細(xì)菌感染的檢查方法與法治原則

支原體、衣原體、立克次體

主講老師：江振友

編輯ppt支原體屬和脲原體屬

編輯ppt支原體〔Mycoplasma〕1.能在人工培養(yǎng)基中生長(zhǎng)2.能獨(dú)立生活3.最小原核細(xì)胞型微生物4.無(wú)細(xì)胞壁5.二分裂繁殖6.多形態(tài)性,“油煎蛋樣〞菌落編輯ppt分類柔膜體綱(Mollicutes)支原體目(MycoPlasmatales)下分3個(gè)科：①支原體科〔MycoPlasmataceae〕；2個(gè)屬:支原體〔Mycoplasma〕脲原體〔Ureaplasma〕②無(wú)膽甾原體科〔Acholeplasma-taceae〕，生長(zhǎng)時(shí)不需要外源性膽固醇；③螺原體科〔Spiroplasmataceae〕，生長(zhǎng)至一定階段呈螺形。編輯ppt人體別離:20種，其中8種是致病或條件致病菌:肺炎支原體(M.pneumoniae,Mpn)生殖支原體(M.geuitalium,Mg)人型支原體(M.hominis,Mh)發(fā)酵支原體(M.fermentants,Mf)穿透支原體(M.penetrans,Mpe)梨支原體(M.pirum,Mpi)關(guān)節(jié)炎支原體(M.arthritidis,Mart)解脲脲原體(U.urealyticum,Uu)編輯ppt支原體與細(xì)菌L型比較性狀支原體細(xì)菌L型濾過(guò)性有有細(xì)胞壁無(wú)無(wú)油煎蛋狀菌落形成形成對(duì)青霉素抵抗抵抗對(duì)膽固醇需要生長(zhǎng)需要不一定需要來(lái)源自然界、人與動(dòng)物由細(xì)菌在環(huán)境條件下誘導(dǎo)形成回復(fù)變成細(xì)菌不能能遺傳性與細(xì)菌無(wú)關(guān)與原細(xì)菌相同編輯ppt肺炎支原體形態(tài)與結(jié)構(gòu)

大小:可通過(guò)濾器,光鏡下可觀察細(xì)胞壁:無(wú)形態(tài):球形、球桿形、分枝絲狀或念珠狀等細(xì)胞膜:三層:1.蛋白質(zhì)2.脂質(zhì)(膽固醇較多)3.蛋白質(zhì)染色:姬姆薩染色法:淡紫色或藍(lán)色核酸:二種(DNA和RNA)編輯ppt編輯ppt編輯ppt生長(zhǎng)繁殖繁殖方式:二分裂方式球體延伸、分節(jié)斷裂、出芽、分枝繁殖周期:3小時(shí)營(yíng)養(yǎng)要求:較高,含動(dòng)物血清、酵母浸液酸堿度:pH7.8～8．0氣體環(huán)境:5％CO2或5％CO2與95％N2溫度與時(shí)間:37℃,3d～10d菌落特征:“油煎蛋〞狀菌落編輯ppt編輯ppt表25—2支原體與脲原體的某些生物學(xué)特性

編輯ppt抗原構(gòu)造主要抗原成分:1.蛋白質(zhì)P1蛋白抗原:外表抗原致病:粘附2.脂質(zhì)中的糖脂抗體:產(chǎn)生補(bǔ)體結(jié)合抗體生長(zhǎng)抑制抗體代謝抑制抗體編輯ppt抵抗力理化因素:比細(xì)菌敏感(因無(wú)細(xì)胞壁)熱:弱,50℃經(jīng)30min死亡－20℃可長(zhǎng)期保存耐堿酸和有機(jī)溶劑:較敏感(消毒劑、清潔劑)四環(huán)素族、紅霉素、卡那霉素、氯霉素:敏感青霉素:不敏感編輯ppt致病性外源性感染上呼吸道感染:感冒、咽炎、氣管炎支原體性肺炎〔Mycoplasmalpneumonia〕(原發(fā)性非典型肺炎)〔primaryatypicalpneumonia〕臨床表現(xiàn)和胸部X線:肺炎鏈球菌引起的典型肺炎不同類似病毒性肺炎編輯ppt世界各地,密集人群,兒童及青少年多見(jiàn)秋冬季發(fā)病率高,每隔3～5年出現(xiàn)一次流行飛沫傳播潛伏期2W～3W,感染起病緩慢臨床主要病癥:發(fā)熱〔約39℃〕、頭痛、持續(xù)性頑固咳嗽、胸痛等。病人帶菌、排菌狀態(tài)可持續(xù)6W～8W肺外合并癥〔神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)及心臟等〕發(fā)病率高，嚴(yán)重者可致死致病性:粘附是先決條件也和超敏反響有關(guān)(共同抗原)編輯ppt免疫性抗體：多種(CF抗體、生長(zhǎng)抑制抗體、殺支原體抗體等)呼吸道sIgA:有一定作用非特異冷凝集素:1.和自身免疫有關(guān)2.患者陽(yáng)性率為50％，常用于輔助診斷。

