醫(yī)學微生物學逆轉(zhuǎn)錄病毒PPT幻燈片

第33章逆轉(zhuǎn)錄病毒逆轉(zhuǎn)錄病毒科RNA腫瘤病毒亞科慢病毒亞科泡沫病毒亞科

共同特性①球形，直徑為80~120

nm,包膜表面有刺突。②基因組有兩條相同的單正鏈RNA，病毒體含

反轉(zhuǎn)錄酶和整合酶。③復制有獨特的反轉(zhuǎn)錄過程，病毒DNA整合到細胞DNA中，構(gòu)成前病毒。④具有g(shù)ag、pol和env3個結(jié)構(gòu)基因和多個調(diào)節(jié)基因。⑤宿主細胞受體決定病毒的組織嗜性，成熟病毒以芽生方式釋放。HIV與AIDS人類免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiencyvirus，HIV）獲得性免疫缺陷綜合征（acquiredimmunodeficiencysyndrome，AIDS）艾滋病即為AIDS的音譯發(fā)現(xiàn)歷史1981年6月美國CDC首次報道1983年和1984年從AIDS患者分離到病毒1986年正式稱為人類免疫缺陷病毒

AglobalviewofHIVinfection33millionpeople(33~36million)livingwithHIV,2007共計:3330萬（3140萬~3530萬）

西歐和中歐

82萬

北非和中東46萬次撒哈拉非洲2250萬

東歐和中亞

140萬南亞和東南亞410萬

大洋洲5.7萬北美150萬加勒比海地區(qū)24萬拉美140萬

東亞77萬2009年底估計成人與兒童HIV/AIDS存活人數(shù)球形顆粒1.HIV形態(tài)與結(jié)構(gòu)1.HIV形態(tài)與結(jié)構(gòu)RNAP7（核衣殼蛋白）整合酶蛋白酶脂蛋白包膜逆轉(zhuǎn)錄酶細胞膜HLA抗原(包膜表面剌突)gP120gP41包膜糖蛋白(跨膜蛋白)（內(nèi)膜蛋白）

P17P24

（衣殼蛋白）一、生物學性狀核心2條單正鏈RNA酶類逆轉(zhuǎn)錄酶整合酶蛋白酶衣殼：衣殼蛋白p24內(nèi)層：內(nèi)膜蛋白（P17）包膜：脂質(zhì)雙層gp120易變異與CD4+受體結(jié)合gp41：與C膜融合，感染有關(guān)病毒基因組基因組全長9.2KB兩端含長末端重復序列（LTR）3個結(jié)構(gòu)基因（env、pol、gag）6個調(diào)節(jié)基因（tat、rev、nef、vif、vpr和vpu）

單正鏈RNA，有3個結(jié)構(gòu)基因以及6個調(diào)節(jié)基因提高HIV的復制能力和感染性

NefNef調(diào)節(jié)mRNA的剪接和促進mRNA轉(zhuǎn)運至細胞質(zhì)Revrev反式激活蛋白，激活HIV基因的轉(zhuǎn)錄Tat調(diào)節(jié)基因tat使病毒吸附于細胞表面介導病毒包膜與宿主細胞膜融合gp120gp41env有反轉(zhuǎn)錄酶活性和DNA聚合酶活性水解RNA：DNA中間體中的RNA鏈切割前體蛋白使病毒DNA與細胞DNA整合反轉(zhuǎn)錄酶RNA酶H蛋白酶整合酶pol衣殼蛋白和核衣殼蛋白內(nèi)膜蛋白p24和p7p17結(jié)構(gòu)基因gag蛋白質(zhì)的功能編碼蛋白基因17逆轉(zhuǎn)錄病毒(Retroviruse)VRNADNA:RNAdsDNA整合于宿主DNAmRNA子代RNA結(jié)構(gòu)蛋白水解活化逆轉(zhuǎn)錄酶藥物作用的靶18Reversetranscription:RNA

DNA19Integration:DNAprovirus

Hostgenome,ViruseslatencyphaseIntegrationsitesareessentiallyrandominregardtohost'scellularDNA,butpreciseinregardtoviralDNA.20Reactivation,TranscriptionHIV復制+ssRNA+ssRNA:-ssDNAssDNA:+ssDNA+ssRNA

HIV的Gp120與細胞表面的CD4結(jié)合病毒包膜與細胞膜融合病毒進入細胞病毒脫殼轉(zhuǎn)譯病毒蛋白裝配釋放一、生物學性狀吸附侵入逆轉(zhuǎn)錄基因組整合與表達釋放變異性*HIV的顯著特點之一是它的高度變異性，HIV的反轉(zhuǎn)錄酶無校正功能、錯配性高是導致HIV基因頻繁變異的重要因素。一、生物學性狀培養(yǎng)特性HIV感染的宿主范圍狹窄僅感染表面有CD4受體的細胞動物模型是恒河猴和黑猩猩癥狀與人的AIDS不同病毒抵抗力56℃30min室溫7天70%乙醇

