禽流感病毒標(biāo)本采集及fc復(fù)習(xí)過(guò)程課件

禽流感病毒標(biāo)本采集及fc禽流感病毒標(biāo)本采集及fc二級(jí)防護(hù)要求穿普通工作服、戴工作帽、外罩一層防護(hù)服、戴防護(hù)眼鏡和防護(hù)口罩（離開(kāi)污染區(qū)后更換）戴乳膠手套、穿鞋套進(jìn)行家禽的宰殺和處理時(shí)，應(yīng)戴橡膠手套，穿長(zhǎng)筒膠鞋。每次實(shí)施防治處理后應(yīng)立即進(jìn)行手清洗和消毒。

二級(jí)防護(hù)要求穿普通工作服、戴工作帽、外罩一層防護(hù)服、三級(jí)防護(hù)確診禽流感病例或證實(shí)可由人傳染人時(shí)，對(duì)病人實(shí)施近距離治療操作例如氣管插管、氣管切開(kāi)的醫(yī)務(wù)人員和標(biāo)本采集人員。除按二級(jí)防護(hù)要求外，將口罩、防護(hù)眼鏡換為全面型呼吸防護(hù)器（符合N95或FFP2級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的濾料）三級(jí)防護(hù)確診禽流感病例或證實(shí)可由人傳染人時(shí)，對(duì)病人實(shí)施近距離工作人員的自我防護(hù)：防護(hù)中不可忽視的三方面:

一、無(wú)論是參加防治的臨床工作人員、實(shí)驗(yàn)工作人員，還是從事流行病學(xué)調(diào)查與疫情處理的工作人員，必須有安全可靠的防護(hù)措施。工作期間，除工作衣以外，還應(yīng)穿隔離衣褲、隔離鞋帽（最好是包頭帽），必須戴合格的口罩、雙層乳膠手套，必要時(shí)戴護(hù)目鏡和防護(hù)面罩。總之，工作人員的皮膚粘膜均不能暴露在外，不可直接接觸病人分泌物、排出物、體液和血液，以及可能被它們污染的一切醫(yī)療用品、生活用品和其他廢棄物。工作人員的自我防護(hù)：防護(hù)中不可忽視的三方面:二、防護(hù)措施中的另一重要措施是洗手。接觸每一位病人（包括疑擬病人）之后必須洗手?；疽笫怯梅试砗土魉词?，范圍包括腕關(guān)節(jié)以上10cm左右，時(shí)間不應(yīng)少于45秒。徹底洗手不僅可以清除沾染的體液、血液等。還可以清除90%以上的病原體。戴手套工作的人，脫手套后同樣要洗手。因?yàn)樵诠ぷ鬟^(guò)程中手套上可能有細(xì)小的損傷而未察覺(jué)。緊急情況下，還可用氯已定醇反復(fù)搓揉雙手的各個(gè)部位。

二、防護(hù)措施中的另一重要措施是洗手。接觸每一三、防護(hù)中不可忽視的另一細(xì)節(jié)是脫各種隔離衣物應(yīng)在離開(kāi)污染區(qū)進(jìn)入半污染區(qū)時(shí)完成。脫前洗手，脫后要再洗一次手。脫衣要慢要輕，準(zhǔn)確投入收集桶（或帶），收集桶內(nèi)應(yīng)放含氯消毒液，不可遠(yuǎn)距離拋入收集袋，否則將使其表面可能污染的病原體再次飛揚(yáng)而受染?？谡謶?yīng)在洗手后最后摘除，要求與隔離衣等相同。去清潔區(qū)還應(yīng)再洗一次手。

