紫外可見分光光度計的原理及問題解決方案

紫外可見分光光度計的原理及問題解決方案一、 紫外可見分光光度計的誕生世界首臺紫外可見分光光度計誕生于1918年的美國國家標準局。后來紫外可見分光光度計經(jīng)不斷改進，又出現(xiàn)自動記錄、自動打印、數(shù)字顯示、微機控制等各種類型的儀器，使光度法的靈敏度和準確度也不斷提高，其應用范圍也在不斷擴大。紫外可見分光光度法從問世以來，在應用方面有了很大的發(fā)展，尤其是在相關學科發(fā)展的基礎上，促使分光光度計儀器的不斷創(chuàng)新，功能更加齊全，使得光度法的應用更拓寬了范圍。二、 紫外可見分光光度計的工作原理1紫外可見分光光度計基本工作原理和紅外光譜儀相似，利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機物質，引起分子中價電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜，反映了試樣的特征。2紫外可見光的范圍內，對于一個特定的波長，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因此測量光譜可以進行定性分析，而且根據(jù)吸收與已知濃度的標樣的比較，還能進行定量分析。三、 首次使用紫外可見分光光度計人員須知1首次使用紫外可見分光光度計的人員，一般來說，一定要詳細閱讀儀器安全操作手冊，否則嚴禁操作儀器。準備操作儀器前，需要先查看一下指針儀器在斷電的情況下，表面指針是否指向零刻度。如若不是，理應先調零然后才能連接電源。在使用的過程中，操作員應該盡量避免對鏡燈的觸碰，放大器使用過后，一定需要把檔位歸置到零。2除此之外，在操作紫外可見分光光度計時，操作人員需要留意一下機器的干燥劑，因為這是非常重要的。通常情況下，干燥劑有效時，儀器的工作是不會出現(xiàn)任何問題的。可是當干燥劑失效之后，所出現(xiàn)的問題是非常嚴重的。除了儀器上面顯數(shù)不準之外，很容易使反射鏡變得污穢，從而使得光線率不準確。因此，日常使用儀器時，一定要注意干燥是否有效。當發(fā)現(xiàn)失效后，要及時進行更換。四、分光光度計使用注意事項1紫外可見分光光度計在開機前將樣品室內的干燥劑取出，儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。2筆試PH計測定時，禁止將試劑或液體物質放在儀器的表面上，如有溶液溢出或其它原因將樣品槽弄臟，要盡可能及時清理干凈。3比色皿內溶液以皿高的2/3?4/5為宜，不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時應保持比色皿清潔，池壁上液滴應用擦鏡紙擦干，切勿用手捏透光面。測定紫外波長時，需選用石英比色皿。4實驗結束后將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干。關電源將干燥劑放入樣品室內，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理老師認可方可離開。五、紫外可見分光光度計出現(xiàn)問題處理方法1、 儀器電源接通后，光源不亮。原因：、光源燈泡已損壞。、保險管燒壞。處理方法：、更換氘燈或鎢燈。、更換保險管。2、 紫外可見分光光度計噪音較大。原因：光源燈泡使用時間超過壽命期。處理方法：更換光源燈泡。3、 自檢時提示波長自檢出錯。原因：自檢過程中可能打開過儀器樣品室的蓋子。處理方法：關上儀器樣品室蓋子，重新自檢。4、 儀器自檢時提示通訊錯誤。原因：儀器與電腦之間的數(shù)據(jù)線沒有連接好。處理方法：連接好數(shù)據(jù)線，重新打開儀器和軟件，重新自檢。5、 儀器零點飄忽不定，主要反映在簡易儀器上。原因：在簡易儀器中，零點往往是通過電位器來調整，這種電位器一般是炭膜電阻制作的，使用久了往往造成接觸不良。處理方法：更換電位器。6、 在使用過程中，出現(xiàn)數(shù)字顯示不能歸零，同時伴有圖線記錄基線位置偏高。原因：、光電倍增等老化，性能降低。、信號處理板可能發(fā)生故障。、前置放大版出現(xiàn)故障，引起反饋量增大處理方法：、開機通電，先做記錄故障曲線，再與原始記錄的標準曲線對照，找出異同點，并作一下定性定能分析。然后用一只同型號規(guī)格的新光電倍增管替換機上的光電管，再開機實驗，結果記錄出來的圖線并沒有什么變化，由此證明光電倍增管沒有老化變質。、進一步檢查信號處理板，未發(fā)現(xiàn)信號處理板各元器件損壞，對影響靈敏度有關的電位器檢測，結果測得數(shù)據(jù)正常，這說明信號處理板沒有故障。7、 測試過程中提示能量太低。原因：①、光源燈泡使用時間超過壽命期。②、樣池中有不透光的東西擋住了光。處理方法：、更換光源燈。、拿走擋光的物品。8、 吸光值結果出現(xiàn)負值（最常見）。原因：沒做空白記憶、樣品的吸光值小于空白參比液。處理方法：做空白記憶、調換參比液或用參比液配置樣品溶液。9、 當儀器波長固定在某個波長下時，吸光值信號上下擺動，特別是測量模式轉換為按鍵開關式的簡易儀器。原因：開關觸點因長期氧化所致造成接觸不良。處理方法：用金屬活化劑清洗按鍵觸點即可。10、 樣品信號重現(xiàn)性不良原因