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4.3種子擴大培養(yǎng)的原則4種子擴大培養(yǎng)種子擴大培養(yǎng)的原則種子罐級數(shù)是指制備種子需逐級擴大培養(yǎng)的次數(shù)。取決于:①菌種生長特性、孢子發(fā)芽及菌體繁殖速度;
②所采用發(fā)酵罐的容積。1、種子罐級數(shù)的確定
為簡化工藝和控制,減少染菌機會,種子罐級數(shù)越少越好。但種子級數(shù)太少,接種量小,發(fā)酵時間延長,會降低發(fā)酵罐的生產(chǎn)效率。雖然種子罐級數(shù)隨產(chǎn)物的品種及生產(chǎn)規(guī)模而定,但也與所選用工藝條件有關(guān)。如改變種子罐的培養(yǎng)條件,加速孢子發(fā)芽及菌體的繁殖,也可相應(yīng)地減少種子罐的級數(shù)。霉菌的生長較慢,如青霉菌,一般采用二級種子罐擴大培養(yǎng),為三級發(fā)酵。
即:孢子懸浮液→一級種子罐(27℃,40h孢子發(fā)芽,產(chǎn)生菌絲)→二級種子罐(27℃,10~24h,菌體迅速繁殖,粗壯菌絲體)→發(fā)酵罐。放線菌的生長速度更慢,采用三級種子罐擴大培養(yǎng),為四級發(fā)酵。種子擴大培養(yǎng)的原則1、種子罐級數(shù)的確定細菌的生長速度快,種子用量比較少,故種子罐相應(yīng)也少,采用一級種子罐擴大培養(yǎng),也稱二級發(fā)酵。即:茄子瓶→種子罐→發(fā)酵罐發(fā)酵級數(shù)確定的依據(jù)級數(shù)受發(fā)酵規(guī)模、菌體生長特性、接種量影響。級數(shù)大,難控制、易染菌、易變異,管理困難,一般為2-4級。種子擴大培養(yǎng)的原則1、種子罐級數(shù)的確定定義:接種齡又稱種齡,是指種子罐中培養(yǎng)的菌絲體開始移人下一級種子罐或發(fā)酵罐時的培養(yǎng)時間。概述:通常接種齡以菌絲處于生命極為旺盛的對數(shù)生長期,而且培養(yǎng)液中菌體尚未達到最高峰時較為合適。過于年輕的種子接入發(fā)酵罐后,往往會出現(xiàn)前期生長緩慢,使整個發(fā)酵周期延長,產(chǎn)物開始形成的時間推遲。而過老的種子會造成生產(chǎn)能力下降,菌體過早自溶。不同菌種或同一品種工藝不同,其種齡也不一樣,具體時間一般要經(jīng)過多次試驗來確定。種子擴大培養(yǎng)的原則2、接種齡總結(jié):種齡短:菌體太少;種齡長:易老化。原則:對數(shù)生長期末,細胞活力強,菌體濃度相對較大,但是最終由實驗結(jié)果定。種子擴大培養(yǎng)的原則2、接種齡定義:
接種量是指移入的種子液體積和接種后培養(yǎng)液體積的比例。概述:
接種量的大小取決于生產(chǎn)菌種在發(fā)酵罐中的生長繁殖速度。
采用較大的接種量,可以縮短發(fā)酵罐中菌體繁殖到達高峰的時間,使產(chǎn)物的形成提前到來。但是,如果接種量過多,往往使菌絲生長過快,培養(yǎng)液黏度增加,造成溶解氧供應(yīng)不足而影響產(chǎn)物合成。而接種量過少,除了延長發(fā)酵周期外,往往還會引起其他不正常情況。
在絲狀菌發(fā)酵生產(chǎn)中,最適接種量多為7~15%,而細菌發(fā)酵中接種量相對較小,一般為1~2%??傊?,對每一個生產(chǎn)菌種,要進行多次試驗才能確定其最適接種量。種子擴大培養(yǎng)的原則3、接種量過大過小都不好,最終以實踐定,如大多數(shù)抗生素為7-15%,但是一般認(rèn)為大一點好。雙種:兩個種子罐接種到一個發(fā)酵罐中。倒種
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