酪蛋白的制備實驗報告

竭誠為您提供優(yōu)質文檔/雙擊可除酪蛋白的制備實驗報告篇一：酪蛋白的制備 生化實驗酪蛋白的制備一、目的1、學習從牛奶中制備酪蛋白的原理和方法。2、掌握等電點沉淀法提取蛋白質的方法。二、原理牛乳中的主要的蛋白質是酪蛋白，含量約為35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白質的混合物，等電點為4.7。利用等電點時溶解度最低的原理，將牛乳的ph調至4.7時，酪蛋白就沉淀出來。用乙醇洗滌沉淀物，除去脂類雜質后便可得到純酪蛋白。三、材料、試劑與器具（一）材料新鮮牛奶（一）試劑1、95%乙醇1200mL2、 無水乙醚1200mL3、0.2mol/Lph4.7醋酸——醋酸鈉緩沖液300ml先配A液與b液A液：0.2mol/L醋酸鈉溶液稱naAc?3h2o54?44g，定容至2000ml。b液：0.2mol/L醋酸溶液，稱優(yōu)純醋酸（含量大于99.8%）12.0g定容至1000ml。取A液1770ml,b液1230ml混合即得ph4.7的醋酸一—醋酸鈉緩沖液3000ml。4、 乙醇——乙醚混合液乙醇：乙醚=1：1（V/V）（二）器具1、離心機2、抽濾裝置3、 精密ph試紙或酸度計4、電爐5、 燒杯6、溫度計四、操作步驟（一）酪蛋白的粗提100mL牛奶加熱至40°C。在攪拌下慢慢加入預熱至40°C、ph4.7的醋酸緩沖液100mL.用精密ph試紙或酸度計調ph至4.7。將上述懸浮液冷卻至室溫。離心15分鐘（3000r/min）。棄去清液，得酪蛋白粗制品。(二)酪蛋白的純化1、 用水洗滌沉淀3次，離心10分鐘(3000r/min),棄去上清液。2、 在沉淀中加入30mL乙醇，攪拌片刻，將全部懸濁液轉移至布氏漏斗中抽濾。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀2次。最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。3、 將沉淀攤開在表面上，風干；得酪蛋白純品。準確稱重，計算含量和得率。含量：酪蛋白g/100mL牛乳(g%)式中理論含量為3.5g/100mL牛乳。五、注意事項1、 由于本法是應用等電點沉淀法來制備蛋白質，故調節(jié)牛奶液的等電點一定要準確。最好用酸度計測定。2、 精制過程用乙醚是揮發(fā)性、有毒的有機溶劑，最好在通風櫥內操作。3、 目前市面上出售的牛奶是經加工的奶制品，不是純凈牛奶，所以計算時應按產品的相應指標計算。六、實驗報告1、 根據實際操作，以流程圖形式總結酪蛋的制備方法。2、 合理分析實驗所得率七、思考題1、制備高產率純酪蛋白的關鍵是什么？2、試設計另一種提取酪蛋白的方法？篇二：實驗四、酪蛋白的制備實驗四、酪蛋白的制備一、目的1、學習從牛奶中制備酪蛋白的原理和方法。2、掌握等電點沉淀法提取蛋白質的方法。二、原理牛乳中的主要的蛋白質是酪蛋白，含量約為35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白質的混合物，等電點為4.7。利用等電點時溶解度最低的原理，將牛乳的ph調至4.7時，酪蛋白就沉淀出來。用乙醇洗滌沉淀物，除去脂類雜質后便可得到純酪蛋白。三、材料、試劑與器具（一）材料新鮮牛奶（一）試劑1、95%乙醇1200mL2、無水乙醚1200mL3、0.2mol/Lph4.7醋酸——醋酸鈉緩沖液3000ml先配A液與b液A液:0.2mol/L醋酸鈉溶液稱naAc?3h2o54.44g，定容至2000ml。