者下降程度不一定平行,臨床上常用于計算紅細胞的平均值,有助于貧血的鑒別和分類。2.大面積燒傷、自身輸血、體外循環(huán)和脫水病人等,紅細胞比積增加。3.臨床上常用于脫水和燒傷病人的補液依據(jù),是掌握血液稀釋程度的可靠標準。三、紅細胞平均值根據(jù)紅細胞數(shù),血紅蛋白濃度和紅細胞比積,計算紅細胞平均血紅蛋白量、紅細胞平均體積、紅細胞平均血紅蛋白濃度,作貧血的形態(tài)學分類。(一)紅細胞子均血紅蛋白量(meancorpuscularhemoalobin,MCH)紅細胞平均血紅蛋白量,即每個紅細胞內(nèi)所含血紅蛋白的平均量,以皮克(pg)為單位(1pg=10-12g)。正常值27~31pgh(二)紅細胞平均容量(meancorpascularvolume.MCV)紅細胞平均容量就是每個紅細胞的平均體積,以飛升為單位(1L=1015f1)。正常值82~92f1。(三)紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)紅細胞平均血紅蛋白濃度指平均每升紅細胞中所含血蛋白濃度。正常值320~3608/L。(四)臨床意義貧血的形態(tài)分類四、紅細胞脆性試驗(erythrocytefragilitytest,EFT)(一)原理紅細胞脆性試驗可測定紅細胞膜有無異常,將紅細胞懸浮于不同濃度的氯化鈉溶液中,等滲溶液中紅細胞無變化,低滲溶液中,則發(fā)生膨脹直至破裂溶血,故可觀察紅細胞膜的最小抵抗力(開始溶血)和最大抵抗力(完全溶血),以了解其滲透脆性。(二)正常值開始溶血4.6~3.8g/L完全溶血3.6~2.8g/L

(三)臨床意義紅細胞滲透脆性增加見于先天性球形紅細胞增多癥,由于球形紅細胞的面積儲備減少,少量水進入即可溶血,于6.8g/L氯化鈉溶液時開始溶血,于4.0g/L氯化鈉溶液時完全溶血。此外其它先天性和后天性溶血性貧血時,脆性亦增加。

五、酸溶血試驗(Hame試驗)(一)原理正常人紅細胞在其自身新鮮血中(內(nèi)含補體及裂解素等),在弱酸性(pH6.6~5.8)條件下孵育一小時,不發(fā)生溶血現(xiàn)象。如被檢者的紅細胞膜有異常,對補體的溶血效應敏感,則可呈溶血現(xiàn)象。(二)臨床意義正常人本試驗為陰性,陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥常呈陽性。先天性球形紅細胞增多癥亦可陽性。其與陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥的區(qū)別在于加熱破壞溶解了補體的血清,作試驗時前者仍為陽性,后者為陰性。

一、增生性貧血由骨髓以外的病因?qū)е碌呢氀?。周圍血象雖見紅細胞及血紅蛋白減少,但骨髓象中則見紅細胞系呈代償性增生。增生性貧血包括缺鐵性貧血、溶血性貧血及急性失血性貧血,它們的血液學特點如下:第六節(jié)病理血涂片(一)缺鐵性貧血1.血象小細胞低色素性貧血,紅細胞大小不等,多數(shù)較小,中心淡染區(qū)擴大,嚴重者甚至成環(huán)形,嗜多色性紅細胞和點彩紅細胞均多,網(wǎng)織紅細胞數(shù)增多或正常。2.骨髓象增生活躍或明顯活躍,紅細胞系增生更明顯,各階段紅細胞均增多,中、晚幼紅細胞較多,以晚幼紅為主。幼紅細胞體積小,核形較小,染色質(zhì)致密深染。胞漿量少,邊緣不整齊,有血紅蛋白形成緩慢相不足現(xiàn)象。粒、紅比值減低。骨髓鐵染色,細胞外鐵陰性,細胞內(nèi)鐵明顯減少或僅微量。