三、防護(hù)中不可忽視的另一細(xì)節(jié)是脫各種隔離衣采集對(duì)象和采集人員采集對(duì)象：

不明原因肺炎病例。人禽流感待查病例、臨床診斷病例、確診病例。出現(xiàn)發(fā)熱等異常臨床表現(xiàn)的密切接觸者。其他需要排除人禽流感的病例。采集對(duì)象和采集人員采集對(duì)象：采集人員：在當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù)防控制機(jī)構(gòu)的指導(dǎo)下，由醫(yī)療機(jī)構(gòu)的醫(yī)生、護(hù)士負(fù)責(zé)門(mén)診、住院病人的標(biāo)本采集。當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù)防控制中心專(zhuān)業(yè)人員負(fù)責(zé)其他人群的標(biāo)本采集。采集人員：標(biāo)本采集種類(lèi)和要求：上呼吸道標(biāo)本：包括鼻拭子、鼻咽拭子、鼻咽抽取物、鼻洗液、咽漱液。最佳采集時(shí)間為發(fā)病后3天內(nèi)，一般不超過(guò)7天。下呼吸道標(biāo)本：包括呼吸道吸取物、支氣管灌洗液、胸水、肺組織活檢標(biāo)本。下呼吸道標(biāo)本最有利于禽流感病毒分離。

尸檢標(biāo)本：主要包括肺、氣管，條件允許下也可采集肝、腎、脾、心臟、腦、淋巴結(jié)等組織標(biāo)本。每一采集部位分別使用不同消毒器械，以防交叉污染；每種組織應(yīng)多部位取材，各部位應(yīng)取20～50g，淋巴結(jié)取2個(gè)。病人死亡后應(yīng)盡早進(jìn)行解剖，無(wú)菌采集。標(biāo)本采集種類(lèi)和要求：標(biāo)本采集種類(lèi)和要求：血清標(biāo)本：應(yīng)盡量采集急性期、恢復(fù)期雙份血清。急性期血樣的采集，不能晚于發(fā)病后7天；恢復(fù)期血樣在發(fā)病后第2、3、4周采集。如未能采集到急性期血樣，仍應(yīng)盡早采集第一份血樣，并在間隔2～4周后采集第二份血樣。采集量要求5ml，以空腹血為佳，建議使用真空采血管。病例診斷需雙份血清。其它標(biāo)本：可在病例發(fā)病后的7天內(nèi)采集糞便標(biāo)本。標(biāo)本采集種類(lèi)和要求：采樣液:

pH7.4～7.6HANK氏平衡鹽。

pH7.4～7.6的Eagle`sMEM培養(yǎng)液（不含牛血清，含0.5~1%的牛血清白蛋白V）。肉湯采樣液，多應(yīng)用于雞胚接種法分離病毒。為防止采樣液生長(zhǎng)細(xì)菌和真菌，在采樣液中需加入抗菌素，加入慶大霉素（其終濃度為0.1mg/ml）和抗真菌藥物（其終濃度為2ug/ml），或者加入青霉素（其終濃度為2000IU/ml）和鏈霉素（其終濃度為2000μg/ml）。加入抗菌素以后重新調(diào)節(jié)pH值為7.4，配制好以后，分裝每個(gè)采樣管4ml,-20℃凍存。采樣液:pH7.4～7.6HANK氏平衡鹽。采咽拭子的器材和容器:1采咽拭子的器材和容器:1采鼻拭子的器材和容器:2采鼻拭子的器材和容器:2采樣容器:上呼吸道標(biāo)本收集管：15ml螺口帶蓋塑料管(外螺旋、帶密封墊圈)；下呼吸道標(biāo)本收集管：15/50ml螺口塑料管(外螺旋、帶密封墊圈)；尸檢組織凍存管：15/50ml螺口塑料管(外螺旋、帶密封墊圈)血清保存管：2ml螺口帶蓋塑料管(外螺旋、帶密封墊圈)；采樣容器:上呼吸道標(biāo)本收集管：15ml螺口帶蓋塑料管(外螺呼吸道標(biāo)本的種類(lèi)及采集方法:咽拭子：可先讓患者深咳嗽幾下，然后用聚丙烯纖維頭拭子頭浸濕采樣液（為了提高病毒分離率，可以不蘸采樣液進(jìn)行干采）適度用力擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，應(yīng)避免觸及舌部。采完后迅速將拭子放入采樣管(內(nèi)含3～4ml采樣液)，尾部棄去。鼻拭子：將1根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。取另一根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子以同樣的方法采集另一側(cè)鼻孔。上述兩根拭子浸入同一含3ml采樣液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。

