基因重組牛堿性成纖維細胞生長因子對創(chuàng)面的促進作用

基因重組牛堿性成纖維細胞生長因子對創(chuàng)面的促進作用

氨基酸磷酸酯生長因子（bfgf）是一個多功能的多環(huán)芳烴生長因子，可以促進各種細胞的生長。大量動物實驗和臨床應用證明,基因重組牛堿性成纖維細胞生長因子(recombinantbovinebasicfibroblastgrowthfactor,rbFGF)可以促進急性損傷如燒傷、供皮區(qū)、手術切口等創(chuàng)面愈合;對于慢性難愈合創(chuàng)面,如糖尿病潰瘍、下肢靜脈曲張性潰瘍以及褥瘡等也都有明顯的促修復作用。由暨南大學研制、長春長生基因藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)的“外用凍干重組牛堿性成纖維細胞生長因子(見林bFGF)”已按我國《新藥審批辦法》的要求完成了Ⅰ期和Ⅱ期臨床研究,證明臨床燒傷、外傷等使用該藥安全、有效。為了進一步觀察rbFGF促進創(chuàng)面修復的臨床效果和不良反應,2000年2～7月,組織全國32家縣級以上的教學醫(yī)院進行多中心、大樣本臨床試驗,總共完成1282病例?，F(xiàn)將結果報道如下。1數(shù)據(jù)和方法1.1病例對照結果本研究共完成病例1282例,其中男887例,女395例,年齡12～65歲,平均(32.0±13.1)歲。燒傷面積范圍<1%～98%TBSA(體表燒傷面積),平均約14.7%±6.53%TBSA;治療面積范圍<1%～8%TBSA,平均約3.2±1.8%TBSA。所有病例均無嚴重心、肺、腎、血液系統(tǒng)等疾患,且完成全程治療。另設439例對照病例。觀察創(chuàng)面包括淺Ⅱ度燒傷、深Ⅱ度燒傷、慢性(包括殘余小創(chuàng)面和慢性潰瘍)、供皮區(qū)(包括刃厚和中厚供皮區(qū))創(chuàng)面。各類創(chuàng)面分布情況見表1。1.2基因生物信息粉外用基因重組牛堿性成纖維細胞生長因子(rbFGF)凍干粉,由長春長生基因藥業(yè)股份有限公司提供。rbFGF規(guī)格為36000U/瓶,用15mL質量分數(shù)為0.9%生理鹽水溶解,得rbFGF噴霧劑為2400U/mL。1.3rbfgf法新鮮創(chuàng)面以生理鹽水清創(chuàng),在傷患處覆蓋適當大小的消毒雙層脫脂紗布,用藥液充分均勻噴濕紗布(以藥液不溢出為準),適當包扎即可,每日換藥一次,至傷口完全愈合。按此方法,傷患處每日用液量約為0.06mL/cm2,折合rbFGF效價為144U/cm2。對照組創(chuàng)面直接應用質量分數(shù)為0.9%生理鹽水,其他處理方法同治療組。1.4觀察指標(1)傷口外觀結痂、分泌物、創(chuàng)緣反應;(2)傷口愈合情況愈合面積的百分比、皮島生長情況、用藥8d(淺Ⅱ度)或15d(深Ⅱ度)時的愈合百分比、完全愈合時間;(3)全身情況觀察T、P、R,并檢測用藥前后(7～15d)的血、尿常規(guī),肝、腎功能各一次;(4)副作用對部分典型病例進行跟蹤隨訪,觀察全身及局部反應。1.5術后愈合時間設自身對照的創(chuàng)面:①治療組與對照組完全愈合時間綜合比較,判定療效;②淺Ⅱ度于8d、深Ⅱ度于15d時,比較創(chuàng)面愈合百分比;③治療創(chuàng)面與對照創(chuàng)面?zhèn)€案比較,提前1～2d愈合為有效,提前3d以上愈合為顯效;④慢性潰瘍用藥前后比較;⑤創(chuàng)傷性創(chuàng)面,計算各類供皮區(qū)創(chuàng)面的平均愈合時間。創(chuàng)面愈合時間、創(chuàng)面愈合率用均數(shù)±標準差(xˉ±s)(xˉ±s)表示,均值比較用t檢驗。2結果2.1內(nèi)皮內(nèi)貼,深度新鮮創(chuàng)緣藥或噴藥時效果好淺Ⅱ度新鮮創(chuàng)面在用藥最初2～3d,創(chuàng)面滲出液較多,以后逐漸減少,內(nèi)層敷料緊密貼附于創(chuàng)面上,隨著創(chuàng)面愈合,敷料亦逐漸脫落。深Ⅱ度新鮮創(chuàng)面用藥最初也有少量滲出液,部分有薄痂形成,創(chuàng)緣紅腫不明顯,痂皮逐漸脫落,皮島出現(xiàn),表皮迅速生長,至完全愈合。早期供皮區(qū)創(chuàng)面有血性滲出,2～3d后停止,內(nèi)層敷料附貼良好,用藥時保留內(nèi)層敷料,直接噴藥其上面至愈合,敷料脫落。供皮區(qū)創(chuàng)面均無感染表現(xiàn)。2.2治療組和對照組治療前后p淺Ⅱ度創(chuàng)面同體對照組比較,無論是8d愈合率或完全愈合時間,治療組均比對照組好,P<0.001,差異非常顯著。