●各階段紅細胞均增多,中、晚幼紅細胞較多,以晚幼紅細胞為主。(二)溶血性貧血1.血象為正常細胞性貧血。網(wǎng)織紅細胞、嗜多色性紅細胞明顯增多見有核細胞。2.骨髓象有核細胞增生明顯活躍,紅細胞系增生顯著均增多,以中幼紅細胞增多明顯。粒、紅比值顯著降低。(三)急性失血性貧血1.血象為正常細胞性貧血,網(wǎng)織紅細胞增多,出現(xiàn)有核紅細胞。2.骨髓象增生活躍,以紅細胞系明顯,貧血明顯時,中幼紅細胞增多,其他無大變化。二、增生不良性貧血系由于骨髓病變導致造血功能低下所致的貧血,即原發(fā)性和繼發(fā)性的再生障礙性貧血。(一)急性再生障礙性貧血1.血象全血細胞減少,粒、紅細胞和血小板減少的程度可先后不同,網(wǎng)織紅細胞減少。2.骨髓象增生成低或極度減低,粒、紅、巨核細胞三系統(tǒng)減少,中以晚幼紅多見,粒細胞以成熟的粒細胞最多見,巨核細腔消失或偶見。淋巴細胞相對增多。漿細胞、組織嗜堿細胞、網(wǎng)狀細胞等相對增多。(二)慢性型再生障礙性貧血1.血象與急性型相似,但不如急性型顯著。2.骨髓象增生減低,但因有灶性造血,有時也可見到骨髓增生活躍、甚至明顯活躍。但巨核細胞減少,非造血細胞增多,成熟的紅細胞形態(tài)極度異常。三、巨幼紅細胞性貧血由于葉酸和維生素B12缺乏引起的貧血,出現(xiàn)巨幼紅細胞為特點的一組貧血。包括惡性貧血、營養(yǎng)不良性巨幼紅細胞性貧血,以及由于妊娠、胃癌、胃切除或小腸吸收不良等而致的巨幼紅細胞貧血。1.血象為大細胞性貧血,紅細胞大小不均,但多數(shù)較大,并有異形紅細胞,染色質(zhì)小體等,偶見晚巨幼紅細胞,網(wǎng)織紅細胞正?;蛏愿摺?.骨髓象增生明顯活躍,粒紅比值低于正常,出現(xiàn)各期的巨幼紅細胞,并可見多核的巨幼紅細胞。成熟的紅細胞可見多量點彩紅細胞、嗜多色性紅細胞、異形紅細胞及染色質(zhì)小體等。粒系相對減少,可見各階段的巨型粗細胞,巨核細胞系亦可出現(xiàn)分葉過多和巨大等巨幼變化。

●出現(xiàn)各期的巨幼紅細胞,并可見多核巨幼紅細胞。

四、白血病是血細胞呈惡性增生的一類疾病,根據(jù)臨床過程及血細胞的形態(tài)特點,白血病可分急性和慢性兩類。(一)急性白血病常見的急性白血病有粒細胞性、淋巴細胞性和單核細胞性等,它們的血液學改變有共同的特點。1.血象白細胞數(shù)一般為輕度增加,個別亦可達100×109/L以上,但也有正?;驕p少者;白細胞增多時,其血象變化與骨髓相似,以相應的原始細胞及早期幼稚細胞為主;白細胞正常或減少時,相應的原始細胞或早期的幼稚細胞較少,淋巴細胞相對增多。紅細胞及血小板致皆顯著減少。2.骨髓象增生明顯活躍或極度活躍,相應的白細胞系高度增生,以原始及幼稚細胞為主。如急性粒細胞白血病以原粒及早幼粒細胞為主;如以異形早幼粒細胞為主,則稱急性早幼粒細胞白血病;急性淋巴細胞白血病以原淋及幼淋巴細胞為主;急性單核細胞白血病以原單及幼單核細胞為主。紅細胞系明顯減少,紅白血病時則增多。巨核細胞系顯著城少。

●相應的白細胞系的細胞高度增生,以原始和幼稚細胞為主。

(二)慢性粒細胞白血病1.血象

白細胞數(shù)明顯增高,多在200×109/L,少數(shù)可達1000×109/L,粒細胞占絕對優(yōu)勢,以成熟型和接近成熟型為主,出現(xiàn)原始及早幼粒細胞,二者比值之和低于10%。嗜酸性及嗜堿性粒細胞明顯增多,部分病人血小板增多。紅細胞及淋巴細胞減少。2.骨髓象與血象大致相似。但分類比外周血象左移程度更顯著。粒細胞系極度增生。紅細胞系嚴重受抑制。原粒及早幼粒一般不超過10%,嗜堿和嗜酸細胞增多,巨核細胞增多。

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