白烏鱧的人工繁殖試驗(yàn)

摘要：白烏鱧為底棲魚類，在水溫8～10℃時(shí)，經(jīng)4～5d的冬眠期后，開始攝食。白烏鱧有較強(qiáng)的趨光性，喜棲息于池塘內(nèi)靜水、深水處或水草茂盛地。白烏鱧的繁殖季節(jié)為4～5月，此時(shí)水溫20～25℃開始產(chǎn)卵。白烏鱧的產(chǎn)卵適溫為15～28℃之間。由此，筆者在自然水溫24～25℃時(shí)，采用HCG+LRH-A2次注射，效果持續(xù)20～26h。雌雄配對(duì)比例（1∶1）時(shí)，其受精效果更佳。在24～25℃的溫度下，孵化36～40h。苗種在出膜后45d培養(yǎng)，體長度在4.3～8.6cm，試驗(yàn)結(jié)果表明，人工繁殖方式更加有利于提升白烏鱧的繁殖率以及魚苗的成活率。關(guān)鍵詞：白烏鱧；人工繁殖；試驗(yàn)1前言白烏鱧又稱白甲烏鱧、白烏魚，俗稱白烏棒，屬于鱸形目、鱧科（Ichthyidae）、烏鱧屬魚類，其體長而側(cè)扁，頭寬扁，口端位，唇肥厚而游離，上頜前部呈尖形，下頜前部呈楔形。白烏鱧肉多，刺少，味道好，具有較高的營養(yǎng)價(jià)值。白烏鱧的粗蛋白質(zhì)和粗脂肪分別為20.69%和0.76%。白烏鱧具有促進(jìn)人體生肌補(bǔ)血、愈合傷口、祛濕利尿、催乳等作用。并且白烏鱧具有良好的適應(yīng)性、良好的抗缺氧能力、較少的疾病，能在0～40℃的環(huán)境中存活，由此其適宜多種繁殖方式。由此，通過人工繁殖的方式提升其繁殖率和存活率將具有必要性。2試驗(yàn)材料和方法2.1親魚收集與培育先引進(jìn)白烏鱧親魚30余尾，個(gè)體大小為450～1200g。從四川內(nèi)江引進(jìn)，經(jīng)人工授精獲得。于2017年3月9日進(jìn)行人工繁殖試驗(yàn)。白烏鱧的孵化池為水泥池，水深1.5～2m，面積50cm×50cm，水質(zhì)清新。將魚種放養(yǎng)在水泥池中4～5d后，再換水至池水深度1/2左右（10～15cm），并在池塘底部鋪上一層底泥，以利于水蚯蚓等活餌料的培育及白烏鱧生長。同時(shí)在池中套養(yǎng)部分鰱鳙魚種。池中種植水花生，面積約1000～1500m2。白烏鱧親魚放養(yǎng)后的第1個(gè)月，不投餌，由池中投放人工配合飼料。水溫高于12℃時(shí)，每周向池底潑灑生石灰10～15kg/667m2；水溫低于10℃時(shí)，不施肥。當(dāng)水溫低于8℃時(shí)，投喂少量碎魚肉、蔬菜類或冰凍的熟蛋黃和魚糜。當(dāng)水溫高于15℃時(shí)，將魚分成兩組進(jìn)行飼養(yǎng)：一組飼養(yǎng)1個(gè)月后換水至池水深度1/2（5～10cm）左右時(shí)投喂鮮活的水蚯蚓；另一小組不投餌。在溫度超過12℃的情況下，可以將野生雜魚或劣質(zhì)幼魚投入親魚池。三月上旬，添加泥鰍以提高白烏的性腺發(fā)育，其投餌率約為體重4%。開春后，每隔半個(gè)月，就會(huì)對(duì)池水進(jìn)行一次沖洗，以保證水質(zhì)的優(yōu)質(zhì)性。2.2催產(chǎn)2.2.1親魚選擇繁殖季節(jié)（池塘水溫24～25℃），此時(shí)水溫在25℃以上時(shí)（4月下旬）開始出現(xiàn)性成熟個(gè)體。產(chǎn)卵時(shí)間一般為4～5月。為保證親魚質(zhì)量，我們挑選了體質(zhì)健壯，無傷病的親魚。本試驗(yàn)選擇體長5cm以上的雌魚做親魚，每尾雌魚約產(chǎn)卵200粒。在3月9日對(duì)雌魚性腺發(fā)育情況進(jìn)行檢查，以保證親魚性腺發(fā)育正常。