smilax定金的化學(xué)成分及其抗氧化活性

smilax定金的化學(xué)成分及其抗氧化活性

野生稻是百合科植物的一種干燥的幼苗，通常被稱為金剛藤，具有收斂、解毒和散瘀的功效。常用于治療風(fēng)濕性疼痛、跌倒、毆打損傷、胃腸炎和痢疾。主要成分有黃酮、類和肥皂。菝葜的醋酸乙酯部位在抗炎和抗腫瘤方面有著獨特的療效。為了尋找菝葜的抗炎、抗腫瘤活性成分,本實驗對菝葜乙醇提取物醋酸乙酯部位的化學(xué)成分及其抗氧化活性進行了系統(tǒng)研究。本研究從中獲得了7個化合物和1個混合物,分別鑒定為:cinchonainIb(Ⅰ)、catechin-(7,8-bc)-4β-(3,4-dihydroxyphenyl)-dihydro-2(3H)-pyranone(Ⅱ)、catechin-(5,6-e)-4β-(3,4-dihydr-oxyphenyl)-dihydro-2(3H)-pyranone(Ⅲ)和catechin-(5,6-e)-4α-(3,4-dihydroxyphenyl)-dihydro-2(3H)-pyranone(Ⅳ)的混合物、二氫山柰酚(Ⅴ)、二氫槲皮素(Ⅵ)、兒茶素(Ⅶ)、棕櫚酸(Ⅷ)、β-胡蘿卜苷(Ⅸ);抗氧化實驗結(jié)果表明,化合物Ⅰ～Ⅶ均具有較強的抗氧化活性。其中化合物Ⅰ～Ⅳ、Ⅶ、Ⅷ為首次從該植物中分離得到。1儀器、色譜和材料Perkin-ElmerSpectrumOneFT-IR紅外光譜儀(KBr壓片);BrukerAV400型核磁共振儀,TMS為內(nèi)標;FinniganMAT95型EI質(zhì)譜儀;Perkin-ElmerModel341旋光儀;JASCOJ-810圓二色光譜儀;UV-756MC紫外-可見分光光度計;ABTS[2,2′-azinobis(3-ethylbenzothiaoline-6-sulfonicacid),diammoniumsalt]自由基、Trolox(6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylicacid),均為美國Sigma公司產(chǎn)品,購自北京豐特斯化工材料有限公司;柱色譜和薄層用硅膠為青島海洋化工廠產(chǎn)品;反相硅膠和SephadexLH-20為FlukaBioChemika公司產(chǎn)品;其余試劑均為分析純,購自上?；瘜W(xué)試劑公司。菝葜藥材采自湖北鄖西縣,經(jīng)華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院張長弓教授鑒定為百合科菝葜屬植物菝葜SmilaxchinaL.的干燥根莖。2萃取-濃縮萃取菝葜根莖5.0kg粉碎后,用50%乙醇回流提取3次,每次1h,將提取液合并,減壓濃縮得浸膏。然后將浸膏混懸于3.0L蒸餾水中,依次用石油醚(3×3L)、醋酸乙酯(3×3L)進行萃取,將萃取液分別進行減壓濃縮得浸膏。醋酸乙酯部位40g經(jīng)氯仿-丙酮(20∶1→1∶2)梯度洗脫,再反復(fù)運用硅膠、反相硅膠、SephadexLH-20等色譜方法分離純化,得到化合物Ⅰ～Ⅸ。3化合物cihnonif化合物Ⅰ:C24H20O9,淺黃色粉末,[α]25D25D+10°(c0.18,MeOH);CD(c0.0024,MeOH),λ(Δε)211(-7.59),231(+7.76),252(-2.03),285(+1.43)nm;UVλΜeΟΗmaxMeOHmaxnm(lgε):218(4.47),282(3.84);IRνΚBrmaxKBrmax(cm-1):3338,1747,1618,1523,1450,1339,1282,1164,1112,1067,922,787;EI-MS(m/z):452[M]+(1),434(24),416(4),342(7),324(12),228(6),191(12),178(6),123(16),110(100),92(10),64(26);1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:6.81(1H,d,J=1.9Hz,H-2′),6.70(1H,d,J=8.1Hz,H-5″),6.67(1H,d,J=8.2Hz,H-5′),6.61(1H,d,J=2.2Hz,H-2″),6.60(1H,dd,J=8.1,1.9Hz,H-6″),6.52(1H,dd,J=8.2,2.2Hz,H-6′),6.21(1H,s,H-6),4.84(1H,s,H-2),4.41(1H,m,H-β),4.18(1H,brs,H-3),2.95(1H,dd,J=16.0,7.0Hz,H-α),2.92(1H,dd,J=15.5,4.3Hz,H-4),2.80(1H,dd,J=15.5,3.0Hz,H-4),2.79(1H,dd,J=16.0,5.0Hz,H-α);13C-NMR(100MHz,CD3OD)δ:80.6(C-2),67.4(C-4),29.7(C-4),105.7(C-4a),157.7(C-5),96.9(C-6),152.5(C-7),106.6(C-8),154.0(C-8a),38.7(C-α),35.6(C-β),171.3(C=O),132.2(C-1′),115.5(C-2′),146.2(C-3′),146.4(C-4′),116.4(C-5′),119.9(C-6′),135.7(C-1″),115.8(C-2″),145.6(C-3″),146.8(C-4″),117.1(C-5″)。以上數(shù)據(jù)與文獻對照,鑒定化合物Ⅰ為cinchonainIb?