日糧對豬胃內(nèi)主要細(xì)菌的影響規(guī)律研究

日糧對豬胃內(nèi)主要細(xì)菌的影響規(guī)律研究

隨著世界人口的增加，糧食短缺的現(xiàn)象變得越來越明顯。關(guān)于動物飼料的研究不是過去的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)和糧食飼料，而是其他不能被人類食用的植物內(nèi)膜和纖維含量高的傳統(tǒng)飼料。此外,人們的食物結(jié)構(gòu)發(fā)生了很大變化,在發(fā)達(dá)國家,傾向于高脂低碳水化合物低纖維的食物結(jié)構(gòu),與此同時,非胰島素依賴性糖尿病、冠心病和結(jié)腸癌的發(fā)病率日益升高;而在某些發(fā)展中國家,由于人們的食物結(jié)構(gòu)中仍以碳水化合物為主,人所需要的80%的能量均是來源于此,這已引起人們的高度重視。普遍認(rèn)為,這些疾病發(fā)病率的升高與飲食結(jié)構(gòu)可能明顯相關(guān)。日糧纖維指那些不被消化道內(nèi)源分泌物所消化的木質(zhì)素和多糖總和。日糧纖維組成了植物細(xì)胞壁復(fù)雜的碳水化合物,它包括各種各樣的纖維素、半纖維素、果膠和木質(zhì)素,并常伴隨有淀粉(1)(2)(3)。目前,對纖維性飼料的研究日益活躍。本研究的主要目的是研究纖維日糧對懷孕母豬胃內(nèi)pH值、大腸桿菌、乳酸菌、乳桿菌、腸球菌以及酵母菌的影響規(guī)律,以期從微生物學(xué)角度來探討不同類型與水平的日糧纖維對動物胃腸道的影響機(jī)制。目前,尚未見報道有關(guān)日糧纖維在不同時間內(nèi)對動物胃腸道微生物區(qū)系方面的研究。1材料和方法1.1這項研究在丹麥國家農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所進(jìn)行選擇妊娠2個月以內(nèi)的6頭懷孕母豬(188.4±10.8kg),施以T-型胃瘺管手術(shù)。1.2試驗設(shè)計和試驗豬于術(shù)后12d開始正式試驗。將6頭豬隨機(jī)分成兩組,每組三頭。每組作為一個獨立部分進(jìn)行試驗。本試驗采用兩種相同的3×3拉丁方設(shè)計。所有試驗日糧的預(yù)飼期為5d,采樣期為6d。所有試驗豬日飼喂兩次(8:00和16:00),自由飲水。試驗日糧組成見表1。1.3樣品收集所有試驗豬通過胃瘺管,用干凈的塑料杯分別收集0h(即飼喂前)、1/2h、1h、2h、3h和5h的胃食糜大約50g置于冰盒上。1.4接種液的制備胃內(nèi)pH值的測定:收集后的胃食糜用酸度計立即測定pH值。胃內(nèi)細(xì)菌接種液的制備:細(xì)菌接種液的制備方法參照Miller和Wolin(1979)描述的方法(4)。在不斷充CO2的狀態(tài)下,準(zhǔn)確稱取10g的胃食糜,放入已稱重的厭氧溶液中,立即加蓋后充分搖動使混合均勻。再將此混合液快速轉(zhuǎn)入充有CO2的消化袋中,然后將消化袋置于胃消化器(SewardMedical,London,UnitedKingdom)上消化2min,取此消化液1mL放入裝有9mL厭氧溶液的加蓋試管中,再進(jìn)行10倍倍比稀釋,每個樣品需要6個倍比稀釋度。經(jīng)倍比稀釋后的溶液稱為接種液。細(xì)菌接種:取接種液0.1mL分別接種在專門培養(yǎng)大腸桿菌、乳酸菌、乳桿菌、腸球菌和酵母菌的培養(yǎng)基上。