2.2.2藥物注射催產(chǎn)藥選擇HGC+LRH-A2，分別在胸鰭基底2次進(jìn)行，第一次注射1/3，第二次注射間隔12h。雌性魚體內(nèi)注入HCG1500～2000IU/kg體重，LRH-A2～9微克，雄性則減半。2.2.3產(chǎn)卵與孵化第一針注入親魚后，將雌、雄分別置于水泥缸內(nèi)。在第二次注射后，將親魚按照母體1：1和4∶1的比例分別放置在80cm×80cm×100cm的水泥池內(nèi)。池塘中放入棕絲線或編織布?jí)K制成的產(chǎn)卵，池口用網(wǎng)片蓋?。ǚ乐固用摚笞屍溥M(jìn)行自然產(chǎn)卵。產(chǎn)卵后10～12h，用碗將卵子輕輕吸水，置于24～25℃、21～22℃的塑料盆內(nèi)，靜水孵出。（1）卵裂期受精50min后，第一次經(jīng)裂就開始了。在胚盤的正上方，有一條分裂溝，胚盤分裂為兩個(gè)類似的小球，稱為2-細(xì)胞階段。第二次分裂在受精1h19min后開始，隨后細(xì)胞不斷分裂，形成4-細(xì)胞、8細(xì)胞、16細(xì)胞、32細(xì)胞、64細(xì)胞、128細(xì)胞直至多細(xì)胞。最初的裂隙是由兩個(gè)相同的細(xì)胞組成的。之后的2～4次也是經(jīng)裂，5次為緯裂，更深的部分用肉眼無法分辨。最終，在卵裂的過程中，裂粒已經(jīng)無法計(jì)數(shù)。此后，受精卵開始發(fā)育，到受精3h53min。（2）囊胚期受精4h28min后，胚胎開始發(fā)育。隨著卵的破裂，細(xì)胞的數(shù)量也在不斷的增長，細(xì)胞的數(shù)量也在不斷的減少，在蛋黃的頂部，形成了一個(gè)半圓的凸起。受精卵在受精4h53min后進(jìn)入囊胚中期，胚層逐漸變薄，逐漸向下。受精卵在受精6h18min后進(jìn)入囊胚后期，胚層明顯降低。白烏鱧的囊胚發(fā)育時(shí)間為2h25min。（3）原腸胚期受精卵在受精7h48min后即開始發(fā)育。雖然細(xì)胞仍在繼續(xù)分裂，但是有一個(gè)重大的改變，那就是在原腸的作用下，從下包的作用，將胚泡上的細(xì)胞包住。胚層的細(xì)胞下包約1/植株極；在受精12h35min后，胚層覆蓋了2/3的胚胎表面，這時(shí)為原腸期。受精17h43min，胚層下覆3/4，表明受精卵已進(jìn)入原腸后期。原腸胚期為11h25min。（4）神經(jīng)胚期在受精18h48min后，胚胎的外形開始顯現(xiàn)，在胚盾前面有一塊神經(jīng)板，胚盾前面的部位逐漸膨脹，并開始發(fā)育成腦泡的原基（參見第293頁彩色圖片1Q）。胚體的持續(xù)延長是神經(jīng)細(xì)胞發(fā)育過程中發(fā)生的一種顯著的改變。白烏鱧的神經(jīng)胚發(fā)育時(shí)間為1h5min。2.3魚苗培育用1.2m直徑的塑料容器培養(yǎng)小魚。5d后，以輪蟲為誘餌；一周后，用枝角類飼料；在體長2cm以后，用水蚯蚓喂養(yǎng)；分塊開始用小魚（麥穗魚，魚身魚皮等）。將平均2cm長的白鮭置于微水流的水泥缸中培養(yǎng)。3白烏鱧的人工繁殖試驗(yàn)要點(diǎn)3.1白烏鱧雌雄與性成熟度的辨識(shí)一般的烏鱧在繁殖季節(jié)可以根據(jù)體色的差異來辨別，雄性的體色暗，胸腹的黑色，腹鰭至生殖孔之間有顯著的條紋。白烏鱧的體色很難分辨雌雄，只能通過腹部和生殖孔的特征來辨別。雌性成熟的雌性烏鴉腹部脹大，乳房圓潤，卵巢外形清晰，生殖孔略帶紅色，略有凸起，呈三角形；探卵：卵子為桔黃色或桔紅色，圓潤、大小一致。