；衔铫?C24H20O9,淺黃色粉末,[α]20D-78°(c0.18,MeOH);UVλΜeΟΗmaxnm(lgε):226(4.14),282(3.95);IRνΚBrmax(cm-1):3338,1747,1618,1523,1448,1282,1163,1112,1057,1015,817;EI-MS(m/z):452[M]+(2),434(8),342(2),324(5),228(4),191(7),178(8),123(13),110(100),92(22),64(70);1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:6.80(1H,d,J=1.9Hz,H-2′),6.68(1H,m,H-6″),6.67(1H,d,J=8.2Hz,H-5″),6.65(1H,d,J=2.2Hz,H-2″),6.59(1H,d,J=8.23Hz,H-5′),6.52(1H,m,H-6′),6.21(1H,s,H-6),4.65(1H,d,J=7.0Hz,H-2),4.39(1H,m,H-β),3.99(1H,m,H-3),3.00(1H,dd,J=16.0,7.1Hz,H-α),2.88(1H,dd,J=17.0,6.4Hz,H-4),2.79(1H,dd,J=16.0,5.0Hz,H-α),2.60(1H,dd,J=17.0,8.0Hz,H-4);13C-NMR(100MHz,CD3OD)δ:83.2(C-2),68.7(C-3),28.5(C-4),106.2(C-4a),157.3(C-5),96.8(C-6),152.6(C-7),106.4(C-8),153.4(C-8a),39.0(C-α),35.8(C-β),171.2(C=O),132.1(C-1′),115.5(C-2′),146.4(C-3′),146.5(C-4′),116.7(C-5′),120.1(C-6′),135.7(C-1″),115.6(C-2″),145.6(C-3″),146.7(C-4″),117.0(C-5″),120.0(C-6″)。以上數(shù)據(jù)經(jīng)與文獻對照,鑒定化合物Ⅱ為catechin-(7,8-bc)-4β-(3,4-dihydroxyphenyl)-dihydro-2(3H)-pyranone。化合物Ⅲ和Ⅳ:灰白色粉末,UVλΜeΟΗmaxnm(lgε):220(4.56),283(4.06);IRνΚBrmax(cm-1):3309,1750,1633,1607,1522,1445,1283,1240,1166,1119,1060,1003,817,790;EI-MSm/z:452[M]+(2),123(3),110(100),92(12),64(32);1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:6.91(1H,brs,H-2′),6.82(1H,d,J=8.0Hz,H-5′),6.77(1H,dd,J=8.0,2.0Hz,H-6′),6.73(1H,d,J=8.2Hz,H-5″),6.66(1H,brs,H-2″),6.54(1H,dd,J=8.0,2.2Hz,H-6″),6.26(1H,s,H-8),4.69(1H,d,J=7.6Hz,H-2),4.66(1H,m,H-β),4.09(1H,m,H-3),3.10(1H,m,H-α),3.00(1H,dd,J=16.0,5.5Hz,H-4),2.90(1H,m,H-α),2.67(1H,dd,J=16.0,8.4Hz,H-4);13C-NMR(100MHz,CD3OD)δ:82.4/82.6(C-2),67.3/67.4(C-3),28.0(C-4),101.4(C-4a),151.4(C-5),106.3/106.4(C-6),153.8(C-7),99.0(C-8),155.20/155.23(C-8a),37.5(C-α),34.36/34.44(C-β),167.7(C=O),131.4(C-1′),114.8(C-2′),145.4(C-3′),145.5(C-4′),115.5(C-5′),119.6/119.7(C-6′),134.48/134.51(C-1″),114.6(C-2″),144.4(C-3″),145.6(C-4″),115.8(C-5″),118.7(C-6″)。上述UV、IR和NMR數(shù)據(jù)與化合物Ⅰ和Ⅱ的數(shù)據(jù)十分相似,但在13C-NMR譜中有部分碳信號成對出現(xiàn),用HPLC進行純度分析后發(fā)現(xiàn),化合物色譜峰頂端分叉,表明該化合物是由2個結(jié)構(gòu)非常類似的化合物組成的混合物。以上數(shù)據(jù)經(jīng)與文獻對照,確定Ⅲ和Ⅳ分別為catechin-(5,6-e)-4β-(3,4-dihydroxyphenyl)-dihydro-2(3H)-pyranone和catechin-(5,6-e)-4α-(3,4-dihydroxyphenyl)-dihydro-2(3H)-pyranone?；衔铫?白色粉末,UV、EI-MS、1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)經(jīng)與文獻對照,化合物Ⅴ鑒定為二氫山柰酚?；衔铫?白色粉末,[α]20D+28°(c0.08,MeOH);UV、EI-MS、1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)經(jīng)與文獻對照,化合物Ⅵ鑒定為二氫槲皮素。化合物Ⅶ:白色粉末,[α]25D-10°(c0.13,MeOH);UV、EI-MS、1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)經(jīng)與文獻對照,化合物Ⅶ鑒定為兒茶素?；衔铫?白色粉末,EI-MS、1H-NMR數(shù)據(jù)經(jīng)與文獻對照,化合物Ⅷ鑒定為棕