編輯ppt微生物學(xué)檢查法病原別離特異核酸的檢測(cè)血清學(xué)診斷抗原檢測(cè)冷凝集試驗(yàn)編輯ppt病原別離標(biāo)本：咽拭子或痰液培養(yǎng)基：雙相培養(yǎng)基〔含馬血清、酵母浸液〕SP-4培養(yǎng)基〔提高別離率30％～40％〕氣體環(huán)境：5％～10％CO2溫度與時(shí)間：37℃，l～2W可疑菌落：1.糖發(fā)酵2.溶血性3.血細(xì)胞吸附4.特異抗血清生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)等編輯ppt特異核酸的檢測(cè)〔1〕聚合酶鏈反響(PCR)：優(yōu)點(diǎn)：特異性好敏感性高快速、簡(jiǎn)便靶基因：16SRNA基因P1蛋白基因方法：套式PCR(nPCR)復(fù)合PCR限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析(RFLP)隨機(jī)引物PCR(RAPD)〔2〕基因探針根據(jù)堿基嚴(yán)格互補(bǔ)配對(duì)的特性特異性強(qiáng)，敏感性不如PCR技術(shù)編輯ppt血清學(xué)診斷

〔1〕補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)〔CFT〕：雙份抗體效價(jià)升高4倍以上診斷〔2〕間接血凝試驗(yàn)〔IHA〕：測(cè)抗體,2—3周頂峰〔3〕酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)：測(cè)IgM、IgG和IgA敏感性高〔4〕間接免疫熒光試驗(yàn)：檢測(cè)IgM、IgG特異性較強(qiáng)編輯ppt抗原檢測(cè)

方法1:間接法或直接法抗體:熒光標(biāo)記多克隆抗體或單克隆抗體檢測(cè)標(biāo)本:呼吸道分泌物中抗原86%可陽(yáng)性方法2:雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)本:呼吸道分泌物中抗原可檢出105CFU/ml方法3:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)捕獲法抗體:抗P1單克隆抗體檢測(cè)標(biāo)本:P1蛋白可檢出104CFU/ml特異性強(qiáng),3小時(shí)即可編輯ppt冷凝集試驗(yàn)輔助診斷非典型肺炎針對(duì)紅細(xì)胞膜Ⅰ抗原冷凝集素屬IgM5d～10d出現(xiàn)，2W～3W頂峰輔助診斷效價(jià):64～128倍以上雙份效價(jià)升高4倍以上特異性和敏感性較低編輯ppt防冶藥物:四環(huán)素類(近年來(lái)耐藥性增加)大環(huán)內(nèi)酯類:首選(紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素)喹諾酮類疫苗:減毒活疫苗基因工程疫苗編輯ppt其它支原體寄生部位:鼻咽腔及泌尿生殖道粘膜屬于正常菌群,引起條件性感染口腔支原體:慢性呼吸道感染唾液支原體:齒槽溢膿生殖支原體:生殖道、呼吸道和關(guān)節(jié)腔的炎癥,流產(chǎn)、早產(chǎn)和新生兒肺炎發(fā)酵支原體:類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎AIDS相關(guān)(別離率明顯升高)人型支原體:滲出性咽炎、非淋菌性尿道炎(nongonococcalurithritis,NGU),卵巢膿腫、產(chǎn)褥敗血癥編輯ppt脲原體屬(Ureaplasma)從支原體分出的獨(dú)立的新屬正常菌群:絕大多數(shù)有致病性:解脲脲原體〔U.urealyticum,Uu)1954年從NGU患者的病灶處別離類似肺炎支原體能水解尿素編輯ppt生物學(xué)性狀

形態(tài):圓形或球桿狀染色:革蘭染色陰性溫度和酸堿度:37℃,pH6.0菌落:很小(15μm～60μm,放大200倍),稱T株〔Tinycolonystrain〕敏感性:敏感:四環(huán)素、氯霉素、慶大霉素、卡那霉素、0.05%醋酸鉈、125μg/ml5-碘-2’脫氧尿苷不敏感:青霉素生化特性:水解尿素產(chǎn)氨編輯ppt編輯ppt致病性