0.2%次氯酸鈉

0.1%漂白粉

0.3%H2O2

0.5%來蘇

均可在5min內(nèi)滅活一、生物學性狀抵抗力與消毒抵抗力不強WHO的標準

100C20min

高壓蒸汽滅菌法20min

1、傳染源和傳播方式傳染源病毒存在的部位傳播方式

HIV無癥

狀攜帶者

AIDS患者血液

精液、陰道分泌物

乳汁

腦脊液

骨髓

中樞神經(jīng)組織

皮膚二、致病性與免疫性★2、致病機制TH細胞Mφ樹突狀

細胞皮膚朗格漢斯細胞CD4分子細胞侵入人體侵入人體侵犯CD4受體低表達細胞二、致病性與免疫性

×

×

×

×

細胞免疫功能低下，淋巴細胞數(shù)減少，CD4/CD8倒置，IV型超敏反應(yīng)減弱或消失，細胞增生反應(yīng)降低，細胞毒反應(yīng)下降。

細胞功能受損，攜帶HIV播散至全身。還可進一步影響體液免疫功能。2、致病機制二、致病性與免疫性臨床特點

*潛伏期長，大約10年左右。*臨床感染過程分為4個時期：

1.急性感染期：約2～3周

2.無癥狀潛伏期：10年左右

3.AIDS相關(guān)綜合征：開始出現(xiàn)癥狀

4.免疫缺陷期：典型AIDS期——合并機會致病菌感染和AIDS相關(guān)惡性腫瘤。二、致病性與免疫性臨床表現(xiàn)

四個階段，典型過程需要10年以上原發(fā)感染潛伏感染有癥狀感染典型AIDSAIDS相關(guān)綜合癥期

（AIDS-relatedcomplex,ARC）卡波氏肉瘤卡氏肺孢蟲肺炎白色念珠菌感染致病機制HIV對CD4+細胞的破壞病毒感染致免疫病理所引起的細胞損傷導致免疫系統(tǒng)功能的改變神經(jīng)細胞的損害HIV對CD4+細胞的破壞HIV對CD4+細胞的破壞病毒感染致免疫病理所引起的細胞損傷免疫系統(tǒng)功能的改變HIV感染后B細胞功能出現(xiàn)異常，表現(xiàn)為多克隆活化某些單核細胞和巨噬細胞亞群表達CD4分子，HIV可與之結(jié)合而進入細胞降低受感染者體內(nèi)的IL-2、

-IFN和其他細胞因子濃度神經(jīng)細胞的損害約有40%-90%的AIDS患者有不同程度神經(jīng)癥狀單核細胞釋放單核細胞因子，對神經(jīng)元有毒性，同時使炎性細胞當浸潤產(chǎn)成腦部組織損傷病毒免疫逃逸的機理CD4+T細胞大量減少，使整個免疫系統(tǒng)失效病毒基因整合位于染色體，使宿主細胞長期呈“無抗原”狀態(tài)病毒包膜蛋白高度變異性，逃逸免疫系統(tǒng)的識別

*細胞內(nèi)病毒的清除主要依靠細胞免疫反應(yīng)*細胞免疫可限制病毒感染，但不能完全清除病毒，并隨疾病進展而下降*病毒抗原頻繁變異逃避了免疫清除作用

免疫性二、致病性與免疫性微生物學診斷檢測抗體方法ELISARIAIFAWesternblot檢測RNAPCR篩選與驗證陽性者必須經(jīng)Westernblot驗證治療雞尾酒療法（HAART）聯(lián)合交替使用2種HIV逆轉(zhuǎn)酶抑制劑和一種蛋白抑制劑無法清除整合的病毒，不能徹底清除病毒藥物有副作用在中國年均費用8萬RMBHIV疫苗基因工程亞單位疫苗DNA疫苗重組活病毒載體疫苗蛋白包膜病毒樣顆粒*檢測病毒抗體：ELISA篩查，Western

blot確認*檢測病毒抗原：檢測HIVp24抗原早期輔助診斷

*檢測病毒核酸：定量RT-PCR*病毒分離：特征性細胞病變?yōu)槿诤霞毎?/p>

三、微生物學檢查法目的①AIDS的診斷；②指導抗病毒藥物的治療；③篩查和確認HIV感染者，以阻斷

HIV的傳播途徑。

1.治療HIV感染的藥物

*核苷類反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑（NRTIs）、非核苷類反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑（NNRTIs）、蛋白酶抑制劑（PIs），融合抑制劑（FI）。*高效抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療（highly

activeanti-retrovial

therapy,

HAART）。四、防治原則2.預防研制安全、有效的HIV疫苗，但目前尚無有效疫