新檢測系統(tǒng)性能驗(yàn)證程序

./檢測系統(tǒng)方法學(xué)驗(yàn)證程序原則所有檢驗(yàn)系統(tǒng)在正式投入患者樣本檢測之前,應(yīng)確定其方法學(xué)性能,驗(yàn)證檢測系統(tǒng)滿足實(shí)驗(yàn)室對該項(xiàng)目的性能要求,適合預(yù)期用途。實(shí)驗(yàn)室必須驗(yàn)證或建立每一試驗(yàn)項(xiàng)目的分析準(zhǔn)確度、不精密度、分析靈敏度、分析特異性〔干擾和可報(bào)告范圍。實(shí)驗(yàn)室可以使用廠家信息、出版的資料或其他實(shí)驗(yàn)室的研究結(jié)果,適用時(shí),實(shí)驗(yàn)室需驗(yàn)證外部的信息。美國食品藥品監(jiān)督管理局〔FDA批準(zhǔn)的未經(jīng)任何改動(dòng)的檢測系統(tǒng),可以通過驗(yàn)證程序確認(rèn)其方法學(xué)性能；美國食品藥品監(jiān)督管理局〔FDA批準(zhǔn)的但有所改動(dòng)的檢測系統(tǒng),必須全面評價(jià)和建立其方法學(xué)性能。某一暫停試驗(yàn)重新應(yīng)用,重新開始患者樣本檢測前30天內(nèi)進(jìn)行方法學(xué)性能驗(yàn)證。方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)方法投入使用前,應(yīng)驗(yàn)證的方法學(xué)性能指標(biāo)包括：精密度、準(zhǔn)確度、分析靈敏度、分析特異性<干擾>、分析檢測范圍<AMR>、可報(bào)告范圍。實(shí)驗(yàn)室對于所開展的每一檢測項(xiàng)目和樣本來源,應(yīng)建立或驗(yàn)證所服務(wù)人群的參考區(qū)間。對于帶有自動(dòng)移液系統(tǒng)的儀器設(shè)備,在投入使用前或大的維護(hù)保養(yǎng)及移液系統(tǒng)維修后應(yīng)進(jìn)行攜帶污染的評估實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)明確規(guī)定進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn),明確規(guī)定在什么情況下需要進(jìn)行相關(guān)的方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。方法學(xué)驗(yàn)證參考方案準(zhǔn)確度與決定性或參考方法檢測結(jié)果進(jìn)行比較而建立；檢測參考物質(zhì)；與已建立可比性的方法進(jìn)行結(jié)果比較而驗(yàn)證；其他已知濃度或活性的物質(zhì)。精密度可重復(fù)檢測不同濃度或活性水平的患者樣本進(jìn)行批內(nèi)精密度驗(yàn)證；使用室內(nèi)質(zhì)控統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果進(jìn)行一段時(shí)間內(nèi)的批間精密度的驗(yàn)證?？蓞⒄誄LSIEP5進(jìn)行定量檢測項(xiàng)目精密度的評價(jià)。分析靈敏度適用時(shí),實(shí)驗(yàn)室應(yīng)驗(yàn)證或建立試驗(yàn)項(xiàng)目的分析靈敏度〔最低檢測限。FDA批準(zhǔn)的項(xiàng)目,可以采用廠家數(shù)據(jù)或出版的文獻(xiàn)資料。分析干擾：可以引用廠家或外部的研究資料。分析檢測范圍可使用校準(zhǔn)驗(yàn)證/線性驗(yàn)證物質(zhì)：CAP或衛(wèi)生部臨檢中心提供的校準(zhǔn)驗(yàn)證/線性驗(yàn)證物質(zhì)?？墒褂贸^線性范圍上限10%~15%的高值患者血清或校準(zhǔn)品?？蓤?bào)告范圍樣本的濃度超過項(xiàng)目的分析檢測范圍時(shí),必要時(shí)實(shí)驗(yàn)室將樣本稀釋后重新檢測,再乘以稀釋倍數(shù),得出相應(yīng)樣本的結(jié)果進(jìn)行報(bào)告。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)進(jìn)行樣本的最大稀釋度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),以保證稀釋后的樣本檢測結(jié)果的誤差在可接受范圍內(nèi)?？蛇x擇在分析測量范圍上限附近的患者樣本,使用廠家推薦的稀釋液或注射用生理鹽水稀釋患者樣本。攜帶污染：可選用低值和高值患者樣本進(jìn)行攜帶污染的評估。參考區(qū)間：參照CLSIC28建立或驗(yàn)證所服務(wù)人群的參考區(qū)間。各專業(yè)組可根據(jù)試驗(yàn)項(xiàng)目的特點(diǎn),參照廠家的建議,確定所需要進(jìn)行的方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),完善方法學(xué)驗(yàn)證程序?；贑LSI批準(zhǔn)指南的定量檢測項(xiàng)目的方法學(xué)驗(yàn)證程序見附件。