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文檔簡介
微生物數(shù)量的測(cè)定
一、目的要求1.明確血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的原理2.掌握使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)的方法。二、基本原理
微生物個(gè)體生長的時(shí)間較短,很快進(jìn)入分裂繁殖階段,個(gè)體生長難以測(cè)定。它們的生長一般以繁殖即群體生長作為微生物生長的指標(biāo)。群體生長表現(xiàn)為細(xì)胞數(shù)目的增加或細(xì)胞物質(zhì)的增加。測(cè)定數(shù)目的方法有顯微鏡直接計(jì)數(shù)法、平板計(jì)數(shù)法、光電比濁法等。顯微鏡直接計(jì)數(shù)法是將小量待測(cè)樣品的懸浮液置于一種特別的具有確定面積和容積的載玻片上,于顯微鏡下直接計(jì)數(shù)的一種簡便、快速、直觀的方法。
三、實(shí)驗(yàn)材料酵母菌液顯微鏡、血球計(jì)數(shù)器3.蓋玻片、毛細(xì)管等血球計(jì)數(shù)板是一塊特制的載玻片,有四條豎槽和一條橫槽。橫槽兩邊的平臺(tái)上各有一個(gè)有九個(gè)大方格的方格網(wǎng),中間大方格為計(jì)數(shù)室:邊長為1mm,深為0.1mm,容積為0.1mm3(10-4ml)。計(jì)數(shù)室有兩種規(guī)格:一是分為16個(gè)中方格,每中方格中有25個(gè)小方格;另一種是分為25個(gè)中方格,每中方格有16個(gè)小方格。兩種都共有400個(gè)小方格。4-24-216小格×25大格計(jì)數(shù)室
25小格×16大格計(jì)數(shù)室
計(jì)數(shù)室的兩種刻度形式四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一.酵母菌數(shù)量的檢測(cè)(顯微鏡直接計(jì)數(shù)法)注意事項(xiàng):
取樣時(shí)先要搖勻菌液;加樣時(shí)計(jì)數(shù)室不可有氣泡產(chǎn)生。B.調(diào)節(jié)顯微鏡光線的強(qiáng)弱適當(dāng)。
1.取清潔無油的血球計(jì)數(shù)板,在計(jì)數(shù)室上面加蓋玻片。
2.取酵母菌液,搖勻,用滴管由蓋玻片邊緣滴一小滴,使菌液自行滲入,計(jì)數(shù)室內(nèi)不得有氣泡。3.靜止5min后,用低倍鏡觀察并將計(jì)數(shù)室移至視野中央。
4.在高倍鏡下計(jì)數(shù):隨機(jī)計(jì)數(shù)五個(gè)中格的平均值,然后求得每個(gè)中格的平均值。乘上
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