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子情境:谷氨酸發(fā)酵條件控制-發(fā)酵罐取樣操作為什么在發(fā)酵過程中需要取樣呢?取樣后需要檢測那些指標呢?取樣方法:一、材料準備1.“短管”準備:外徑Φ12的優(yōu)質(zhì)膠管(醫(yī)藥公司售)若干條。每條長15公分左右每條兩頭都各用一層布和一層牛皮紙包扎好災(zāi)菌備用。(如圖l)2.“采樣瓶”準備:用250mL三角燒瓶若干個,瓶塞用優(yōu)質(zhì)膠塞,其上打兩個Φ8的孔,并各插進Φ10的玻璃管(每根6-8厘米)玻管上套外徑是Φ12的優(yōu)質(zhì)膠管,膠管的另一端則用一層紗布和一層牛皮紙包好。滅菌備用(如圖2)3.發(fā)酵罐的取樣口準備:改用Φ10的鐵管或銅管,套上外徑Φ12的優(yōu)質(zhì)膠管。在實消后,把取樣閥關(guān)緊,同時要把其上的膠管用止血鉗夾緊(如圖3)二、取樣操作1.先把發(fā)酵罐取樣口膠管上的止血鉗松開2.同時打開取樣管上的閥門,讓發(fā)酵罐里的發(fā)酵液把滯留在取樣管里的發(fā)酵液沖盡。3.關(guān)住取樣閥門并把取樣管上的膠管夾住。4.點火焰并移到取樣管下方,把其上的膠管拔出,火焰完全封住取樣管出口。5.把取樣瓶上的膠管(其中任何一條)用無菌操作的方法套到取樣管上,把火焰移開。6.慢慢地打開取樣閥門,發(fā)酵液就順膠管流到三角瓶中,瓶中的氣體則從另一條膠管排出。(圖4)。7.待三角瓶中的發(fā)酵液數(shù)量足夠檢驗,使用后,關(guān)住取樣閥。同時用火焰封住取樣口,將取樣瓶的膠管從取樣口上拔出(圖4)8.用無菌操作把已滅菌過的短管套住取樣口,并用止血鉗夾住膠管的另一端。9.第二次取樣按照1-8進行。從發(fā)酵罐中取出的樣品該如何處理呢?一、發(fā)酵液的處理①鏡檢:每隔6小時檢測菌體的生長狀況,要求無雜菌和噬菌體。②從發(fā)酵4小時開始,每間隔2小時測定OD,pH,糖含量,③從發(fā)酵12小時開始,除測定上述指標外,每隔4小時測定谷氨酸含量。④OD用光密度計測定,pH值在線測定,糖含量用裴林試劑測定,GA用茚三酮比色法測定。數(shù)據(jù)記錄發(fā)酵時間h0612182430364
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