方法學(xué)性能驗(yàn)證報(bào)告封面的書寫儀器相關(guān)方法學(xué)性能驗(yàn)證報(bào)告封面按照以下格式書寫XXX醫(yī)院XXX分析儀方法學(xué)性能驗(yàn)證報(bào)告科室名稱：儀器設(shè)備名稱：廠家和型號：機(jī)身編號：報(bào)告日期：儀器無關(guān)檢測系統(tǒng)封面按照以下格式書寫：XXX醫(yī)院XXX項(xiàng)目方法學(xué)性能驗(yàn)證報(bào)告科別：報(bào)告日期：方法學(xué)性能驗(yàn)證報(bào)告應(yīng)包括以下內(nèi)容：目錄方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果匯總每一性能指標(biāo)驗(yàn)證報(bào)告應(yīng)包括以下內(nèi)容：1項(xiàng)目名稱2分析檢測系統(tǒng)描述3相關(guān)性能驗(yàn)證方案4相關(guān)性能驗(yàn)證報(bào)告原始數(shù)據(jù)可以根據(jù)具體情況調(diào)整方法學(xué)性能驗(yàn)證報(bào)告內(nèi)容的編排。每一性能報(bào)告都需經(jīng)專業(yè)負(fù)責(zé)人審核、簽字。主任審批方法學(xué)性能驗(yàn)證報(bào)告并簽字。方法學(xué)性能驗(yàn)證報(bào)告應(yīng)歸檔保存,保存至分析檢測系統(tǒng)停用后2年。附件1定量測量方法的精密度評價(jià)程序目的實(shí)驗(yàn)室檢測患者樣本時(shí),對每份樣本只做一次檢驗(yàn)即發(fā)出報(bào)告。要保證檢驗(yàn)結(jié)果具有重現(xiàn)性,檢測系統(tǒng)必須有良好的精密度。精密度評價(jià)實(shí)驗(yàn)的目的是評價(jià)設(shè)備的總精密度,也就是這個(gè)設(shè)備在一個(gè)不定的時(shí)間內(nèi)的變異性。范圍該程序適用于定量測量方法及儀器的精密度性能的評價(jià)。它包括對于新開發(fā)檢測方法或儀器精密度的評價(jià)方法,以及建立自己所用檢測方法的精密度性能的方法。這些程序可能不適用于一些缺乏足夠檢測物質(zhì)的定量測量方法。職責(zé)科主任負(fù)責(zé)檢測系統(tǒng)精密度性能評價(jià)方法及結(jié)果的審批；由相應(yīng)專業(yè)組組長或其授權(quán)人完成相關(guān)的實(shí)驗(yàn)操作及結(jié)果評價(jià)；質(zhì)量小組成員協(xié)助完成。原則足夠的時(shí)間熟悉儀器操作和維護(hù)保養(yǎng)的程序；足夠的時(shí)間熟悉評價(jià)方案的步驟；整個(gè)評價(jià)期間需對儀器進(jìn)行保養(yǎng),并要有適當(dāng)?shù)馁|(zhì)量控制；應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)臉悠愤M(jìn)行適當(dāng)長時(shí)間的實(shí)驗(yàn),以得到足夠的數(shù)據(jù),來反應(yīng)儀器在日常工作中長期真實(shí)的性能。材料試劑與校準(zhǔn)品：整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)使用單一批號的試劑與校準(zhǔn)品。樣本：可以使用穩(wěn)定的、可通過商業(yè)獲得的、基于蛋白質(zhì)的物質(zhì)〔如：廠家提供的蛋白質(zhì)基質(zhì)的2個(gè)水平的質(zhì)控品。方法熟悉儀器性能：包括儀器日常使用的各個(gè)方面：原理、安裝、操作、保養(yǎng)、故障處理等。熟悉評價(jià)方法持續(xù)時(shí)間：評價(jià)方案熟悉期應(yīng)持續(xù)至獲得數(shù)據(jù)無操作困難后至少5個(gè)操作日。復(fù)雜設(shè)備如必要可適當(dāng)延長時(shí)間。數(shù)據(jù)的使用在這5天內(nèi)〔或更長時(shí)間內(nèi)操作無困難的情況下收集的數(shù)據(jù),可與執(zhí)行方案時(shí)收集的數(shù)據(jù)合并使用。所有數(shù)據(jù)應(yīng)符合下述質(zhì)量控制可接受性檢查。質(zhì)量控制程序本期應(yīng)對設(shè)備進(jìn)行常規(guī)質(zhì)量控制。本期數(shù)據(jù)收集完成后應(yīng)計(jì)算試用質(zhì)控限,并應(yīng)滿足質(zhì)控品檢測的要求或生產(chǎn)商對設(shè)備的性能要求。若不滿足,應(yīng)在進(jìn)行隨后的實(shí)驗(yàn)之前與制造商取得聯(lián)系進(jìn)行系統(tǒng)的調(diào)試。附加評價(jià)本期可對設(shè)備的線性、準(zhǔn)確度<回收率>等其他性能進(jìn)行測試,以便發(fā)現(xiàn)設(shè)備是否存在其他嚴(yán)重的問題。若有問題,應(yīng)聯(lián)系廠商查找原因并解決。初步的精密度評價(jià)在本期結(jié)束或即將結(jié)束時(shí),進(jìn)行一次初步的重復(fù)性評價(jià)。將一種適當(dāng)?shù)臋z測物質(zhì)分為20份同批連續(xù)測定〔或小于20的一個(gè)完整批,計(jì)算SD和CV。推薦使用兩個(gè)或更多的濃度水平。如果與預(yù)期的結(jié)果比較有顯著性差異,則需與制造商取得聯(lián)系,同時(shí)終止后續(xù)實(shí)驗(yàn)直至問題得到解決。精密度評價(jià)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)批次和天數(shù)每日分析兩個(gè)批次,每批至少間隔兩小時(shí)。在每個(gè)批次,應(yīng)進(jìn)行常規(guī)質(zhì)控樣本檢測,用于驗(yàn)證該批次結(jié)果的可接受性。如果某一批因?yàn)橘|(zhì)控或操作困難而被拒絕,則需在找到并糾正引起問題的原因之后進(jìn)行更多一個(gè)批次。在每批內(nèi),應(yīng)檢測至少2個(gè)濃度水平的檢測物；所使用的每一濃度檢測物需分2份進(jìn)行分析。每批或每天應(yīng)改變檢測物質(zhì)及質(zhì)控樣本的分析順序。