將培養(yǎng)大腸桿菌、腸球菌以及酵母菌的培養(yǎng)皿置于普通培養(yǎng)箱中,其中大腸桿菌培養(yǎng)皿24h后取出計數(shù),而腸球菌以及酵母菌的培養(yǎng)皿48h后取出計數(shù)。將培養(yǎng)乳酸菌和乳桿菌的培養(yǎng)皿置于厭氧培養(yǎng)箱中(10:10:80CO2-N2-H2),于培養(yǎng)48h后取出計數(shù)。1.5統(tǒng)計分析本試驗所有數(shù)據(jù)均采用SAS統(tǒng)計程序中的一般線性模型。數(shù)據(jù)的表達(dá)用平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤。2結(jié)果與討論2.1日糧中ph值的變化由表2可以看出,胃內(nèi)pH值均于采食后1/2h時達(dá)到最高值,而不受日糧類型的影響。但纖維性日糧有降低胃內(nèi)pH值的趨勢,并于采食后1h時,甜菜纖維組與對照組之間差異達(dá)顯著水平(P<0.05)。而于采食后3h時,甜菜纖維組與麥麩纖維組之間差異達(dá)顯著水平(P<0.05)。Jensen等(1994)亦報道認(rèn)為,高纖維日糧有降低大腸內(nèi)pH值水平的趨勢(5)。2.2對大腸桿菌總數(shù)的影響由表3可以看出,胃內(nèi)大腸桿菌總數(shù)均于采食后1/2h時達(dá)到最高值,而不受日糧類型的影響。纖維性日糧(甜菜纖維組和麥麩纖維組)有降低大腸桿菌總數(shù)的趨勢,且于1/2h和1h時,甜菜纖維組均顯著低于對照組(P<0.05)。研究表明,日糧纖維可降低胃內(nèi)大腸桿菌總數(shù),尤其是可溶性日糧纖維的這種作用更明顯。2.3麥麩和紫菜纖維組和對照組乳酸菌總數(shù)的比較表1由表4可以看出,胃內(nèi)乳酸菌總數(shù)均于采食后1/2h時達(dá)到最高值,與日糧類型無關(guān)。麥麩纖維組有升高胃內(nèi)乳酸菌總數(shù)的趨勢,且于采食后1/2h和3h時,麥麩纖維組均顯著高于對照組(P<0.05)。而甜菜纖維組與對照組相比,則有降低乳酸菌總數(shù)的趨勢。在任何時間內(nèi),麥麩纖維組的胃內(nèi)乳酸菌總數(shù)均高于甜菜纖維組,且在采食后1h和3h時差異均達(dá)顯著水平(P<0.05)。這就表明,可溶性日糧纖維有降低胃內(nèi)乳酸菌的趨勢,而不可溶性日糧纖維有升高胃內(nèi)乳酸菌的趨勢。2.4麥麩纖維對胃內(nèi)乳桿菌總數(shù)的影響由表5可以看出,對照組日糧胃內(nèi)乳桿菌總數(shù)于采食后1h時達(dá)到最高值,而纖維性日糧(甜菜纖維組和麥麩纖維組)則于1/2h時達(dá)到最高值。于采食后3h時,麥麩纖維組胃內(nèi)乳桿菌總數(shù)仍維持在較高值,與對照組、甜菜纖維組之間的差異達(dá)顯著水平(P<0.05)。這表明,不可溶性纖維可使胃內(nèi)乳桿菌總數(shù)一直維持在較高水平。2.5麥麩纖維纖維對小鼠腸球形總數(shù)的影響由表6可以看出,胃內(nèi)腸球菌總數(shù)均于1/2h時達(dá)到最高值,此后,隨著時間的延長,腸球菌總數(shù)有逐漸下降的趨勢,在采食后1/2h與1h之間,麥麩纖維組和對照組的腸球菌總數(shù)維持在較高水平,而甜菜纖維組的腸球菌總數(shù)于采食后1h時下降較明顯。這表明可溶性纖維可抑制腸球菌的生長。2.6不同纖維日糧對胃內(nèi)發(fā)酵母菌總數(shù)的影響見表7由表7可以看出,胃內(nèi)酵母菌總數(shù)于1/2h時達(dá)到最高值,此后,隨著時間的延長,酵母菌總數(shù)有緩慢下降的趨勢。3降低胃內(nèi)