免疫學 11測定微生物生長繁殖的方式

第一節(jié)測定生長繁殖的方法生長——細菌群體數量的增長，不是個體體積的增長。提問：為什么這里不考察細菌個體的生長呢？個體太小，難觀察計量群體細菌對環(huán)境產生影響各類細菌都是傾向于群居（物以類聚）一山不容二虎提問：弱勢生物的群居優(yōu)勢是什么？生存狀況提高，攻防具佳（攻）群居的細菌獲得營養(yǎng)的能力大大高于游離的細菌，（防）群居的細菌不易被天敵傷害，還能釋放類似外激素的調節(jié)因子，使群體主動適應環(huán)境的變化，可有性生殖；團結就是力量外界因素引起的細菌數量的增加、停滯、衰減等變化。提問：如何研究呢？

測菌數量變化與外因的關系細菌群體力量改變環(huán)境通常都是將細菌群體作為研究對象，考察細菌群體的生長規(guī)律——“生、老、病、死”。提問：細菌群的“生、老、病、死”表現為何呢？一、細菌生長（數量）測定方法（一）直接計數法

借助顯微鏡觀察測定優(yōu)點：快速提問:有哪些缺點?缺點：不能區(qū)分細菌的死活分四種1.涂片染色法1視野菌液(ml)＝(0.01ml

／1cm2)*視野面積(cm2)2.計數器(血球計數板）測定法0.052cm2×250.1ml菌液提問：數了125個小格中有90個細菌，樣品中的細菌濃度是多少？(90個÷125)*

400

/0.1ml=2880個/ml適用范圍：測定個體較大的細菌或原生動物細菌個體若太小、過多，由于每一小格中細菌層層疊加，相互遮擋，難以準確計數。數數細菌（或其他微生物或細胞）數目，（一般數125個小格），折算樣品細菌濃度；3.比例計數法比例——樣品菌液與等體積的血液混合，觀測二者比例提問：如果平均每個視野中細菌數量/紅血球的數量比例為5.5：1，則細菌數量=？5.5×400萬個/ml=2.2×107個/mL樣品紅血球數已知(男性400~500萬個／ml，女性350~450萬個／ml)，平均400萬個/ml細菌紅血球4．比濁計數法濁——細菌懸浮液的濁度提問：如何定量二者關系呢？細菌不完全透光，一定范圍內菌溶液的混濁度與菌數量成正比4．比濁計數法濁——細菌懸浮液的濁度細菌不完全透光，一定范圍內菌溶液的混濁度與菌數量成正比

（1）制標準曲線（OD~No）（2）測菌液濁度，查圖表得出細菌數量濁度儀或721分光光度儀（二）間接計數法(活菌計數法)提問：前述方法中計數的不都是活菌，如何分辨菌死活？繁殖提問：細菌繁殖的可見現象是什么？產生菌落（固體培養(yǎng)基培養(yǎng)）、菌液混濁（液體培養(yǎng)基培養(yǎng)）計數原理：一個細菌可繁殖成一個菌落或一群細菌.缺點：慢

分固體培養(yǎng)法和液體培養(yǎng)法無菌水1.

稀釋平板計數法—固體培養(yǎng)法第一步：菌樣巧妙稀釋得到不同稀釋度（10-x）菌液菌樣被無菌水不同稀釋倍率后平板培養(yǎng)圖

10-210-3

10-410-5

各取1ml，均勻涂布于冷固體培養(yǎng)基平板上。第三步：培養(yǎng)稀釋度過低，菌落密