為了模擬真實(shí)的操作,可能的情況下,在每批實(shí)驗(yàn)中應(yīng)加入至少10個(gè)患者標(biāo)本。精密度實(shí)驗(yàn)需要充足的數(shù)據(jù),以便精密度評價(jià)能恰當(dāng)?shù)姆磻?yīng)設(shè)備的真實(shí)精密度。為了獲得這樣的結(jié)果,精密度評價(jià)實(shí)驗(yàn)至少需要20個(gè)可接受的操作日。記錄數(shù)據(jù)附錄A包含了總結(jié)數(shù)據(jù)用的數(shù)據(jù)記錄表格。不同濃度水平的樣本數(shù)據(jù)應(yīng)分別填在不同的記錄表格中。質(zhì)量控制程序.1在精密度評價(jià)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)執(zhí)行正常的質(zhì)控程序。.2統(tǒng)計(jì)質(zhì)控圖根據(jù)通常的慣例通過這些最初的數(shù)據(jù)計(jì)算中線、警告限及失控限。在質(zhì)控圖上繪出隨后所有的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)。若有任何一點(diǎn)失控,應(yīng)確定原因,清除該點(diǎn),并重做該批。建議：由于初步的估計(jì)具有較低的統(tǒng)計(jì)效能,需使用±3SDs作為警告限,使用±4SDs作為失控限。每收集5天的數(shù)據(jù)后,重新計(jì)算每一張圖所有可接受數(shù)據(jù)的中心線和控制限。如果以前可接受的結(jié)果現(xiàn)在不可接受了,則繼續(xù)進(jìn)行精密度實(shí)驗(yàn)直至獲得合適的天數(shù)。保留舍棄批的數(shù)據(jù)記錄。離群值檢測如果重復(fù)測定的絕對差值超出了5.5倍初步精密度評價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)差,該組數(shù)據(jù)應(yīng)被拒絕。如果發(fā)現(xiàn)離群值,應(yīng)查找問題的原因,并重復(fù)該批次檢測。注：如果初步精密度評價(jià)的樣本濃度與該評價(jià)實(shí)驗(yàn)相對接近,則應(yīng)使用本檢驗(yàn)。精密度的統(tǒng)計(jì)計(jì)算重復(fù)性評價(jià)計(jì)算公式：其中：I：總的天數(shù)〔通常為20；j：每日的批次〔1或者2Xij1：第i日第j批第1次的結(jié)果；Xij2：第i日第j批第2次的結(jié)果在使用上述公式時(shí),每日每一批次都需要兩個(gè)結(jié)果。室內(nèi)精密度評價(jià)要決定一臺儀器或?qū)嶒?yàn)室內(nèi)的精密度性能,這需要很多的量,需要以下計(jì)算：其中：I＝總的天數(shù)〔有兩個(gè)批次；Xi1。＝第i日第1批結(jié)果的均值Xi2。＝第i日第2批結(jié)果的均值A(chǔ)的計(jì)算是用所有天數(shù)的第一批分析均值與第二批分析均值差的平方和除以2I再開平方得到的。該公式不適用于某一日僅有一個(gè)批次的數(shù)據(jù)的計(jì)算。第二個(gè)量是：其中：I＝總的天數(shù)；Xi..＝第i日所有結(jié)果的均值；X… ＝所有結(jié)果的均值這是日均標(biāo)準(zhǔn)差,可用附錄A中的數(shù)據(jù)表3確定。隨后需要計(jì)算下面的值其中：Sdd＝日間標(biāo)準(zhǔn)差的評價(jià)其中：Srr＝批間標(biāo)準(zhǔn)差的評價(jià)〔如為負(fù)數(shù)則定為0將負(fù)值調(diào)為0是統(tǒng)計(jì)學(xué)上常用的轉(zhuǎn)換。如果通過軟件完成這些計(jì)算,就可確保完成上述轉(zhuǎn)換。室內(nèi)精密度的評價(jià)需按如下公式計(jì)算：通過該公式將會(huì)獲得與通過所有觀測值所計(jì)算的標(biāo)準(zhǔn)差不同的ST。與制造商的性能要求或其他性能標(biāo)準(zhǔn)的比較重復(fù)性比較性能要求的標(biāo)準(zhǔn)差用σ2r表示?？ǚ綑z驗(yàn)使用用戶及制造商重復(fù)性評價(jià)值的平方。該檢驗(yàn)包括如下計(jì)算：其中：S2r表示用戶重復(fù)性變異的平方；σ2r表示制造商重復(fù)性變異要求的平方；R表示總的批數(shù)〔S2r的自由度所計(jì)算的χ2應(yīng)與卡方值表中自由度為R的95%上限臨界值〔見表1相比較。如果計(jì)算值小于表中數(shù)值,則評價(jià)參數(shù)和性能要求無顯著性差異,該部分的精密度聲明是可接受的。注：該評價(jià)值可能大于制造商的性能要求,但仍然無顯著性差異。表1.卡方界值表dfofUserVarianceEstimate95%CriticalValue99%CriticalValue511.11.51612.616.8714.118.5815.520.1916.921.71018.323.21119.724.71221.026.21322.427.71423.729.11525.030.61626.332.01727.633.41828.934.81930.136.22031.437.62537.744.33043.850.93549.857.34055.863.75067.576.26079.088.47090.5100.47596.2106.479100.7111.180101.9112.390113.1124.1100124.3135.6精密度評價(jià)的比較下面為用于計(jì)算ST的自由度的公式：ME＝S2r〔批內(nèi)或重復(fù)性變異的均方MR＝2A2〔批均方MD＝4B2〔日均方公式中：取與計(jì)算值最接近的整數(shù)作為ST的自由度。