存在:人和動(dòng)物的口腔、呼吸道、泌尿生殖道血清型:解脲脲原體(Uu)有14個(gè)血清型傳播途徑:性接觸傳播、母嬰傳播所致疾病(STD)泌尿生殖道感染:NGU、盆腔感染、宮頸炎、陰道炎、輸卵管炎、慢性前列腺炎、附睪炎、男女不孕癥、反復(fù)流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎新生兒疾病:呼吸道病變、肺炎、腦膜炎編輯ppt引起男性不孕的原因：①Uu吸附于精子外表，使其運(yùn)動(dòng)受阻，并蔽蓋了精子識(shí)別卵細(xì)胞的部位②Uu產(chǎn)生神經(jīng)氨酸樣物質(zhì)，干擾精子與卵細(xì)胞結(jié)合。③Uu與精子膜有共同抗原，從而產(chǎn)生抗精子抗體編輯ppt

立克次體屬和巴爾通體屬

編輯ppt立克次體屬立克次體特征：①比細(xì)菌小,能通過(guò)濾器,光鏡可見(jiàn)②以節(jié)肢動(dòng)物為傳播媒介,有儲(chǔ)存宿主③專性細(xì)胞內(nèi)寄生(胞漿內(nèi)),原核細(xì)胞微生物④二分裂繁殖⑤有兩種核酸(DNA和RNA)，酶系統(tǒng)不完整⑥多數(shù)人畜共患⑦對(duì)抗生素敏感所致疾病:發(fā)熱出疹性疾病對(duì)人致病的:立克次體屬東方次體屬埃立克體屬柯克斯體屬編輯ppt立克次體分類及其致病情況見(jiàn)表26-1

編輯ppt生物學(xué)性狀大小:(0.3μm-0.6μm)×(0.8μm-2.0μm)形態(tài):類似球桿菌,多形性(球形、啞鈴形、長(zhǎng)桿狀或絲狀等)染色:Giemsa染色法:紫色或藍(lán)色

馬氏染色法(Macchiavellostain):紅色排列:散在于細(xì)胞漿中、核旁成堆(斑點(diǎn)熱立克次體在胞漿或核內(nèi))培養(yǎng):專性細(xì)胞內(nèi)(活細(xì)胞內(nèi))寄生培養(yǎng)方法:雞胚卵黃囊內(nèi)接種組織細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物接種編輯ppt抵抗力:熱、消毒劑:較弱(56℃,數(shù)分鐘,0.5%石碳酸、0.5%來(lái)蘇,75%酒精中數(shù)分鐘)抗生素:敏感:氯霉素和四環(huán)素不敏感:磺胺類低溫、枯燥:較強(qiáng)(-20℃或冷凍枯燥半年以上)抗原構(gòu)造：群特異性抗原,種特異性外膜抗原外斐反響(Weil-Felixreaction):斑疹傷寒等立克次體與變形桿菌某些X菌株有共同的耐熱多糖類抗原。利用這些變形桿菌菌株代替立克次體抗原，進(jìn)行定量非特異凝集反響〔交叉凝集反響〕，以檢測(cè)人或動(dòng)物血清中的相應(yīng)抗體。協(xié)助診斷斑疹傷寒,恙蟲病,滴度超過(guò)1:160有意義.編輯ppt致病性傳播方式：普氏立克次體：頭虱和體虱〔腸上皮細(xì)胞〕人是唯一宿主斑點(diǎn)熱立克次體：第一宿主是蜱〔唾液腺〕第二宿主是嚙齒類動(dòng)物編輯ppt致病機(jī)理

過(guò)程:侵入->小血管內(nèi)皮細(xì)胞中繁殖->破壞細(xì)胞->細(xì)胞腫脹、浸潤(rùn)、堵塞血管腔形成血栓->皮膚:斑疹->實(shí)質(zhì)器官:相應(yīng)臨床表現(xiàn)

毒性物質(zhì):內(nèi)毒素

磷脂酶A編輯ppt所致疾病1.流行性斑疹傷寒(epidimictyphus)不屬于人畜共患病病原體:普氏立克次體(R.prowazekii)媒介:人虱宿主:人季節(jié):冬春季病癥:5～21d潛伏期->高熱、頭痛、肌肉痛等->4～5d:皮疹->神經(jīng)、心血管和其他器官病后免疫:持久,與地方性斑疹傷寒有交叉免疫編輯ppt2.地方性斑疹傷寒(endemictyphus)

(鼠型斑疹傷寒)

屬于人畜共患病病原體:斑疹傷寒立克次體(R.typhus)宿主:鼠為天然貯存宿主傳播方式:鼠蚤或虱->鼠間->人->人虱->人疾病:較輕，緩慢，持續(xù)時(shí)間短，很少侵害中樞神經(jīng)系統(tǒng)病后免疫:持久，并與流行性斑疹傷寒有交叉免疫

