高效液相色譜法測(cè)定化妝品中的苯氧異丙醇

高效液相色譜法測(cè)定化妝品中的苯氧異丙醇

苯氧異丙醇化學(xué)化合物（phenoniso-2-丙醇）被稱為1-苯氧基-2-丙醇。這是合成陰離子的消費(fèi)品。用作溶劑和添加劑。目前歐盟EEC和我國(guó)《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》均規(guī)定苯氧異丙醇用于淋洗類產(chǎn)品中限用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.0%,用作化妝品防腐劑限用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.0%。根據(jù)苯氧異丙醇的特性可以使用氣相色譜法和高效液相色譜法對(duì)其進(jìn)行分析。目前,已有超高效液相色譜法的報(bào)道,該方法雖可同時(shí)檢測(cè)24種防腐劑,但化妝品中的苯氧異丙醇與其他組分混合在一起,使用該方法無法有效分離雜質(zhì)。Borremans等采用了一種高效液相色譜法測(cè)定苯氧乙醇、苯氧異丙醇以及苯甲酸酯類等物質(zhì),但該法的預(yù)處理方法無法實(shí)現(xiàn)對(duì)不同基質(zhì)化妝品的有效提取,適用性較窄。作者采用高效液相色譜法分析化妝品中的苯氧異丙醇,并引入超聲輔助提取法作為預(yù)處理方法,以期為化妝品中苯氧異丙醇的檢測(cè)尋找到一種準(zhǔn)確性高、可靠性強(qiáng)、適用性廣的實(shí)驗(yàn)方法。1實(shí)驗(yàn)部分1.1儀器和檢測(cè)方法甲醇、乙腈、四氫呋喃(THF),均為色譜純,德國(guó)Merck公司;苯氧異丙醇對(duì)照品,w(苯氧異丙醇)=93.0%(氣相色譜法),美國(guó)Sigma-Aldrich公司。Agilent1100型高效液相色譜儀(帶有紫外檢測(cè)器),美國(guó)Agilent公司;KQ-440KDB型超聲清洗器,中國(guó)昆山市超聲儀器有限公司;SARTORIUSAGCP224S電子天平,德國(guó)Sartorius公司;QL-901型渦旋振蕩器,中國(guó)海門市其林貝爾儀器制造有限公司。1.2流動(dòng)相vfKromasilC18色譜柱(250mm×4.6mmi.d.,5μm);流動(dòng)相為V(水)∶V(乙腈)∶V(甲醇)∶V(四氫呋喃)=60∶25∶10∶5的四元混合溶液;流速1.2mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)268nm;進(jìn)樣量20μL;柱溫30℃。1.3標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的配制精密稱取0.0540g苯氧異丙醇對(duì)照品,精確到0.0001g,于50mL棕色容量瓶中,加入甲醇溶解并定容,得到質(zhì)量濃度為1.0mg/mL的苯氧異丙醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。1.4流動(dòng)相液液l甲醇、s液液相色度精確稱取0.25g試樣,置于25mL具塞比色管中,加入20mL甲醇,渦旋60s,再超聲15min,冷卻到室溫后,用流動(dòng)相溶液定容至25mL刻度線,渦旋振蕩搖勻,經(jīng)0.45mm濾膜過濾,濾液可根據(jù)需要進(jìn)行稀釋,保存于2mL棕色進(jìn)樣瓶中作為待測(cè)樣液,備用。2結(jié)果與討論2.1色譜條件優(yōu)化利用實(shí)際樣品和空白樣品進(jìn)行色譜條件的選擇與優(yōu)化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)在常規(guī)的二元流動(dòng)相的洗脫下極難將苯氧異丙醇與雜質(zhì)分開,而在上述條件下苯氧異丙醇的峰形較好,雜質(zhì)峰與目標(biāo)峰分離度符合要求(R>1.5),且出峰較快。在該色譜條件下,苯氧異丙醇的色譜圖見圖1。苯氧異丙醇的特征吸收波長(zhǎng)為268nm,經(jīng)驗(yàn)證,該波長(zhǎng)可滿足實(shí)測(cè)所需。2.2超聲強(qiáng)度的影響超聲輔助提取法是化妝品預(yù)處理的常用方法之一?？疾炝顺晱?qiáng)度、超聲時(shí)間和料液比3個(gè)因素對(duì)苯氧異丙醇提取率的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)超聲強(qiáng)度加強(qiáng)可縮短破乳和提取的時(shí)間,但超聲時(shí)間多于15min以后提取率不再明顯提高,料液比(m(樣品)∶V(甲醇),g∶mL)≥1∶80時(shí)提取率不再顯著增加。由于超聲時(shí)溶劑會(huì)有少量損失,同時(shí)為計(jì)算方便,故需要在提取后定容至料液比為1∶100。故選擇100%的超聲強(qiáng)度,超聲時(shí)間為15min,料液比為1∶100。2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制將苯氧異丙醇的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液稀釋成質(zhì)量濃度分別為1.0,10.0,50.0,100.0和200.0mg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。移取20μL系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,注入高效液相色譜儀中進(jìn)行測(cè)定,以色譜峰的峰面積(A)為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度(ρ)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。苯氧異丙醇的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:A=74280ρ-23780,r=0.9999。苯氧異丙醇在1.0~200.0μg/mL內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立配制低、中、高3種質(zhì)量濃度(10.0,50.0,150.0μg/mL)的標(biāo)準(zhǔn)溶液各6份,在上述色譜條件下分別進(jìn)樣測(cè)定苯氧異丙醇的峰面積響應(yīng)值,計(jì)算相應(yīng)的RSD值,分別為0.85%,0.96%和0.66%。由此可知,方法的精密度良好。2.5穩(wěn)定性2.5.1峰面積響應(yīng)值測(cè)定取質(zhì)量濃度分別為10.0和100.0μg/mL的2種標(biāo)準(zhǔn)溶液置于室溫下,24h內(nèi)測(cè)量5次,從第一次起每隔一定時(shí)間測(cè)定一次,所得峰面積響應(yīng)值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線,再計(jì)算得到RSD。結(jié)果見表1。由表1可知,根據(jù)《化妝品及其原料中禁限用物質(zhì)檢測(cè)方法驗(yàn)證技術(shù)規(guī)范》中的相關(guān)規(guī)定,所得的RSD<5.0%,表明在常溫時(shí)苯氧異丙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。2.5.2峰面積響應(yīng)值測(cè)定取質(zhì)量濃度分別為10.0和100.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液放置于室溫下,測(cè)定5d,每日測(cè)定6次,所得峰面積響應(yīng)值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線,再計(jì)算得到RSD,結(jié)果見表2。由表2可知,根據(jù)《化妝品及其原料中禁限用物質(zhì)檢測(cè)方法驗(yàn)證技術(shù)規(guī)范》中的相關(guān)規(guī)定,所得的RSD<5.0%,表明常溫下苯氧異丙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液在5d內(nèi)穩(wěn)定。2.6苯氧異丙醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)的確定精密稱取空白樣品(乳狀樣品和液態(tài)樣品)0.25g各1份,每種空白樣品中分別加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)溶液,使得苯氧異丙醇的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.10%,0.50%和1.50%。按1.4方法處理,取6次測(cè)