使用該數(shù)值,適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)計(jì)算如下：其中：為用戶室內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差的平方；為制造商聲明的儀器標(biāo)準(zhǔn)差的平方,或者醫(yī)學(xué)決定的標(biāo)準(zhǔn)差的平方；T為ST的自由度。如果計(jì)算的值小于95％的值上限,精密度性能被認(rèn)為是可接受的。如果計(jì)算的值大于95％的值上限,精密度性能不在制造商的性能要求范圍內(nèi),或者不在醫(yī)學(xué)應(yīng)用可接受的范圍內(nèi)。用戶的評價(jià)值大于制造商聲明的性能要求,仍然是可以被接受的。由于用戶的實(shí)驗(yàn)是基于有限的觀測值,圍繞真實(shí)值的計(jì)算量Sr和ST存在預(yù)期的抽樣誤差。用戶實(shí)驗(yàn)的觀測值越多,計(jì)算量越接近真值?？ǚ綑z驗(yàn)就是用來檢測用戶的評價(jià)值是否明顯大于制造商所提供的值。參考文獻(xiàn)7.1TholenDW,KallnerA,KennedyJW,EvaluationofPrecisionPerformanceofQuantitativeMeasurementMethods;ApprovedGuideline—SecondEdition,EP5-A2,24<25>.附錄A.樣本數(shù)據(jù)記錄表數(shù)據(jù)表1：精密度性能評價(jià)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室名稱：記錄編號：濃度：操作者：分析物：試劑來源/批號：儀器名稱/型號：校準(zhǔn)物來源/批號：天數(shù)日期第一批第二批日均值結(jié)果1結(jié)果2均值結(jié)果1結(jié)果2均值1234567891011121314151617181920審核者：日期：附錄A.〔續(xù)數(shù)據(jù)表2：精密度性能評價(jià)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室名稱：記錄編號：濃度：操作者：分析物：試劑來源/批號：儀器名稱/型號：校準(zhǔn)物來源/批號：天數(shù)第一批第二批〔第一批均值－第二批均值2〔結(jié)果1－結(jié)果22〔結(jié)果1－結(jié)果221234567891011121314151617181920求和〔1〔2〔3審核者：日期：附錄A.〔續(xù)數(shù)據(jù)表3：精密度性能評價(jià)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室名稱：記錄編號：濃度：操作者：分析物：試劑來源/批號：儀器名稱/型號：校準(zhǔn)物來源/批號：節(jié)注：使用數(shù)據(jù)表2的結(jié)果〔1,〔2,〔3.1＝_______其中I為天數(shù).2＝_______來自數(shù)據(jù)表＃1.2.2＝_______T值的計(jì)算〔總體標(biāo)準(zhǔn)差的自由度=_________=_________〔最接近的整數(shù)審核者：日期：附錄A.〔續(xù)數(shù)據(jù)表4：與性能要求比較的精密度評價(jià)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室名稱：記錄編號：濃度：操作者：分析物：試劑來源/批號：儀器名稱/型號：校準(zhǔn)物來源/批號：重復(fù)性用戶的濃度水平用戶的標(biāo)準(zhǔn)差SD性能要求的濃度水平用戶的變異〔SD2自由度〔R性能要求的標(biāo)準(zhǔn)差SD性能要求的變異〔SD2〔I〔用戶的變異÷性能要求的變異·R〔II卡方值〔見表1不符合性能要求〔I>II符合性能要求〔I≤II儀器/方法的精密度用戶的濃度水平用戶的標(biāo)準(zhǔn)差性能要求的濃度水平用戶的變異〔SD2自由度〔R性能要求的標(biāo)準(zhǔn)差SD性能要求的變異〔SD2〔I〔用戶的變異÷性能要求的變異·R〔II卡方值〔見表1不符合性能要求〔I>II符合性能要求〔I≤II審核者：日期：附件2正確度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)程序目的方案一用于驗(yàn)證該方法正確度性能是否符合廠家聲明的正確度性能。方案二用于驗(yàn)證該方法與參考物質(zhì)比較的正確度或相對正確度能否滿足相應(yīng)的要求。范圍2.1本程序適用于檢驗(yàn)科測定分析檢測系統(tǒng)的正確度驗(yàn)證。2.2本程序已假定兩方法間偏倚很小且在不同濃度有相對一致的偏倚。職責(zé)科主任負(fù)責(zé)分析檢測系統(tǒng)正確性性能驗(yàn)證方法及結(jié)果的審批；該程序由相應(yīng)專業(yè)組組長或其授權(quán)人負(fù)責(zé)完成該程序相關(guān)的實(shí)驗(yàn)操作與結(jié)果評價(jià)；質(zhì)量小組成員負(fù)責(zé)協(xié)助完成。程序4.1方案一：用患者樣本進(jìn)行方法學(xué)比對材料與方法.1患者樣本收集：收集線性范圍內(nèi)20份患者樣本,其濃度應(yīng)分布整個(gè)線性范圍；不易得到的濃度,可將2份〔不超過2份病史相同、被測物濃度相近的樣本混合。