呼吸道標(biāo)本的種類(lèi)及采集方法:咽拭子：可先讓患者深咳嗽幾下，然呼吸道標(biāo)本的種類(lèi)及采集方法:呼吸道灌洗液：將收集器頭部從鼻孔或氣管插口處插入氣管（約30cm深處），注入5ml生理鹽水，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用采樣液涮洗收集器1次（亦可用小孩導(dǎo)尿管接在50ml注射器上來(lái)替代收集）。胸水:

在B超定位下進(jìn)行胸腔穿刺，抽取胸水5ml，置于無(wú)菌的塑料螺口管中。肺組織活檢標(biāo)本：在超聲或X線(xiàn)定位下,經(jīng)皮穿刺取肺組織活檢標(biāo)本,置于含3ml采樣液的塑料螺口管中。呼吸道標(biāo)本的種類(lèi)及采集方法:呼吸道灌洗液：將收集器頭部從鼻孔標(biāo)本包裝:標(biāo)本必須保存于大小合適、帶墊圈的外螺旋蓋的塑料管中，管外注明樣本編號(hào)、姓名及采樣日期。將保存標(biāo)本的塑料管放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封，每袋裝一份標(biāo)本。標(biāo)本有關(guān)信息填寫(xiě)“不明原因肺炎/人禽流感待查病例標(biāo)本送檢單”（表1），用另一塑料袋密封。標(biāo)本包裝:標(biāo)本必須保存于大小合適、帶墊圈的外螺旋蓋的塑料管中標(biāo)本送檢:1.上送標(biāo)本的滿(mǎn)足條件

所有檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性或可疑的原始標(biāo)本或分離物必須按照規(guī)定要求24小時(shí)內(nèi)送疾控中心復(fù)核和進(jìn)一步檢測(cè)。2．送檢的生物安全要求標(biāo)本放入專(zhuān)用運(yùn)輸箱內(nèi)，四周放置冰袋，空隙部分用具有吸水和緩沖性能的材料充填，所有運(yùn)送容器外必須具有生物危險(xiǎn)標(biāo)識(shí)。標(biāo)本的送應(yīng)遵循《可感染人類(lèi)的高致病性病原微生物菌毒種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》（中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部令第45號(hào)

）。3．送檢的程序

先與上一級(jí)疾控中心疾病控制與應(yīng)急處理辦公室聯(lián)系。標(biāo)本送檢:1.上送標(biāo)本的滿(mǎn)足條件表1不明原因肺炎/人禽流感待查病例標(biāo)本送檢單注：主要臨床表現(xiàn)：體溫填寫(xiě)最高溫度，其它欄符合的打“√”。采集人員：

送樣人：

采集單位：

送檢日期：20

年

月

日收樣人員：

收檢日期：20

年

月

日編號(hào)姓名性別年齡現(xiàn)住址發(fā)病日期標(biāo)本種類(lèi)標(biāo)本量采集日期主要臨床表現(xiàn)備注體溫咳嗽咽痛肺炎其他

表1不明原因肺炎/人禽流感待查病例標(biāo)本送檢單注：高致病性病原微生物危險(xiǎn)標(biāo)簽高致病性病原微生物制冷劑：

請(qǐng)勿自行打開(kāi)如有破損、滲漏或遺失請(qǐng)立即通知當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門(mén)聯(lián)系人：聯(lián)系電話(huà)：高致病性病原微生物危險(xiǎn)標(biāo)簽高收樣單位：

