臨床常用的生化免疫檢查臨床醫(yī)學

臨床常用生物化學檢查贛南醫(yī)學院醫(yī)學檢驗學教研室馬華謀第一節(jié)血糖及其代謝物檢測糖的重要生理功能糖的來源與去路

血糖濃度的調節(jié)肝臟的調節(jié)神經的調節(jié)激素的調節(jié)

內臟神經迷走神經糖代謝的主要測定項目①血糖濃度測定②口服糖耐量試驗③糖化血紅蛋白試驗④糖化血清白蛋白測定⑤胰島素測定⑥C-肽測定等血糖及血糖水平的概念:血糖：指血液中的葡萄糖.血糖水平：即血糖濃度。血糖濃度參考值：3.6~6.11mmol/L（葡萄糖氧化酶法）一、空腹葡萄糖檢測一、空腹葡萄糖檢測【臨床意義】1.增高見于：①糖尿?。喝?型和2型糖尿病；②內分泌疾病：如巨人癥或肢端肥大癥、皮質醇增多癥、甲狀腺功能亢進癥、嗜鉻細胞瘤、胰高血糖素病等；③應激性高血糖：如顱腦損傷、腦卒中、心肌梗塞等；④藥物影響：如噻嗪類利尿劑、口服避孕藥等；⑤其他：妊娠嘔吐、麻醉、脫水、缺氧、窒息等；⑥生理性增高如飽食、高糖飲食、劇烈運動、情緒緊張等。一、空腹葡萄糖檢測2.減低見于①胰島素過多：如胰島素用量過多、口服降糖藥過量和胰島B細胞瘤、胰腺腺瘤等；②缺乏抗胰島素激素：如腎上腺皮質激素、生長激素等③肝糖原貯存缺乏性疾病：如重型肝炎、肝硬化、肝癌等④其他：如長期營養(yǎng)不良、饑餓和急性酒精中毒一、空腹葡萄糖檢測二、糖耐量試驗耐糖現象糖耐量下降：調節(jié)功能失調，口服或靜脈注射一定量的葡萄糖后，血糖急劇升高，且持久不能恢復到原有水平糖耐量試驗：口服或注射一定量的葡萄糖后，每間隔一定時間測定血糖水平，稱糖耐量試驗（GTT），臨床上常用口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）。（一）葡萄糖耐量試驗適應癥①空腹血糖水平在臨界值而又疑似糖尿病患者②空腹或餐后血糖水平正常，但有發(fā)展為糖尿病的可能。③以前糖耐量試驗異常的危險人群④妊娠性糖尿病的診斷⑤臨床上出現腎病、神經病變和視網膜病而無法解釋者⑥流行病學研究的手段二、糖耐量試驗WHO標準化：

試驗前三天，受試者每日食物中糖的含量不低于150克，且維持正?；顒?。停用影響試驗的藥物，空腹10-16h。坐位取血后5min內飲入250ml含75g。無水葡萄糖的糖水，服糖后，每隔30min取血1次，共4次，于采血同時，每隔1小時留取尿液作尿糖試驗。二、糖耐量試驗【參考值】空腹血糖＜6.1mmol/L口服75g葡萄糖（或1.75g/kg體重）或進食100g饅頭，進食后30～60分鐘血糖水平達高峰，一般在7.8～9.0mmol/L，峰值不超過11.1mmol/L2小時不超過7.8mmol/L3小時可恢復至空腹血糖水平各次尿糖均為陰性二、糖耐量試驗臨床意義二、糖耐量試驗診斷糖尿病兩次空腹血糖分別≥7.0mmol/L，本試驗高峰值≥11.1mmol/L，或者2h值≥11.1mmol/L；隨機血糖≥11.1mmol/L，且伴尿糖陽性；或有口渴、多飲、多尿等臨床癥狀者可確診糖尿病臨床意義二、糖耐量試驗糖耐量減低指空腹血糖＜7.0mmol/L，2小時血糖在7.8～11.1mmol/L之間者；此外，達到高峰時間可延至1小時后，血糖恢復到正常時間可延至2～3小時以后者，且有尿糖陽性。糖耐量減低多見于2型糖尿病、痛風、肥胖病、甲狀腺功能亢進癥（甲亢）、肢端肥大癥及皮質醇增多癥等?！九R床意義】葡萄糖量曲線低平指空腹血糖降低，服糖后血糖上升不明顯，2小時后仍處于低水平。常見于胰島B細胞瘤、甲亢、腺垂體功能減退癥及腎上腺皮質功能減退等。低血糖現象肝源性低血糖，空腹血糖常低于正常，口服糖后血糖高峰提前出現并超過正常，2小時后不能降至正常，尿糖出現陽性。功能性低血糖患者，空腹血糖正常，服糖后血糖高峰也在正常范圍內，但服糖后2～3小時可發(fā)生低血糖二、糖耐量試驗三、血清胰島素檢測和胰島素釋放試驗