儲(chǔ)存收集的樣本至足夠的樣本量,儲(chǔ)存時(shí)間盡可能短。.2比較檢測系統(tǒng)〔比較方法：最好使用廠家聲明的檢測系統(tǒng)；.3實(shí)驗(yàn)檢測系統(tǒng)〔實(shí)驗(yàn)方法：待驗(yàn)證的儀器廠家及型號+試劑廠家及批號+校準(zhǔn)品廠家及批號.4質(zhì)控品：至少2個(gè)或以上濃度水平的室內(nèi)質(zhì)控品。質(zhì)控品廠家、濃度水平及批號。驗(yàn)證程序.1儀器熟悉階段建議為5天,具體時(shí)間可視儀器復(fù)雜程度而定。此階段應(yīng)完成以下工作：1>操作者應(yīng)熟練掌握儀器的操作程、維護(hù)保養(yǎng)程序、樣本準(zhǔn)備方法、校準(zhǔn)與檢測程序。建立常規(guī)質(zhì)量控制程序。熟悉正確度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)程序。.2實(shí)驗(yàn)程序.2.1.2.1．按實(shí)驗(yàn)室常規(guī)操作程序,進(jìn)行項(xiàng)目定標(biāo),然后進(jìn)行常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控,確保質(zhì)控在控。建議室內(nèi)質(zhì)控在分析樣本同批內(nèi)進(jìn)行,質(zhì)控在控實(shí)驗(yàn)結(jié)果方為可接受。出現(xiàn)失控時(shí),應(yīng)查找原因,糾正后重新進(jìn)行樣本測定。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中,要確保有效的項(xiàng)目校準(zhǔn)及質(zhì)量控制。.2.2用實(shí)驗(yàn)方法與比對方法分別檢測收集的20份樣本。分4個(gè)連續(xù)的工作日進(jìn)行測定,每天測定5份,每份樣本重復(fù)測定2次。貯存樣本每日應(yīng)于復(fù)融后1到2小時(shí)內(nèi)檢測完畢。.2.3將測定結(jié)果記錄于"方法學(xué)比對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表"〔表1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與處理.3.1計(jì)算每個(gè)樣本兩方法間結(jié)果的差異Di：Di=<i–i>式中i:樣本數(shù)；：實(shí)驗(yàn)方法測定結(jié)果均值；：比較方法測定結(jié)果均值相對差異〔%Di=100%<i–i>/i.3.2繪制2張偏倚圖：1以Di對i作圖；2以%Di對i作圖；.3.3偏倚圖的檢查：視Di和%Di在檢測的分析濃度內(nèi)是否相對一致。1若一致,用平均差異和%與廠家聲明的性能指標(biāo)進(jìn)行比較。2若沒有一致性,則分部分計(jì)算和%；3如果Di和%Di對濃度表現(xiàn)一個(gè)漸進(jìn)的改變,則需有更多數(shù)據(jù)確認(rèn)方法的正確性。.3.4計(jì)算2種方法的平均差異和相對差異%及標(biāo)準(zhǔn)差S和S%.3.5估計(jì)的差異和%與廠家聲明的差異比較.3.5.1若和%小于廠家聲明的性能指標(biāo),則已驗(yàn)證差異與廠家差異一致；.3.5.1若和%大于廠家聲明的性能指標(biāo),則需進(jìn)行差異的統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)；按下式進(jìn)行差異驗(yàn)證值的計(jì)算：驗(yàn)證值=t*S/+β或驗(yàn)證值=t*S%/+βt:t是與錯(cuò)誤拒絕率α〔通常為1%或5%、n-1有關(guān)的參數(shù),可在統(tǒng)計(jì)書中查得,例：α=0.01、n=20的t0.01,19=2.539.β：廠家聲明的差異若和%小于驗(yàn)證值,則驗(yàn)證差異與廠家差異一致；4.2方案二：使用參考物質(zhì)進(jìn)行正確度的驗(yàn)證材料與方法.1定值參考物質(zhì).1.1參考物質(zhì)的種類依1、2、3順序,選擇適合該方法并易獲得的一種參考物質(zhì)。.1.1.1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：1經(jīng)參考方法或決定性方法定值的新鮮冰凍血清,如美國國家標(biāo)準(zhǔn)局〔NIST的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。2使用廠家建議的適用該方法正確度驗(yàn)證的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。質(zhì)控品：1用于能力驗(yàn)證的質(zhì)控品,由大量實(shí)驗(yàn)室和有代表性的試劑和系統(tǒng)校準(zhǔn)物定值。如：CAP提供的室間質(zhì)評樣本；衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供的室間質(zhì)評樣本等；校準(zhǔn)品：不同批號的校準(zhǔn)品.1.2參考物質(zhì)的濃度水平至少2個(gè)濃度水平,建議選擇5個(gè)或以上水平以充分評價(jià)整個(gè)分析測量范圍。選擇的濃度應(yīng)能代表分析測量范圍的下、上限。.2試劑：測定試劑盒廠家及名稱.3儀器：儀器廠家及型號.4校準(zhǔn)品：廠家名稱批號1、批號2、批號3.5質(zhì)控品：廠家名稱2個(gè)濃度水平水平1批號1水平2批號2驗(yàn)證程序.1儀器熟悉階段建議為5天,具體時(shí)間可視儀器復(fù)雜程度而定。此階段應(yīng)完成以下工作：1>操作者應(yīng)熟練掌握儀器的操作程、維護(hù)保養(yǎng)程序、樣本準(zhǔn)備方法、校準(zhǔn)與檢測程序。