淺Ⅱ度創(chuàng)面總體治療病例與對照病例比較,結果與同體對照一致,說明本藥對淺Ⅱ度創(chuàng)面愈合有促進作用(見表2)。2.3完全愈合時間提前深Ⅱ度創(chuàng)面同體對照的治療組與對照組比較,15d愈合率有所提高,完全愈合時間提前約3～4d,P<0.001,差異非常顯著。表3還表明深Ⅱ度創(chuàng)面總體治療病例與對照組比較,結果與同體對照相似,均說明本藥對深Ⅱ度創(chuàng)面也有促進愈合作用(表3)。2.4d愈合率測定刃厚供皮區(qū)愈合情況在同體對照組及全體治療組與對照組比較,8d愈合率較高,完全愈合時間提前,P<0.001,有顯著差異(見表4)。表5顯示中厚供皮區(qū)愈合情況,結果與刃厚供皮區(qū)愈合情況相似,說明本藥對這類供皮區(qū)的創(chuàng)傷創(chuàng)面也有促進愈合作用。2.5保乳手術后分復性腦膠囊的臨床愈合時間慢性創(chuàng)面(共111例)包括晚期小肉芽創(chuàng)面以及慢性潰瘍創(chuàng)面,創(chuàng)面存在時間較長,平均創(chuàng)面存在時間為(54.8±25.1)d,用藥后創(chuàng)面完全愈合時間為(31.6±20.3)d,臨床判斷顯效率31.5%,有效率44.4%,無效率24.0%,總有效率75.9%。同體對照(共8例)比較,治療組、對照組創(chuàng)面完全愈合時間分別為(22.1±16.0)d和(28.0±18.0)d(t=2.2,P=0.068),治療組較對照組愈合時間有所提前,但病例數(shù)少,無統(tǒng)計學差異。2.6不良反應發(fā)生情況從表6中可以看出rbFGF用藥前后血常規(guī)及肝、腎功能變化,各項化驗均值在治療前后均在正常范圍內(nèi),用藥前白細胞及肝、腎功能等項的異常頻數(shù)均高于用藥后,這說明本藥并未對血色素、白細胞及肝、腎功能造成不良影響。僅有1例在用藥后創(chuàng)面邊緣發(fā)生皮疹,停藥后消退,本例已剔除,但仍記錄在不良反應案例內(nèi)。未發(fā)現(xiàn)其它全身及局部不良反應。3外源性bfgf對慢性創(chuàng)傷愈合時間的作用rbFGF對來源于中胚層、神經(jīng)外胚層和外胚層的多種細胞具有較強的促生長作用,在體內(nèi)參與多種組織的創(chuàng)傷修復過程,是體內(nèi)重要的創(chuàng)傷愈合因子之一,對創(chuàng)傷修復有重要意義。它能誘導微血管的形成、發(fā)育和分化,同時直接刺激成纖維細胞及細胞外基質的蛋白合成,以形成膠原纖維,增加創(chuàng)面的抗張力強度,并推動真皮細胞的移行、分裂、分化以完成皮膚的修復過程。在創(chuàng)傷條件下,局部受創(chuàng)組織中內(nèi)源性bFGF的含量顯著下降,反映在創(chuàng)傷后一段時間內(nèi)源性bFGF處于缺乏狀態(tài),而創(chuàng)傷修復過程中組織細胞(包括成纖維細胞、血管內(nèi)皮細胞等)的大量增殖與分化,都需要包括bFGF等在內(nèi)的多種生長因子的刺激。此時應用外源性bFGF可促進內(nèi)源性bFGF的表達,從而刺激組織分泌bFGF,對減輕內(nèi)源性bFGF的缺乏狀態(tài)具有積極作用。在創(chuàng)傷早期,bFGF對炎癥反應的影響可能是與多種生長因子的共同作用,刺激成纖維細胞及細胞外基質的蛋白合成,形成膠原纖維。而對成纖維細胞與內(nèi)皮細胞,則是bFGF與這些細胞上特異性受體結合的結果。在慢性創(chuàng)面中,創(chuàng)面本身修復內(nèi)環(huán)境有所改變,自身內(nèi)源性bFGF含量不足或缺乏,bFGF受體活性下調,較難啟動創(chuàng)面的愈合。當外源性bFGF參與時,可以激活內(nèi)源性bFGF活性或上調bFGF受體表達,發(fā)揮組織修復的啟動作用,從而使愈合時間明顯縮短。本次進行的臨床研究結果表明,rbFGF對燒傷、創(chuàng)傷及慢性潰瘍等均有明顯促進傷口愈合的作用,它能明顯縮短創(chuàng)面愈合時間,促進肉牙組織生長,減少瘢痕的形成,且使用安全,無刺激性和過敏性。其對淺、深Ⅱ度燒傷完全愈合時間均提前2～3d,8d和15d創(chuàng)面愈合率分別提高約20%和15%;對供皮區(qū)創(chuàng)面完全愈合時間提前約2d,8d創(chuàng)面愈合率提高約20%。對于慢性創(chuàng)面,由于病例較少,兩組創(chuàng)面完全愈合時間未能顯示統(tǒng)計學差異,但rbFGF治療組比對照組創(chuàng)面平均提前6d左右愈合,全組111例臨床判斷總有效率75.9%。用藥前后血