在作OGTT時分別測定進葡萄糖（或饅頭）前及后30分鐘、1、2、3小時血標本的胰島素濃度，可更準確地反映胰島B細胞的儲備能力?！緟⒖贾怠縍IA法：空腹：血胰島素為10～20mu/L；胰島素（μu/ml）/血糖（mg/dl）值＜0.3?！九R床意義】1.糖尿病1型糖尿病患者空腹胰島素濃度明顯降低；進糖后仍很低，呈低平曲線，胰島素與血糖的比值也明顯降低。2型糖尿病患者空腹胰島素水平可正常、稍低或稍高；進糖后胰島素呈延遲性釋放反應，它與血糖的比值也較低。胰島素分泌降低或釋放遲緩，有利于糖尿病的早期診斷。2.高胰島素血癥或胰島B細胞瘤空腹血糖降低，胰島素/血糖比值＞0.4，提示高胰島素血癥或胰島B細胞瘤。3.在肝、腎衰竭或排泄功能受阻時，血胰島素濃度也可升高。三、血清胰島素檢測和胰島素釋放試驗四、血清C-肽檢測

在蛋白水解酶作用下，在胰島素原（pro-insulin）轉變?yōu)橐葝u素的過程中，釋放出一個由31個氨基酸組成的片斷，稱C-肽（C-peptide）。測定血清C-肽的水平可以了解胰島素的分泌、代謝和胰島B細胞的儲備功能?！緟⒖贾怠靠崭梗?65～1324pmol/L【臨床意義】

常與胰島素和OGTT同時測定，其臨床意義如下：1.低血糖①糖尿病伴胰島B細胞瘤患者，血清胰島素與C-肽濃度均升高；②外源性胰島素過量所致低血糖患者，則血清胰島素升高，而C-肽降低；③胰島B細胞瘤術后，血清C-肽仍升高，提示腫瘤未完全被切除或有復發(fā)。2.肝硬化血清C-肽升高，C-肽/胰島素比值降低。3.糖尿病存在胰島素抗體時，只有用C-肽檢測來了解胰島B細胞的功能。四、血清C-肽檢測五、糖化血紅蛋白檢測

糖化血紅蛋白（glycohemoglobin,GHb）（HbA1中的HbA1c）是血紅蛋白（Hb）合成后以其β鏈末端氨基酸與葡萄糖類進行縮合反應形成HbA1c酮氨化合物，其反應速度主要取決于血糖濃度及血糖與Hb的接觸時間。由于糖化過程非常緩慢，一旦形成不再解離，不受血糖濃度暫時波動的影響，故對高血糖特別是血糖和尿糖波動較大的患者，有獨特的診斷意義?！緟⒖贾怠?/p>

按GHb占總Hb的百分比計算。電泳法為5.6%～7.5%；微柱法為4.1%～6.8%；比色法為1.416±0.11nmol/mg蛋白?！九R床意義】

糖尿病時，GhbA1或GhbA1c值較正常升高2～3倍，GHb1c可反映患者抽血前1～2個月內血糖的平均綜合值。在控制糖尿病后GhbA1的下降要比血糖和尿糖下降晚3～4周，故可用于了解糖尿病的控制程度。GHb1c對區(qū)別糖尿病性高血糖和應激性高血糖有價值，前者的GHb1c水平多見增高，后者則正常。五、糖化血紅蛋白檢測第二節(jié)血脂及血漿脂蛋白檢測