2建立常規(guī)質(zhì)量控制程序。3熟悉正確度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)程序。.2實(shí)驗(yàn)程序.2.1．按實(shí)驗(yàn)室常規(guī)操作程序,進(jìn)行項(xiàng)目定標(biāo),然后進(jìn)行常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控,確保質(zhì)控在控。建議室內(nèi)質(zhì)控在分析樣本同批內(nèi)進(jìn)行,質(zhì)控在控實(shí)驗(yàn)結(jié)果方為可接受。出現(xiàn)失控時(shí),應(yīng)查找原因,糾正后重新進(jìn)行樣本測定。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中,要確保有效的項(xiàng)目校準(zhǔn)及質(zhì)量控制。.2.2按參考物質(zhì)廠家的要求使用與處理參考物,使用前充分混勻,每份樣本重復(fù)測定2次,計(jì)算2次重復(fù)測定的均值。.2.3驗(yàn)證靶值可以參考物質(zhì)的定值或標(biāo)示值或室間質(zhì)評的同組均值；使用室間質(zhì)評樣本時(shí),驗(yàn)證判定標(biāo)準(zhǔn)為±1/2TEa；使用其它參考物質(zhì),驗(yàn)證判定標(biāo)準(zhǔn)可使用儀器說明書的標(biāo)示值。.2.4計(jì)算每份樣本均值與靶值的偏差,將每份樣本的偏差與設(shè)定的要求進(jìn)行比較,若均在可接受范圍內(nèi),則表明正確度符合要求。.2.5完成"正確度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)記錄表"〔表2中所需內(nèi)容的填寫；同時(shí)將實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)、判定結(jié)論等記錄于表2中。5．參考文獻(xiàn)〔略.表1.方法學(xué)比對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表儀器廠家及型號：試劑廠家及批號：校準(zhǔn)品廠家：C1：批號：C2：批號：C3：批號：質(zhì)控品廠家：濃度水平1：批號：濃度水平2：批號：日期：項(xiàng)目：實(shí)驗(yàn)方法：比較方法：樣本編號實(shí)驗(yàn)方法比較方法方法間差異Di方法間相對差異%Di驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)比較結(jié)果結(jié)果T1結(jié)果T2均值結(jié)果C1結(jié)果C2均值umol/Lumol/Lumol/Lumol/Lumol/Lumol/Lumol/L%符合/不符合1\\2\\3\\4\\5\\6\\7\\8\\9\\10\\11\\12\\13\\14\\15\\16\\17\\18\\19\\20\\平均差異和%標(biāo)準(zhǔn)差S和S%驗(yàn)證值=t*S/+β或驗(yàn)證值=t*S%/+β〔廠家聲明的差異正確性驗(yàn)證結(jié)論<符合\不符合>

\\\操作者簽字：審核人簽字：.表2.正確度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表儀器廠家及型號：試劑廠家及批號：校準(zhǔn)品廠家：C1：批號：C2：批號：C3：批號：質(zhì)控品廠家：濃度水平1：批號：濃度水平2：批號：日期：項(xiàng)目：樣本序號結(jié)果1結(jié)果2均值靶值偏差判定標(biāo)準(zhǔn)結(jié)論單位umol/Lumol/Lumol/Lumol/L符合/不符合12345……操作者簽字：審核人簽字：附件3分析測量范圍驗(yàn)證程序目的用于驗(yàn)證該方法的分析測量范圍是否符合廠家的聲明。范圍2.1本程序適用于檢驗(yàn)科測定分析檢測系統(tǒng)的分析測量范圍的驗(yàn)證。職責(zé)科主任負(fù)責(zé)分析檢測系統(tǒng)正確性性能驗(yàn)證方法及結(jié)果的審批；該程序由相應(yīng)專業(yè)組組長或其授權(quán)人負(fù)責(zé)完成該程序相關(guān)的實(shí)驗(yàn)操作與結(jié)果評價(jià)；質(zhì)量小組成員負(fù)責(zé)協(xié)助完成。程序?qū)嶒?yàn)要求熟悉儀器設(shè)備建議為5天,具體時(shí)間可視儀器復(fù)雜程度而定。此階段應(yīng)完成以下工作：1>操作者應(yīng)熟練掌握儀器的操作程、維護(hù)保養(yǎng)程序、樣本準(zhǔn)備方法、校準(zhǔn)與檢測程序。建立常規(guī)質(zhì)量控制程序。正確的標(biāo)本收集程序熟悉分析測量范圍驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)程序。實(shí)驗(yàn)時(shí)間全部實(shí)驗(yàn)應(yīng)在盡可能短的時(shí)間內(nèi)完成,如果有可能,單個(gè)分析試驗(yàn)最好在一天內(nèi)做完。實(shí)驗(yàn)樣本樣本數(shù)量該實(shí)驗(yàn)需要7-9個(gè)足夠量并且能夠滿足稀釋和測量需要的樣本,每個(gè)樣本要求重復(fù)測定2次。推薦使用高值和低值濃度的樣本按照濃度比例精確配成等間距的不同濃度樣本,如果得不到等間距的不同濃度的樣本,只要各樣本間的相互關(guān)系已知,也可以配制成特殊濃度的樣本?；|(zhì)效應(yīng)應(yīng)采用沒有干擾因素的、接近預(yù)期分析測量范圍上限和下限的兩個(gè)分析濃度水平的患者樣本。