詳細(xì)地址：

郵政編碼：

聯(lián)系人：

聯(lián)系電話(huà)：

送樣單位：

詳細(xì)地址：

郵政編碼：

聯(lián)系人：

聯(lián)系電話(huà)：

高致病性病原微生物運(yùn)輸?shù)怯洷?/p>

收樣單位：快速檢測(cè)試劑(膠體金）使用要求必須使用經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)的快速試劑。試劑必須在有效期內(nèi)使用。推薦使用臨床評(píng)估質(zhì)量好并且近幾年連續(xù)考評(píng)結(jié)果穩(wěn)定的試劑（中國(guó)疾病預(yù)防控制中心網(wǎng)站）快速檢測(cè)試劑(膠體金）使用要求必須使用經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理實(shí)驗(yàn)記錄樣品數(shù)據(jù)資料主要有：樣品送樣單、樣品報(bào)告?zhèn)浞?，?yáng)性反應(yīng)樣品送上級(jí)實(shí)驗(yàn)室后確證實(shí)驗(yàn)反饋結(jié)果。質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)主要有：快速檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP），日常質(zhì)控品檢測(cè)結(jié)果、PT檢測(cè)結(jié)果回報(bào)成績(jī)。試劑數(shù)據(jù)主要有：試劑收到日期，廠商名稱(chēng)，批號(hào)，有效期，保存條件記錄等資料。實(shí)驗(yàn)記錄樣品數(shù)據(jù)資料膠體金檢測(cè)質(zhì)量控制快速檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)量控制按操作順序可分為:檢測(cè)前，檢測(cè)中檢測(cè)后膠體金檢測(cè)質(zhì)量控制快速檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)量控制按操作順序可分為:檢測(cè)前質(zhì)控樣品要求唯一編號(hào)，實(shí)驗(yàn)前仔細(xì)核對(duì)、檢查。在有兩人以上檢測(cè)的情況下，避免錯(cuò)位。檢測(cè)環(huán)境溫濕度，應(yīng)在試劑盒操作說(shuō)明書(shū)要求的范圍內(nèi)，試劑和樣品應(yīng)按要求存放，并做好記錄。檢查是否有足夠的試劑庫(kù)存,確證試劑在有效期內(nèi)，禁止使用過(guò)期試劑。每批實(shí)驗(yàn)如果應(yīng)用不同批號(hào)的試劑，應(yīng)做好記錄，并對(duì)不同批次的試劑進(jìn)行質(zhì)控。檢測(cè)前質(zhì)控樣品要求唯一編號(hào)，實(shí)驗(yàn)前仔細(xì)核對(duì)、檢查。在有兩人以檢測(cè)過(guò)程質(zhì)控準(zhǔn)備好試驗(yàn)區(qū)域，擺放必要器具。記錄樣品編碼、姓名、試劑名稱(chēng)及批號(hào)、操作者姓名等。核對(duì)樣品標(biāo)號(hào)，標(biāo)記，檢測(cè)，防止錯(cuò)號(hào)。收集并集中擺放全部待檢樣品，包括外部質(zhì)控品。按照試劑廠家提供的說(shuō)明書(shū)開(kāi)始操作。需要在冰箱保存的試劑，從冷藏環(huán)境中取出后放置室溫，平衡后再使用。剩余的試劑條應(yīng)立即放入自封袋中密封2－8℃保存?？梢栽谑覝貤l件下保存的試劑也應(yīng)避免高溫。建議每次最多做10個(gè)樣品，確保試紙條的編號(hào)與標(biāo)本編號(hào)的準(zhǔn)確對(duì)應(yīng)，防止錯(cuò)號(hào)和交叉污染。結(jié)果判定時(shí)，質(zhì)控帶必須出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)才能成立。如實(shí)驗(yàn)完成后未呈現(xiàn)質(zhì)控條帶，本次試驗(yàn)結(jié)果無(wú)效，樣品須重檢。同時(shí)，除每個(gè)檢測(cè)日做一次外部質(zhì)控品外，下列情況下也需加做外部質(zhì)控品：更換檢測(cè)人員時(shí);更換不同試劑批號(hào)時(shí);更換不同的試劑包裝時(shí);更換不同的試劑廠家時(shí)檢測(cè)過(guò)程質(zhì)控準(zhǔn)備好試驗(yàn)區(qū)域，擺放必要器具。檢測(cè)后質(zhì)控實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行判讀時(shí)，應(yīng)保證判讀地點(diǎn)光線(xiàn)充足。對(duì)于難以判讀的條帶，最好有2人判讀。復(fù)核樣品編號(hào)并填寫(xiě)試驗(yàn)結(jié)果。清潔并處理實(shí)驗(yàn)廢棄物。

發(fā)現(xiàn)試劑出現(xiàn)以下問(wèn)題，提示存在質(zhì)量隱患，應(yīng)