血脂：是血漿中的中性脂肪（甘油三酯和膽固醇）和類脂（磷脂、糖脂、固醇、類固醇）的總稱

膽固醇:70%是膽固醇脂（CE）、30%是游離膽固醇（FC）、合稱總膽固醇（TC）定義：

脂蛋白：脂類難溶于水，正常血漿脂類物質與蛋白質結合成脂蛋白的形式存在。

結構：

大致為球形顆粒，由兩大部分組成，即疏水性的內核和親水性的外殼（圖10-1）。內核由不同量的CE與TG組成，表層由載脂蛋白、PL及FC組成，FC及PL的極性基團向外露在血漿中，載脂蛋白是兼性化合物，它的疏水部分掩蔽在脂蛋白中，而親水部分突出于脂蛋白顆粒的表面。分類：乳糜微粒（chylomicron,CM）極低密度脂蛋白（verylowdensitylipoprotein,VLDL）中間密度脂蛋白（intermediatedensitylipoprotein,IDL）低密度脂蛋白（lowdensitylipoprotein，LDL）高密度脂蛋白（highdensitylipoprotein，HDL脂蛋白（a）[lipoprotein(a),Lp(a)]乳糜微粒、前-

、

和

四條脂蛋白區(qū)帶

電泳法超速離心法：（一）總膽固醇測定

膽固醇（cholesterol,CHO）是脂質的組成成分之一，人體含膽固醇約140g，廣泛分布于全身各組織中，血液中的CHO僅有10%～20%是直接從食物中攝取，其余主要由肝和腎上腺等組織自身合成。CHO主要經膽汁隨糞便排出體外。CHO是合成膽汁酸、腎上腺皮質激素、性激素及維生素D等的重要原料，也是構成細胞膜的主要成分之一。總膽固醇測定【參考值】酶法：成人≤5.17mmol/L為合適水平5.20～5.66mmol/L為邊緣水平≥5.69mmol/L為升高?？偰懝檀紲y定【臨床意義】1.增高見于①甲狀腺功能減退、冠狀動脈粥樣硬化癥、高脂血癥等②糖尿病特別是并發(fā)糖尿病昏迷患者③腎病綜合征、類脂性腎病、慢性腎炎腎病等④膽總管阻塞、長期高脂飲食、精神緊張或妊娠期2.降低見于①嚴重的肝臟疾?。喝缂毙愿螇乃阑蚋斡不趪乐氐呢氀?；如再生障礙性貧血、溶血性貧血、缺鐵性貧血等③甲亢或營養(yǎng)不良。總膽固醇測定甘油三酯測定（二）甘油三酯測定

甘油三酯(triglyceride,TG)由肝、脂肪組織及小腸合成。正常人空腹時TG僅占總脂的1/4，主要存在于前β-脂蛋白和乳糜顆粒中，直接參與膽固醇及膽固醇酯的合成，為細胞提供能量和貯存能量。它是動脈粥樣硬化的重要因素之一。甘油三酯測定【參考值】

酶法為0.56～1.7mmol/L；≤1.70mmol/L為適合水平，＞1.70mmol/L為升高?！九R床意義】1.增高見于①動脈粥樣硬化性心臟病；②原發(fā)性高脂血癥、動脈硬化癥、肥胖癥、阻塞性黃疸、糖尿病、脂肪肝、腎病綜合征、妊娠、高脂飲食和酗酒等。2.降低見于甲狀腺功能亢進、腎上腺皮質功能減低及嚴重肝衰竭等。高密度脂蛋白膽固醇測定（三）高密度脂蛋白膽固醇測定

高密度脂蛋白（HDL）是顆粒最小，密度最大的脂蛋白，主要由肝臟和小腸合成。HDL的組成中，蛋白質（ApoA1、ApoA2為主，占90%）與脂質各占50%，脂質中膽固醇占20%。HDL的功能之一是運輸內源性膽固醇至肝臟處理，故有抗動脈粥樣硬化作用。脂蛋白電泳時，HDL位于α-脂蛋白處。常規(guī)檢查中，通過HDL中膽固醇（HDL-C）的含量間接反映HDL的水平。高密度脂蛋白膽固醇測定【參考值】