由于測定的患者樣本的最終濃度代表驗(yàn)證的分析測量范圍,因而高和低濃度的樣本需要進(jìn)行添加或稀釋才能達(dá)到期望的范圍,推薦使用廠家或?qū)嶒?yàn)室已經(jīng)證實(shí)的添加物或稀釋。分析范圍選擇的測量濃度范圍應(yīng)包含或等于廠家所聲明的最低和最高濃度范圍,如果聲明的線性范圍或測量范圍與選擇的濃度范圍不一致時(shí),可以選擇合適的樣本濃度加做新的實(shí)驗(yàn),或舍去未端點(diǎn)適當(dāng)?shù)乜s小線性范圍〔五個(gè)或以上的樣本數(shù)。樣本準(zhǔn)備和濃度計(jì)算驗(yàn)證程序中,每一標(biāo)本都要進(jìn)行編號來確定其相對濃度。對于等間距濃度而言,如果中間標(biāo)本的濃度不是等間距的,相鄰管之間的相互關(guān)系則一定是已知的。也可以先用高值和低值濃度配制成一個(gè)中間濃度管,然后用低值和中間濃度、高值和中間濃度分配其他管的濃度。測量順序測量前必須保證儀器校準(zhǔn)和室內(nèi)質(zhì)控狀態(tài)良好。測量時(shí)按照隨機(jī)順序進(jìn)行。如果存在明顯的攜帶污染或漂移,則選擇對后續(xù)樣本影響最小的順序進(jìn)行檢測,或者在高值樣本后面最少插入2份低值樣本來避免攜帶污染對檢測的影響,但要注意這2份低值樣本的測定結(jié)果并不納入統(tǒng)計(jì)。數(shù)據(jù)收集與統(tǒng)計(jì)處理按照表1的格式將測定的數(shù)據(jù)進(jìn)行收集。數(shù)據(jù)初步檢查檢查數(shù)據(jù)是否有極端明顯的差異〔或錯(cuò)誤,如果在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)有分析或技術(shù)性問題,則應(yīng)立即糾正并且重復(fù)整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程。通過作圖來目測所有結(jié)果是否有由明顯的抄寫錯(cuò)誤,或儀器故障等導(dǎo)致的潛在離群值。方法如下：將測量數(shù)據(jù)作為Y值,計(jì)算濃度或相對濃度作為X值作圖,手工方法或用計(jì)算機(jī)將這些點(diǎn)連接起來,觀察每個(gè)點(diǎn)與直線的大致偏差。當(dāng)某一個(gè)給定濃度的一個(gè)測量值〔Y明顯偏離另一個(gè)Y值時(shí),通過目測檢查判斷該值是否為離群值。經(jīng)過判斷,如果確實(shí)為離群值,應(yīng)將該數(shù)據(jù)刪除。當(dāng)發(fā)現(xiàn)數(shù)據(jù)中有兩個(gè)或以上不可解釋的離群值時(shí),應(yīng)考慮檢測系統(tǒng)的性能是否存在問題。及時(shí)查找問題原因,必要時(shí)請求生產(chǎn)廠家協(xié)助。通過作圖將每一組的檢測數(shù)據(jù)按檢測時(shí)間次序排列,檢查是否有漂移或趨勢性變化。如發(fā)現(xiàn)有明顯的偏差,應(yīng)立即糾正并且重復(fù)整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程。觀察每個(gè)濃度水平的測量值之間差值。在線性模型中,各段的斜率大致相等,升高或降低趨勢提示非線性。通過目測檢查XY散點(diǎn)圖對于后續(xù)的線性評估非常必要,因?yàn)橥ㄟ^散點(diǎn)圖非常容易發(fā)現(xiàn)非線性,或測量范圍太窄或太寬的問題。評估隨機(jī)誤差驗(yàn)證分析測量范圍時(shí)還應(yīng)該考慮到隨機(jī)誤差的影響,因?yàn)殡S機(jī)誤差可能會(huì)導(dǎo)致非線性的評估能力減低。評估隨機(jī)誤差時(shí)選用收集的所有數(shù)據(jù)的集合方差來計(jì)算,并將其與設(shè)定的不精密度的目標(biāo)值進(jìn)行比較,如果該值小于設(shè)定的不精密度目標(biāo)值,則可進(jìn)行下一步分析測量范圍的驗(yàn)證。重復(fù)測定兩次,按照下列公式計(jì)算：SD=上式中,SD為總不精密度,r和r為兩次測定的結(jié)果,L為樣本數(shù)。驗(yàn)證分析測量范圍概述確定分析測量范圍采用多項(xiàng)式回歸方法,該方法主要分兩部分：第一部分判斷用非線性多項(xiàng)式擬合數(shù)據(jù)是否比線性好；第二部分是當(dāng)非線性多項(xiàng)式擬合數(shù)據(jù)點(diǎn)比線性好時(shí),判斷最適非線性模型與線性擬合之間的差值是否小于預(yù)先設(shè)定的該方法的允許誤差。使用統(tǒng)計(jì)軟件做一次、二次核三次多項(xiàng)式回歸分析時(shí),可以借助Excel、SPSS以及SAS等多種商業(yè)統(tǒng)計(jì)軟件來完成。階別回歸方程回歸自由度〔Rdf一次Y=b0+b1X2二次Y=b0+b1X+b2X23三次Y=b0+b1X+b2X2+b3X34一次多項(xiàng)式模型為直線,這是判斷某種方法是否為線性的最適方程。二次多項(xiàng)式模型代表一種拋物線反應(yīng)曲線,有增加趨勢〔曲線上升或減少趨勢〔曲線下降兩種。三次多項(xiàng)式模型代表一種"S"形反應(yīng)曲線,在測量范圍的兩端呈非線性?；貧w系數(shù)用bi表示,在二次多項(xiàng)式級模型中,b2為非線性系數(shù)；在三次多項(xiàng)式模型中,b2和b3為非線性系數(shù)。統(tǒng)計(jì)過程利用相應(yīng)軟件中的回歸程序計(jì)算每個(gè)非線性系數(shù)斜率的標(biāo)準(zhǔn)差SE,然后進(jìn)行t檢驗(yàn),即與0之間有無差異,判斷非線性系數(shù)是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。