b液：0.2mol/L醋酸溶液，稱優(yōu)純醋酸（含量大于99.8% 用冰醋酸也可以）24.0g定容至2000ml。取A液1770ml，b液1230ml混合即得ph4.7的醋酸一一醋酸鈉緩沖液3000ml。4、乙醇一一乙醚混合液乙醇：乙醚=1：1（V/V）（二）器具1、離心機2、抽濾裝置3、精密ph試紙或酸度計4、恒溫水浴箱5、燒杯四、操作步驟（一）酪蛋白的粗提10mL牛奶加熱至40°C。在攪拌下慢慢加入預熱至40°C、ph4.7的醋酸緩沖液10mL.用精密ph試紙或酸度計調ph至4.7。將上述懸浮液冷卻至室溫。離心8-10分鐘（3500-4000r/min）。棄去清液，得酪蛋白粗制品。（二）酪蛋白的純化1、 用水洗滌沉淀3次，離心5分鐘（3500-4000r/min），棄去上清液。2、 在沉淀中加入20mL乙醇，攪拌片刻，將全部懸濁液轉移至布氏漏斗中抽濾。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀2次。最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。3、將沉淀攤開在表面皿上，風干；得酪蛋白純品。（三）準確稱重，計算含量和得率。含量二酪蛋白g/10mL牛乳（g%）得率=1測得含量/理論含量）X100%式中理論含量為3.5g/100mL牛乳。五、注意事項1、 由于本法是應用等電點沉淀法來制備蛋白質，故調節(jié)牛奶液的等電點一定要準確。最好用酸度計測定。2、 精制過程用乙醚是揮發(fā)性、有毒的有機溶劑，最好在通風櫥內操作。3、 目前市面上出售的牛奶是經加工的奶制品，不是純凈牛奶，所以計算時應按產品的相應指標計算。六、實驗報1、根據實際操作，以流程圖形式總結酪蛋的制備方法。2、合理分析實驗所得率七、思考題1、制備高產率純酪蛋白的關鍵是什么？2、試設計另一種提取酪蛋白的方法？瓊州學院實驗項目卡生物科學與技術學院生化實驗室設日期___年__月__日實驗教師簽名 實驗員（管理員簽名 篇三：實驗酪蛋白的制備實驗四酪蛋白的制備一、實驗目的1、學習從牛奶中制備酪蛋白的原理和方法。2、掌握等電點沉淀法提取蛋白質的方法。二、實驗原理牛乳中的主要的蛋白質是酪蛋白，含量約為35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白質的混合物，等電點為4.7。利用等電點時溶解度最低的原理，將牛乳的ph調至4.7時，酪蛋白就沉淀出來。用乙醇洗滌沉淀物，除去脂類雜質后便可得到純酪蛋白。三、材料、試劑與儀器1.材料新鮮牛奶2.試劑（1）95%乙醇1200mL（2）無水乙醚1200mL（3）0.2mol/Lph4.7醋酸—醋酸鈉緩沖液300ml先配A液與b液A液：0.2mol/L醋酸鈉溶液稱naAc?3h2o54?44g，定容至2000ml。b液：.2mol/L醋酸溶液，稱優(yōu)純醋酸（含量大于99.8%）12.0g定容至1000ml。取A液1770ml，b液1230ml混合即得ph4.7的醋酸——醋酸鈉緩沖液3000ml。（4）乙醇一乙醚混合液乙醇：乙醚=1：1（V/V）儀器離心機、抽濾裝置、精密ph試紙或酸度計、電爐、燒杯、溫度計四、操作步驟1.酪蛋白的粗提100mL牛奶加熱至40°C。在攪拌下慢慢加入預熱至40°C、ph4.7的醋酸緩沖液100mL?用精密ph試紙或酸度計調ph至4.7。將上述懸浮液冷卻至室溫。離心15分鐘（3000r/min）。棄去清液，得酪蛋白粗制品。2.酪蛋白的純化用水洗滌沉淀3次，離心10分鐘(3000r/min),棄去上清液。在沉淀中加入30mL乙醇，攪拌片刻，將全部