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氨基酸鋅螯合物的合成及其在肉雞飼喂中的應(yīng)用
0微量元素和氨基酸aa雞的添加量對飼料品質(zhì)的影響鈣是動物和人類所必需的養(yǎng)分含量。它具有許多重要的生理和營養(yǎng)功能。還參與多種酶的合成和激活,促進動物生長發(fā)育,增強機體抗感染能力,加快創(chuàng)傷組織的愈合,影響味覺和食欲,促進和維護性機能等。鋅的缺乏或不足,會導(dǎo)致食欲下降、生長遲緩、免疫力下降、皮膚損壞、生殖機能受損和死亡率上升。氨基酸是動物和人所必需的營養(yǎng)成分。蛋氨酸在動物體內(nèi)代謝過程中對腎上腺素合成膽堿和抗脂肪肝有一定的作用,有保肝、解毒功能。動物缺乏蛋氨酸,會出現(xiàn)發(fā)育不良、肌肉萎縮、體重減輕、皮毛變質(zhì)、肝和腎功能減弱等癥狀。故鋅和氨基酸是食品和飼料中的必需添加成分。如何提高添加微量元素和氨基酸的利用率是近10多年來的研究熱點。自美國Albien實驗室研究出微量元素氨基酸螯合物用作飼料添加劑以來,已有了非常顯著的效果。本實驗研究了化學(xué)合成蛋氨酸鋅螯合物的較佳方法和條件,并用合成產(chǎn)品和外購氨基酸螯合物為有機鋅源,硫酸鋅為礦物鋅源,分別對AA肉雞進行飼養(yǎng)對比試驗,以期對不同鋅源的生物學(xué)效價和飼養(yǎng)價值進行初步估價。結(jié)果顯示,與市售蛋氨酸鋅螯合物和硫酸鋅相比,合成的蛋氨酸鋅螯合物有較好的生物學(xué)利用率。1實驗部分1.1brumerq-ir蛋氨酸、硫酸鋅、氫氧化鈉及其他試劑均為分析純。市售蛋氨酸鋅(廣東某飼料公司生產(chǎn))。1日齡商品代AA(ArborAcres)肉用仔雞56羽。BrukerEquinoxFT-IR光譜儀;HP3510型原子吸收光譜儀。1.2反應(yīng)體系ph值硫酸鋅和蛋氨酸按摩爾系數(shù)比進行反應(yīng)。稱取0.1mol硫酸鋅和0.2mol蛋氨酸置于三頸瓶中,用100ml蒸餾水溶解。加入氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)體系的pH值在6~7之間。三頸瓶的一口裝一盛有氫氧化鈉溶液的滴液漏斗;另一口裝上球型冷凝管,加熱回流。在反應(yīng)過程中,以適當(dāng)?shù)乃俣鹊渭託溲趸c溶液以保持體系的pH值在6~7之間?;亓?0min后,螯合反應(yīng)完成。停止加熱、冷卻,使結(jié)晶析出。抽濾,母液轉(zhuǎn)入燒杯中。蒸發(fā)掉部分溶劑,冷卻。濾集析出的晶體。合并結(jié)晶產(chǎn)品,用10ml蒸餾水洗滌3次。干燥,得白色結(jié)晶物33.1g,產(chǎn)率92%。蛋氨酸鋅螯合物在空氣中的性質(zhì)很穩(wěn)定,不吸潮,易粉粹。1.3全隨機單因子設(shè)計法1~7日齡為預(yù)試期。在預(yù)試期內(nèi),飼喂購自市場的肉用仔雞全價顆粒料1周。7~21日齡為試驗期。在第7d,按照完全隨機單因子設(shè)計法,選擇發(fā)育良好、健康活潑、體重均勻的仔雞將雞分為兩組,每組4個水平(每個水平8羽,雌雄各半)。每水平占1籠(面積1m2)。每組分別添加外購的蛋氨酸鋅(飼料添加劑)和自制蛋氨酸鋅螯合物。每個水平在基礎(chǔ)日糧中分別添加0,15,30,40mg/kg的鋅。采用人工投料,自由采食,自由飲水的方式喂養(yǎng)。