連錢草乙醇提取物抗腸蠕動亢進作用的研究

連錢草乙醇提取物抗腸蠕動亢進作用的研究

連草原植物是活血草（nakai）kuber，是嘴唇科植物。具有利濕通淋、清熱解毒、散瘀消腫的功能。主治尿路感染、疳積、黃疸、感冒、肺癰、咳嗽、小兒驚風、跌打扭傷、骨折、風濕性關節(jié)炎。在湖北省民間常用于腹瀉的治療,具有較好的療效。為了探討連錢草治療腹瀉的作用機制,筆者觀察了連錢草醇提物對豚鼠回腸平滑肌和小鼠腸運動的影響,旨在為連錢草治療腹瀉提供實驗依據(jù),現(xiàn)將結果報道如下。1實驗動物、藥物和試劑LMS-2B二道生理記錄儀(成都儀器廠);YJ501型超級恒溫水浴(上海躍進醫(yī)療器械廠);Bs200s電子天平(Sartorins公司);健康豚鼠(湖北省衛(wèi)生防疫站動物實驗中心),體重250～350g,♀♂兼用;昆明種小鼠(湖北省衛(wèi)生防疫站動物實驗中心),體重18～24g,♀♂兼用;氯化乙酰膽堿(北京化學試劑公司,批號20011015);甲基硫酸新斯的明注射液(山東天福制藥廠,批號0207051);組胺(中國科學院上海生物化學研究所);氯化鋇自貢市張家壩鹽化有限公司);大黃浸液(大黃購于洪山區(qū)醫(yī)藥公司,取大黃粉適量,加蒸餾水浸漬24h,濃度為1mL∶0.2g生藥,備用);連錢草乙醇提取物(連錢草自行采集,由湖北中醫(yī)學院中藥鑒定教研室陳家春教授鑒定為唇形科植物連錢草,取粉碎過4號篩的連錢草干品適量,加95%的乙醇于圓底燒瓶中,浸泡6h后水浴加熱回流1h,趁熱過濾,藥渣再用95%的乙醇加熱回流1h,過濾,合并濾液,減壓回收乙醇濃縮至100%,即含生藥1mL∶1g,備用)。2方法和結果2.1炭末推進百分率測定取小鼠24只,體重18～20g,隨機分成3組,每組8只,分別灌服連錢草乙醇提取物,陰性對照灌服等容積生理鹽水,陽性對照灌服硫酸阿托品0.01g·kg-1。每只小鼠給藥后30min,均以5%炭末混懸液(混懸于2%羧甲基纖維素溶液中)0.3mL灌胃。20min后,將小鼠頸椎脫臼法致死,打開腹腔取出小腸,不加牽引平鋪于托盤上,測量從幽門至回盲部之間距離(小腸全長)及炭末推進距離,求出推進百分率,結果見表1。炭末推進率(%)=炭末在小腸內推進距離(cm)小腸全長(cm)×100%(%)=炭末在小腸內推進距離(cm)小腸全長(cm)×100%由表1可見,與生理鹽水對照組相比,連錢草乙醇提取物能顯著降低小腸炭末推進率(P<0.01),表明連錢草乙醇提取物有抑制小鼠小腸推進運動的作用。2.2大黃粉浸液與炭末混懸液的配制取小鼠24只,體重18～22g,隨機分成3組,禁食12h(供水)。連錢草醇提物組于灌服藥物后1h,加服大黃粉(20%,5g·kg-1)浸液與炭末混懸液,另兩組中一組給5%炭末混懸液作為正常對照,一組給大黃粉炭末混懸液。觀察各組黑便出現(xiàn)時間及6h內黑便粒數(shù),結果見表2。由結果可見,連錢草醇提物組黑便出現(xiàn)時間均較大黃組為慢,黑便粒數(shù)較少,差異顯著,表明連錢草乙醇提取物有抑制腸蠕動,減緩糞便排出的作用。2.3炭末推進試驗取小鼠24只,體重18～22g,隨機分成3組。禁食12h(供水)。生理鹽水組給等容積生理鹽水,新斯的明組以甲基硫酸新斯的明2mg·kg-1灌胃,連錢草乙醇提取物灌胃給藥。30min后,以甲基硫酸新斯的明2mg·kg-1灌胃,10min后,以15%活性炭混懸液(混懸于2%的羧甲基纖維素溶液中)0.3mL灌胃。給炭末后20min將小鼠脫頸椎處死,測量全腸長度及炭末在腸內推進長度,求出炭末推進率,結果見表3。結果可見甲基硫酸新斯的明能使腸蠕動亢進,而連錢草醇提物組能降低小腸炭末推進率,對抗新斯的明所致的腸蠕動亢進。2.4連錢草乙醇提取物對保肝活動力的影響2.4.1連錢草乙醇提取物對豚鼠回腸平滑肌的作用取健康豚鼠8只,體重250～350g,♀♂不限。用木錘敲擊動物頭部致昏,立即剖腹取出回腸,小心分離除去粘膜組織,隨后用臺氏液將腸內容物洗凈,并將腸管分剪成1～2cm長小段的標本備用,將上述備用的回腸標本,置于盛有10mL臺氏液的麥氏浴槽內,通入O2,(38.0±0.5)℃恒溫,張力負荷1g,平衡30min,用記錄儀描記運動曲線,穩(wěn)定后加入連錢草乙醇提取物(0.2g·mL-1),觀察給藥前后回腸平滑肌的收縮幅度、頻率、張力的變化,比較給藥前后的腸道活動力(腸道活動力=平均強度×頻率,單位:g·次數(shù)·min-1),結果見表4。由表4可見,不同濃度的連錢草乙醇提取物(0.05,0.1,0.2,0.3g·mL-1)均能顯著抑制豚鼠離體回腸平滑肌的活動。2.4.2連錢草乙醇提取物對豚鼠回腸平滑肌細胞受體的作用將上述回腸標本,置于盛有10mL臺氏液的麥氏浴槽內,通入O2,(38.0±0.5)℃恒溫,張力負荷1g,平衡30min,用記錄儀描記運動曲線,穩(wěn)定后分別加入氯化乙酰膽堿、組胺和氯化鋇等各類激動劑,待其穩(wěn)定后加入連錢草乙醇提取物,觀察兩次給藥前后回腸運動的變化,比較給藥前后的腸道動力,結果見表5。結果可見,連錢草乙醇提取物能夠顯著拮抗氯化乙酰膽堿、組胺、氯化鋇對離體豚鼠回腸平滑肌的激動作用。3連錢草乙醇提取物小鼠在體實驗表明,連錢草乙醇提取物對大黃冷浸液引起的小鼠腹瀉有明顯的拮抗作用,對炭末在小鼠小腸內的推進率有抑制作用,亦能對抗新斯的明所致的小腸運動亢進