熒光顯微鏡的幾種熒光光源

熒光顯微鏡的幾種熒光光源本文系小琪和中國(guó)顯微圖像網(wǎng)的原創(chuàng)文章，轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明！熒光顯微鏡是細(xì)胞生物學(xué)的基本工具。它是由光源、濾色片和光學(xué)系統(tǒng)等主要零件構(gòu)成。是利用必定波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光，經(jīng)過(guò)物鏡和目鏡系統(tǒng)放大察看標(biāo)本的熒光圖像而實(shí)現(xiàn)對(duì)熒光樣品的定性定量研究。激發(fā)、濾光、成像、淬滅，熒光實(shí)驗(yàn)的調(diào)整就是怎么才能協(xié)調(diào)好以上要素獲得最好的成效，一個(gè)常被忽略的方面是光源的使用，熒光顯微鏡的常用光源都是白光光源：高壓汞燈和氙燈，此刻還新出了金屬鹵素?zé)艉蚅ED。1、汞燈超高壓汞燈（50-200W），它是用石英玻璃制作，中間呈球形，內(nèi)充必定數(shù)目的汞，工作時(shí)由兩個(gè)電極間放電，惹起水銀蒸發(fā)，球內(nèi)氣壓快速高升，當(dāng)水銀完整蒸發(fā)時(shí)，可達(dá) 50?70個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓力，這一過(guò)程一般約需5?15min。超高壓汞燈的發(fā)光是電極間放電使水銀分子不停解離和復(fù)原過(guò)程中發(fā)射光量子的結(jié)果。它發(fā)射很強(qiáng)的紫外和藍(lán)紫光，足以激發(fā)各類熒光物質(zhì)，所以，為熒光顯微鏡廣泛采納。介紹產(chǎn)品：歐司朗50W，103W，200W汞燈，合用于各大廠家高端熒光顯微鏡；一般200小時(shí)壽命，最長(zhǎng)400小時(shí)。2、 氙燈氙燈和汞燈做為白光源，都能供給從紫外到近紅外一系列波長(zhǎng)的光，但它們卻有著不一樣的激發(fā)光譜。汞燈集中在近紫外、藍(lán)光以及綠光鄰近，這類在峰值的高激發(fā)能量保證產(chǎn)生光亮的熒光信號(hào)，但光毒性卻很強(qiáng)。所以，HBO用來(lái)對(duì)固定樣品或弱熒光成像。對(duì)比而言，氙燈光源的激發(fā)比較緩和，能夠用于不一樣波長(zhǎng)間強(qiáng)度的比較，比如用于鈣離子濃度丈量等。氙燈的強(qiáng)激發(fā)在近紅外800-1000nm。XBO較HBO的特色：1） 光譜強(qiáng)度更平均2） 在紅外及中紅外仍有較強(qiáng)光譜強(qiáng)度3） 能量較強(qiáng)更易抵達(dá)物鏡后孔徑介紹產(chǎn)品：XBO75W，100W氙燈；壽命一般400小時(shí)，1200小時(shí)3、 金屬鹵素?zé)暨@是最近幾年來(lái)出現(xiàn)的一種光源，它和汞燈的激發(fā)光譜很像，但它和顯微鏡以光纖相連，能散熱，壽命更長(zhǎng)。光纖從光源連到顯微鏡上，能夠大批減少光產(chǎn)生的熱能。金屬鹵素?zé)魧?duì)活細(xì)胞成像的另一個(gè)優(yōu)勢(shì)是內(nèi)置強(qiáng)度設(shè)計(jì)裝置，能夠簡(jiǎn)單調(diào)理激發(fā)光。介紹產(chǎn)品：EXPO企業(yè)X-cite光源，120W，合用于各大廠家高端熒光顯微鏡；壽命2500小時(shí)以上。4、近來(lái)，還出現(xiàn)了一種新的熒光光源： LED，這類光源的開(kāi)關(guān)在毫秒間，減少樣品在光照下的裸露時(shí)間，延伸壽命。另外，LED光的衰減即快又精準(zhǔn)，長(zhǎng)久活細(xì)胞試驗(yàn)下可大大減少光毒性。和白光對(duì)比， LED只是在一個(gè)較窄的光譜激發(fā)，多個(gè)LED波段使得LED光源能為多色熒光供給給用。介紹產(chǎn)品：蔡司