一次多項(xiàng)式模型中的b和b兩個(gè)系數(shù)不用分析,因?yàn)樗鼈儾环从撤蔷€性。b和b的統(tǒng)計(jì)分析計(jì)算公式如下：t=b/SE自由度的計(jì)算公式為df=L·R-Rdf,L為準(zhǔn)備的不同濃度樣本數(shù),R為重復(fù)檢測次數(shù),Rdf為回歸分析時(shí)的自由度,指Rdf回歸模型中系數(shù)的數(shù)量〔包括b0。查t值表〔附錄B>〔雙側(cè)α=0.05。將計(jì)算得到的t值與查表得到的t值進(jìn)行比較,如果p>0.05,沒有非線性系數(shù)b和b,則認(rèn)為在該范圍內(nèi)存在線性關(guān)系。如果二次多項(xiàng)式模型的非線性系數(shù)b,或三次多項(xiàng)式模型的b或b中任一個(gè)與0比較,有顯著差異〔p<0.05,則該組數(shù)據(jù)范圍內(nèi)為非線性。要注意這只是統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性,并不代表對患者的檢測結(jié)果有影響。結(jié)論結(jié)論1：該實(shí)驗(yàn)方法在實(shí)驗(yàn)所涉及的濃度范圍內(nèi)〔呈線性。結(jié)論2〔必要時(shí)：如果實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示為非線性,那么應(yīng)根據(jù)多次多項(xiàng)式和一次多項(xiàng)式擬合模型預(yù)期值之間的差值即線性偏離與預(yù)設(shè)的線性允許誤差進(jìn)行比較,如果線性偏離小于預(yù)設(shè)的允許誤差,則考慮實(shí)驗(yàn)室按照線性關(guān)系來處理患者檢測結(jié)果所產(chǎn)生的誤差不超過臨床允許的誤差目標(biāo),該非線性是可以接受的。參考文獻(xiàn)EvaluationoftheLinearityofQuantitativeMeasurementProcedures:AStatisticalApproach;ApprovedGuideline.EP6-AVol.23No.16楊有業(yè)張秀明.臨床檢驗(yàn)方法學(xué)評價(jià)[M].人民衛(wèi)生出版社,2008:168-195表1.分析測量范圍驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表儀器廠家及型號：試劑廠家及批號：校準(zhǔn)品廠家：C1：批號：C2：批號：C3：批號：質(zhì)控品廠家：濃度水平1：批號：濃度水平2：批號：測定日期：測定項(xiàng)目：樣本編號結(jié)果1結(jié)果2均值差值123456789操作者簽字：審核人簽字：附件4最大稀釋度驗(yàn)證程序目的樣本的濃度超過分析項(xiàng)目的線性范圍時(shí),實(shí)驗(yàn)室通常將樣本稀釋后重新檢測,再乘上稀釋倍數(shù),得出相應(yīng)樣本的結(jié)果。而樣本稀釋后由于基質(zhì)效應(yīng)等因素影響,檢測結(jié)果會(huì)產(chǎn)生一定的誤差。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)進(jìn)行樣本的最大稀釋度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),以保證稀釋后的樣本檢測結(jié)果的誤差在可接受范圍內(nèi)。范圍對于臨床可報(bào)告范圍<CRR>大于分析測量范圍〔AMR的檢測項(xiàng)目,需進(jìn)行最大稀釋度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。職責(zé)由科主任或其授權(quán)人負(fù)責(zé)相關(guān)程序的審核及批準(zhǔn)；由相應(yīng)專業(yè)組組長或其授權(quán)人完成相關(guān)的實(shí)驗(yàn)操作及結(jié)果評價(jià)；質(zhì)量小組成員協(xié)助完成。程序材料選擇在分析測量范圍上限附近的患者樣本；使用廠家推薦的稀釋液或注射用生理鹽水稀釋患者樣本。方法確定等比系列稀釋濃度,使稀釋后各點(diǎn)盡可能覆蓋該測試項(xiàng)目的AMR；將樣本原液和稀釋后樣本分別重復(fù)測定,計(jì)算均值；依據(jù)原始樣本檢測結(jié)果均值和系列稀釋濃度計(jì)算各系列樣本的分析物濃度的預(yù)期值；比較各個(gè)稀釋度樣本的檢測值和預(yù)期值,分別計(jì)算比值<R=檢測值／預(yù)期值>；結(jié)果的判定：R≥80％或R≤120％為可接受限；R<80％或R>120％的相應(yīng)稀釋度為不可接受稀釋度；其上一級別的稀釋度即為該檢測項(xiàng)目的最大稀釋度。填寫相關(guān)記錄。參考資料醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則〔ISO15189：2007CAPCHECKLISTS<2007.9>畢波,呂元.定量檢測系統(tǒng)的方法學(xué)性能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的評價(jià)[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,30<12>1332-1335.最大稀釋度驗(yàn)證記錄實(shí)驗(yàn)室名稱：記錄編號：項(xiàng)目名稱：試劑名稱：試劑來源/批號：儀器名稱/型號：校