雄性白烏種體形細(xì)長，腹部不大，生殖孔狹窄，通常無法擠出精子。3.2受精卵的孵化3.2.1受精卵的特征白魚魚卵為浮性卵，成熟卵徑1.45～1.90mm，其中含有一較大的油珠，其油珠約為1.20mm；經(jīng)吸水膨脹處理后，卵體直徑可達(dá)到1.61～2.20mm。受精卵在初期呈金黃色，透明，并隨胚體的生長而由淡灰色直至暗灰色；而不受精卵則從金黃色到淡黃色，再到白色，甚至是長水霉。在24℃的孵育溫度下，15～16h后，可以清楚地分辨出受精卵與非受精卵。3.2.2孵化效果受精卵于24～25℃的靜水中孵出，36～40h后成膜。在出膜時(shí)，胚體扭曲，由頭或尾從卵膜中擠出來。在21～22℃的靜水條件下，幼體的成膜時(shí)間可延長50h以上，且幼體畸形率高，死亡率較高，建議白烏鱧孵化水溫以25℃為宜。3.2.3提高孵化率的技術(shù)關(guān)鍵（1）在產(chǎn)卵后10h內(nèi)，盡可能不要移動(dòng)或移動(dòng)受精卵，避免對(duì)胚胎的發(fā)育造成不良的影響；（2）及時(shí)清理病蟲，避免發(fā)生水霉病的發(fā)生；（3）在受精率較低的情況下，要減少產(chǎn)卵量；（4）在靜止?fàn)顟B(tài)下，每d更換2次水，以保證水的新鮮；（5）白烏鱧的卵是一種漂浮的蛋，應(yīng)避免強(qiáng)烈的光照，以免造成胚胎死亡；（6）在孵育期間，用5g/m3的孔雀石綠溶液浸泡魚卵1～2次，每次10～15min。3.3仔魚發(fā)育與習(xí)性觀察剛出膜仔魚身長約4.0mm，身體呈黑色，呈蝌蚪形，沿著盆底側(cè)躺，不時(shí)地在水中游動(dòng)。幼魚在離殼1d后，體長約5.0mm，身體逐漸平躺，時(shí)而尾巴搖擺，頭部朝下，再慢慢浮出水面。幼魚出膜后2d，體長6.2mm，口部及鰓裂出現(xiàn)，幼魚成群結(jié)隊(duì)，在壞蛋或浮游物中潛伏。出膜3d后，魚身體直立，水平移動(dòng)，懼光，聚于陰影中。成魚后5d，體長8.5mm，成群的魚苗在水底5～10cm的位置上游動(dòng)，這時(shí)卵黃囊僅剩下1/4～1/5，用輪蟲作為誘餌。7d后，幼魚全長11.0mm，用樹枝角類作為餌料，這時(shí)幼魚的顏色開始變淡，對(duì)聲音十分敏感。離殼10d后，體長13.8mm左右，幼體的卵黃囊逐漸消失，群聚能力減弱，開始在盆底活動(dòng)。成蟲后15d，體長18.6mm，體色由上至下開始變?yōu)榘咨?；此時(shí)，在缺乏食物的情況下，出現(xiàn)了自相殘殺的現(xiàn)象，發(fā)現(xiàn)有少數(shù)幼魚的鰓蓋和尾巴受到了傷害。出膜20d后，體長24.0mm左右，鱗片逐漸成形，形似成體。3.4魚種培育本研究采用20～23℃、25～28℃的水泥水槽，以50～60尾/m3的密度，以水蚯蚓和小雜魚作為飼料。20d后，在25～28℃的溫度條件下，白烏賊的平均長度為6.5cm；而在20～23℃的溫度范圍內(nèi)，長度為5.1cm。結(jié)果表明，25～28℃的水溫適宜于白烏鱧的生長。飼料的投放是培養(yǎng)魚類的重要環(huán)節(jié)。（1）白烏鱧是夜間捕食的魚類，所以以晚上為主要誘餌。（2）白烏鱧種喜歡吃新鮮的動(dòng)物飼料，宜以麥穗魚、魚條、魚皮等小魚作為飼料，也可加入新鮮魚糜，每日喂魚重量的5%～8%。（3）堅(jiān)持“定時(shí)、定量、質(zhì)、位”“四定”的投餌法，白烏鱧貪吃、暴飲暴食，所以一次投餌不能過多，否則會(huì)導(dǎo)致食物過多而導(dǎo)致死亡。在培育魚種時(shí)，要注意保持苗種的規(guī)格，盡量避免自相殘殺。