1.4測試指標(biāo)和方法(1)消耗耗料量=投料量-剩余量。(2)日本的嚴重混亂日增重=總增重÷試驗天數(shù)。=(末重-初重)÷試驗天數(shù)。(3)粗灰灰質(zhì)量分數(shù)的測定脛骨樣本的制備:實驗結(jié)束時,每個水平組選取體重接近的公、母雞各1只屠宰,剝?nèi)∮彝让劰怯谜麴s水沖洗。先于100℃通風(fēng)12h,然后用乙醚洗脫脂肪,即得灰分樣本。在電爐上緩慢碳化,至無煙時移入馬福爐內(nèi)于550~600℃灼燒24h。冷卻30min后稱重,得粗灰分重。并由下式計算粗灰分的質(zhì)量分數(shù)。粗灰分=粗灰分重÷樣品重×100%。(4)粗灰灰灰液ld50脛骨中鋅的總量用原子吸收光度法(AAS)測定。先用分析純ZnSO4·7H2O配制一系列標(biāo)準液(0.6~1.2mg/ml),測定其吸光度并繪制出曲線。稱取各水平組粗灰分樣品約0.1g,用5ml6mol/LHCl加熱至完全溶解。冷卻,轉(zhuǎn)移到50ml容量瓶中,定容、搖勻。在同樣條件下測定其吸光度。由工作曲線求出每一水平灰分對應(yīng)的鋅濃度,再計算出灰分中鋅的總量。脛骨中鋅的總量=脛骨中鋅的總量=灰分中鋅的質(zhì)量分數(shù)×灰分重量×1000=[樣品液質(zhì)量濃度×50÷樣品重]×灰分重。2結(jié)果與討論2.1體系ph值對產(chǎn)率的影響在實驗中發(fā)現(xiàn),氨基酸和金屬離子發(fā)生螯合反應(yīng)時,pH值是影響反應(yīng)的重要因素。當(dāng)pH值為5.74時,為蛋氨酸的等電點,假若體系在此pH值的條件下反應(yīng)時有部分蛋氨酸的白色沉淀生成。pH值較高時,由于Mx(OH)y的生成也不利于螯合物的產(chǎn)生,所以在螯合過程中應(yīng)使體系的pH值一直控制在6~7之間最為有利。但在反應(yīng)過程中由于羧基的氧參加螯合使其H+不斷地釋放出來,結(jié)果體系的pH值降低,如在反應(yīng)過程中不添加氫氧化鈉溶液,反應(yīng)產(chǎn)物中就有部分的蛋氨酸沉淀生成,從而螯合產(chǎn)率下降。文獻上報道的合成方法,一般是在反應(yīng)前將pH值調(diào)到所需要的范圍。本實驗中采取隨時調(diào)節(jié)體系的pH值,改進了合成條件,提高了螯合產(chǎn)率。通過肉雞的生物效價實驗證明了這一結(jié)果。2.2用氨基酸鋅螯合物met-zn飼料用上述條件下合成的蛋氨酸鋅(Met-Zn)與無機鋅源硫酸鋅、外購Met-Zn的肉雞飼養(yǎng)對比實驗及分析結(jié)果分別列于表1~3中。表3中的數(shù)據(jù)通過采用線性回歸分析法得到。從表1~3可以看出,采用自制蛋氨酸鋅螯合物作有機鋅源補鋅添加劑,與無機礦物鋅源——硫酸鋅相比較,料肉比指標(biāo)下降了。添加了蛋氨酸鋅螯合物后,對灰分重、鋅含量和日增重這3項指標(biāo)影響顯著。根據(jù)粗灰分重、鋅含量和日增重的指標(biāo),蛋氨酸螯合物的生物學(xué)利用率比無機鋅分別提高了129.1%,46.9%和79%,比外購Met-Zn添加劑分別提高了143%,55.3%和33.6%。本實驗結(jié)果表明,用改進合成法自制的氨基酸鋅螯合物飼喂AA肉雞,能有效地促進雞的生長發(fā)育,更有利于鋅在動物體內(nèi)的沉積。就飼喂的鋅含量水平而言,在用硫酸鋅
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