沉淀法：0.94～2.0mmol/L；＞1.04mmol/L為合適水平，＜0.91mmol/L為減低?！九R床意義】

HDL-C對診斷冠心病有重要價值，已知HDL-C與TG呈負相關，也與冠心病發(fā)病呈負相關。有報道稱其亞型HDL2-C與HDL-C比值（HDL2-C/HDL-C）對診斷冠心病有更大的臨床意義。此外，動脈粥樣硬化、糖尿病、肝損害和腎病綜合征時，HDL-C降低。低密度脂蛋白膽固醇測定（四）低密度脂蛋白膽固醇測定

低密度脂蛋白（LDL）是血清中攜帶膽固醇的主要顆粒。LDL是由極低密度膽固醇分解而成。經LDL受體途徑進入細胞內的LDL經溶酶體消化，造成ApoB100的降解和膽固醇被水解釋放出游離膽固醇。LDL向組織及細胞內運送膽固醇，直接促使動脈粥樣硬化。日常分析中以LDL中膽固醇（lowdensitylipoprotein-cholesterol,LDL-C）作為粥樣硬化的風險指標之一。低密度脂蛋白膽固醇測定【參考值】

沉淀法：2.07～3.12mmol/L；≤3.12mmol/L為合適水平，3.15～3.61mmol/L為邊緣升高，≥3.64mmol/L為升高?！九R床意義】

許多報道證實，LDL-C水平升高與冠心病呈正相關，LDL-C每升高1mg使冠心病危險性增加1%～2%。如TC偏高，HDL-C升高，可稱高膽固醇血癥；如TC偏高，HDL減低，LDL-C升高，應作治療。LDL增高最多見于Ⅱ型高脂蛋白血癥，尤其Ⅱa亞型多見。脂蛋白（a）測定（五）脂蛋白（a）測定脂蛋白（a）［lipoprotein(a)，LP（a）］的結構與LDL相似，其核心為TG和膽固醇，其表面被CHO及磷脂包裹，上嵌載Apo（a）和ApoB。LP（a）有促進動脈粥樣硬化和血栓形成的作用，故它是冠心病的重要獨立危險因子之一?！緟⒖贾怠?/p>

免疫比濁法：＜300mg/L?！九R床意義】

現將高LP（a）作為動脈粥樣硬化（冠心病、腦卒中等）的獨立危險因素。因為它與高血壓、高LDL-C（高TC）、低HDL-C等因素無關。在動脈粥樣硬化性疾病中，LP（a）與ApoB起協(xié)同作用。其次，LP（a）增高也見于炎癥、手術、創(chuàng)傷等。血清載脂蛋白檢測（六）載脂蛋白A1測定載脂蛋白A1（apo-lipoproteinA1,Apo-A1）由肝臟和小腸合成，是HDL的主要載脂蛋白成分（占90%），它可催化卵磷脂-膽固醇?；D移酶（LACT），將組織細胞內多余的膽固醇酯運至肝臟處理，因此Apo-A1有清除組織內脂質和抗動脈粥樣硬化作用，對防止動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展極為重要?！緟⒖贾怠?/p>

比濁法：男為1.42±0.17g/L；女為1.45±0.14g/L。血清載脂蛋白檢測【臨床意義】

血清Apo-A1是診斷冠心病的一種較敏感的指標，其血清水平與冠心病發(fā)病率呈負相關。急性心肌梗塞時，Apo-A1水平降低。Ⅱ型糖尿病Apo-A1值常偏低，其心血管并發(fā)癥的發(fā)生率增高。腦血管病變、腎病綜合征、肝衰竭以及Apo-A1缺乏癥時Apo-A1水平也降低。血清載脂蛋白檢測（七）載脂蛋白B測定載脂蛋白B（apo-lipoproteinb,Apo-B）有Apo-B100和Apo-B48兩種。前者由肝臟合成，是LDL的主要載脂蛋白（98%）；后者在空腸合成，主要含于CM中。Apo-B與外周細胞膜上的LDL受體結合，起介導LDL進入細胞的作用，故Apo-B