單克隆抗體(經(jīng)典試講)課件

1單克隆抗體1單克隆抗體生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈3教學(xué)內(nèi)容單克隆抗體的發(fā)現(xiàn)單克隆抗體的概念單克隆抗體的制備單克隆抗體的應(yīng)用3教學(xué)內(nèi)容4多克隆抗體的概念4多克隆抗體的概念5

傳統(tǒng)抗血清的交叉反應(yīng)專一性反應(yīng)沒(méi)有反應(yīng)交叉反應(yīng)+-+123AgA

xyzAgB1’20AgA’1231231235傳統(tǒng)抗血清的交叉反應(yīng)專一性反應(yīng)沒(méi)有反應(yīng)交叉反應(yīng)+-+16單克隆抗體技術(shù)發(fā)現(xiàn)以及原理1975年Kohler和Milstein首先報(bào)道，用細(xì)胞雜交技術(shù)，使經(jīng)綿羊紅細(xì)胞(SRBC)免疫的小鼠的脾細(xì)胞，與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，并由此創(chuàng)建了第一個(gè)B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞株，獲得了抗SRBC的單克隆抗體。這是免疫學(xué)，乃至醫(yī)學(xué)史上的一個(gè)里程碑。概述2002年發(fā)明單克隆抗體技術(shù)NobelPrizein19846單克隆抗體技術(shù)發(fā)現(xiàn)以及原理1975年Kohler和Mils發(fā)明單克隆抗體技術(shù)NobelPrizein19842002年發(fā)明單克隆抗體技術(shù)2002年8單克隆抗體的相關(guān)概念雜交細(xì)胞：在誘導(dǎo)物的作用下同一細(xì)胞或不同細(xì)胞間的融合，融合的細(xì)胞具有雙親本細(xì)胞的染色體和全部或部分特性。雜交瘤細(xì)胞：B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后產(chǎn)生的雜交細(xì)胞。8單克隆抗體的相關(guān)概念雜交細(xì)胞：在誘導(dǎo)物的作用下同一細(xì)胞或不單克隆抗體單克隆抗體是將產(chǎn)生抗體的細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，通過(guò)有限稀釋法及克隆化使雜交瘤細(xì)胞成為純一的單克隆細(xì)胞系而生產(chǎn)的。由于這種抗體是針對(duì)一個(gè)抗原決定簇的抗體，又是單一的B淋巴細(xì)胞克隆產(chǎn)生的，因此稱為單克隆抗體。它是結(jié)構(gòu)和特異性完全相同的高純度抗體。單克隆抗體單克隆抗體是將產(chǎn)生抗體的細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，通過(guò)

抗體-a-b-c-d-a-b-c-d抗原決定基BALB/cabbcd傳統(tǒng)抗體(抗血清)是所有抗體的混和

脾臟產(chǎn)生各種

B細(xì)胞免疫前要先把抗原作成乳劑免疫

抗原采血后可得傳統(tǒng)抗血清已建立之小鼠骨髓癌細(xì)胞株由脾臟收集B細(xì)胞抗原通常有多個(gè)抗原決定基免疫后的脾臟約在兩月內(nèi)注射五到八次AgX單克隆抗體的制備過(guò)程TK-HGPRT-抗體-a-b-c-d-a-b--d細(xì)胞融合-a-b-c-dAgXAgX’ELISAHAT篩選PEGCellfusionHybridomacells融合瘤細(xì)胞（Subcloning）

(確定只有一種細(xì)胞)d’dabcdabcd’+++++++-X-d-c-b-a+--dNS-1骨髓癌細(xì)胞Bcell脾細(xì)胞分株培養(yǎng)篩選篩選單抗傳統(tǒng)抗體(抗血清)試驗(yàn)專一性對(duì)抗原的反應(yīng)無(wú)法分辨完全不同d舊有抗原d’新的抗原單克隆抗體的制備過(guò)程-d細(xì)胞融合-a-b-c-dAgAgELISAHAT篩選PE單克隆抗體(經(jīng)典試講)課件單克隆抗體制備過(guò)程一、抗原與動(dòng)物免疫二、細(xì)胞融合三、雜交瘤細(xì)胞的篩選四、特異抗體的篩選五、單克隆抗體的大量制備先免后合，兩篩兩得單克隆抗體制備過(guò)程一、抗原與動(dòng)物免疫先免后合，兩篩兩得14優(yōu)點(diǎn)——和常規(guī)抗血清相比

1.特異性強(qiáng)：?jiǎn)慰寺】贵w是針對(duì)抗原分子表面抗原決定簇的，有人稱為“單特異性”。它是研究生物大分子和細(xì)胞表面細(xì)微結(jié)構(gòu)以及診斷治療疾病的有力工具。2.可大量生產(chǎn)，容易標(biāo)準(zhǔn)化：一旦獲得1株雜交瘤細(xì)胞株，就可以無(wú)限制地反復(fù)制備出相同特異性的單克隆抗體。由于來(lái)自同一株細(xì)胞，很容易標(biāo)準(zhǔn)化。3.用不純的抗原，可以制備出純的單克隆抗體。用這種抗體又可以提純抗原。

因?yàn)榫哂猩鲜鎏攸c(diǎn)，單克隆抗體應(yīng)用范圍很廣，幾乎滲透到生物醫(yī)學(xué)的每一個(gè)領(lǐng)域，在生物醫(yī)學(xué)研究，臨床醫(yī)學(xué)，軍事醫(yī)學(xué)和工業(yè)生產(chǎn)上都有重要的實(shí)用意義。14優(yōu)點(diǎn)——和常規(guī)抗血清相比1.特異性強(qiáng)：?jiǎn)慰寺】贵w抗體是對(duì)其抗原有極強(qiáng)專一性的魔彈或巡弋飛彈研究 以免疫轉(zhuǎn)印法檢測(cè)

特定抗原，蛋白質(zhì)的提純檢驗(yàn) 以ELISA偵測(cè)特定

病原體治療

以毒素連結(jié)抗體攻擊

病變細(xì)胞，腫瘤的導(dǎo)向治療，放射免疫顯像技術(shù)抗體是對(duì)其抗原有極強(qiáng)專一性的研究 以免疫轉(zhuǎn)印法檢測(cè)特FDA批準(zhǔn)了46種單克隆抗體藥物上市

2002年

29億美元

2011年500億美元

2015年680億美元FDA批準(zhǔn)了46種單克隆抗體藥物上市思考題1.單克隆抗體是來(lái)自誰(shuí)？如果直接給人注射，會(huì)有什么反應(yīng)？2.查找出至少3種單克隆抗體藥物及其適應(yīng)癥？思考題1.單克隆抗體是來(lái)自誰(shuí)？如果直接給人注射，會(huì)有什么反參考資料/article/43