3.5器官系統(tǒng)發(fā)生階段3.5.1腦泡形成期在受精22h58min后，腦組織的末端出現(xiàn)了一個(gè)小泡?，F(xiàn)在可以清晰地看到胚胎的頭部和尾部，在胚胎的背部，還能看到一些黑色的斑點(diǎn)。3.5.2視囊形成期在受精25h3min后，視囊開始發(fā)育，呈長卵形。3.5.3嗅板形成期受精25h58min后，嗅盤在視囊下面顯現(xiàn)，其體積較大，呈圓形。3.5.4尾芽期在受精27h3min后，在胚胎的末端腹面形成一個(gè)錐形的細(xì)胞，這是一種叫做尾芽的東西。尾芽原基對(duì)魚尾的發(fā)育起著重要作用。尾芽位于胚體的后部，呈圓錐形，可以看到球形的眼囊。3.5.5晶體出現(xiàn)期受精28h5min后，一圓形結(jié)晶在眼杯口處形成。在耳囊的下面有一個(gè)鰓板（可以看到長的卵形凸出），尾部和胚胎的長軸形成銳角。3.5.6心臟出現(xiàn)期在受精29h8min后，其被排列在一束脊髓和卵黃囊上，并形成一系列的細(xì)胞，這就是心臟的原基。此時(shí)，白烏鱧背鰭已露了出來，腦徑也開始擴(kuò)大。3.5.7鰭褶形成期受精30h8min后，胚胎背面有鰭狀物。尾部和卵黃囊的部分分離，尾鰭的褶皺清晰可見。3.5.8肌肉效應(yīng)期受精31h18min后，胚胎表面常常會(huì)有輕微的顫動(dòng)，這是一個(gè)肌肉反應(yīng)期。3.5.9心跳期在受精33h28min后，在卵黃囊頭端的脊索下方可見，并呈淡淡的波動(dòng)，并逐漸增強(qiáng)。3.6出膜期3.6.1出膜前期受精卵繼續(xù)生長，尾巴微微抬起，胚胎在卵膜中來回旋轉(zhuǎn)，尾巴的肌肉顫動(dòng)得更加劇烈，形成了泄殖腔。3.6.2出膜期在受精41h48min后，依次發(fā)生卵泡破裂。剛出膜的仔魚尚未能游泳，其卵黃囊是其養(yǎng)分的主要來源。4人工繁殖催產(chǎn)試驗(yàn)效果分析HCG+LRH-A2可以在24～25℃的溫度下誘導(dǎo)白鯽魚的產(chǎn)卵，效果持續(xù)20～26h。結(jié)果表明，在雌雄配對(duì)（1∶1）的兩池中，雌性均能產(chǎn)卵并進(jìn)行受精。兩個(gè)組（4：1）組雖然都產(chǎn)蛋，但均無受精，一池2只母魚產(chǎn)卵，促產(chǎn)成功率50%，一只母魚產(chǎn)卵，促產(chǎn)成功率為25%。結(jié)果表明，725g的雌魚產(chǎn)卵約6000枚。說明白烏鱧催產(chǎn)時(shí)，以雌、雄配對(duì)配的催產(chǎn)效果更好，而群配對(duì)產(chǎn)卵和受精不利。5討論（1）結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)的幼魚在孵化后的體液和其他同類魚的器官組織有很大的差別。幼魚在孵出后第1d，背部、腹部和尾部有透明的鰭褶，肛管尚未與外界連通，以吸取卵黃囊中的養(yǎng)分為主；幼魚在出膜后第2d，身體略微透明，可見到幼魚魚眼內(nèi)的黑色素細(xì)胞，卵黃囊縮小，排殖口凹陷；從3d起，體色逐漸加深，也能看到幼魚的卵黃囊被逐步消耗殆盡；第4d可見眼球；第5d時(shí)，魚體生長呈負(fù)向生長；孵化7～8d后，體內(nèi)的黑色素會(huì)減少，體表也會(huì)出現(xiàn)白色。白化是由多種因素造成的，不同種類的魚種和同一種類的不同個(gè)體誘發(fā)的白化機(jī)理也不盡相同。有關(guān)白烏黑的原因，尚需進(jìn)一步深入探討其DNA序列及染色體進(jìn)化機(jī)制。（2）利用