編輯ppt3.恙蟲病(scrubtyphus)

病原體:恙蟲病東方次體(O.tsutsuganushi)傳播:寄生于恙螨體內(nèi)，可經(jīng)卵傳代。人假設(shè)進(jìn)入恙螨的孳生地，可能受感染(亦稱“叢林熱〞)病癥:10～14d潛伏期->突然高熱，被叮咬處:發(fā)紅,丘疹,水皰,潰瘍，周圍紅暈，上有黑色痂皮，稱為焦痂(特征)。附近的淋巴結(jié)腫大，皮疹。治療拖延肺炎、腦炎、DIC。編輯ppt微生物學(xué)檢查法

(一)血清學(xué)診斷1.外斐反響(非特異性)診斷:立克次體和東方次體效價(jià)在1：160以上，或病程中效價(jià)增長(zhǎng)2.補(bǔ)體結(jié)合(CF)反響(特異性)所用抗原:可溶性抗原(群特異抗原)洗滌過(guò)的顆?？乖?種特異抗原)診斷:斑疹傷寒群、斑點(diǎn)熱群、恙蟲病、Q熱(二)立克次體別離鑒定動(dòng)物:小鼠(恙蟲病)雄性豚鼠(斑疹傷寒)編輯ppt防治原那么1.滅虱、滅蚤、滅鼠2.改進(jìn)環(huán)境、個(gè)人衛(wèi)生3.死疫苗4.廣譜抗生素有效編輯ppt巴爾通體屬(Bartonella)

特點(diǎn):1.形態(tài)結(jié)構(gòu)與立克次體相似2.可以人工培養(yǎng)而非嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生模式種:桿狀巴爾通體(B.bacilliformis)編輯ppt生物學(xué)性狀

形狀:1.血涂片:球形、橢圓形或弓形桿狀；單個(gè)或成群,偶見(jiàn)鏈狀2.組織中:內(nèi)皮細(xì)胞原漿中,單體或圓形團(tuán)塊，G-，常用Giemsa或鍍銀染色法。3.培養(yǎng)中:單鞭毛培養(yǎng)條件:1.需氧2.常用10%兔血清和0.5%血紅蛋白的半固體培養(yǎng)基3.可在無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)基中生長(zhǎng)4.28℃-37℃,10d以上編輯ppt致病性

自然宿主:人媒介:節(jié)肢動(dòng)物〔疣腫白蛉〕所致疾病:1.奧羅亞熱-秘魯疣(Oroyafever-verrucaperuviana)病原體:桿狀巴爾通體階段:第1階段:發(fā)熱，貧血(奧羅亞熱)第2階段:以血管損害為根底的肉芽腫(秘魯疣)診斷方法:1.血涂片2.用半固體培養(yǎng)基別離培養(yǎng)

編輯ppt2.細(xì)菌性血管瘤(bacillaryangiomatosis)病原體:亨氏巴爾通體(B.henselae)羅卡利馬巴爾通體(B.rochalimaea)易感人群:免疫力低下〔尤其AIDS〕病變組織學(xué)特征:毛細(xì)血管增生等(血管瘤)培養(yǎng)基:巧克力色瓊脂含5%兔血的心腦浸汁瓊脂3.貓抓病(cat-scratchdisease)(貓抓熱)病原體:亨氏巴爾通體病癥:貓抓傷后2w,發(fā)熱,淋巴結(jié)腫大，破潰排膿，亦可頭痛、咽痛或出現(xiàn)結(jié)膜炎特點(diǎn):自限性疾病檢查法:病變組織切片鍍銀染色免疫熒光染色編輯ppt

衣原體屬

編輯ppt衣原體〔Chamydia〕特點(diǎn):1.能通過(guò)細(xì)菌濾器,光鏡下可觀察2.有獨(dú)特發(fā)育周期3.不能人工培養(yǎng),不能獨(dú)立生活,

為專性細(xì)胞內(nèi)寄生4.原核細(xì)胞型和病毒的區(qū)別:

⑴有細(xì)胞結(jié)構(gòu)⑵細(xì)胞壁類似G-⑶兩種類型的核酸(DNA和RNA)⑷有核糖體⑸以二分裂方式繁殖,有獨(dú)特的發(fā)育周期⑹對(duì)多種抗生素敏感(四環(huán)素和紅霉素)編輯ppt分類存在:人類、哺乳動(dòng)物及禽類體內(nèi)分類依據(jù):1.抗原構(gòu)造2.包涵體糖原的有無(wú)3.對(duì)磺胺類藥物的敏感性分類(4個(gè)種):1.沙眼衣原體〔C.trachomatis〕〔人〕亞種〔1〕沙眼生物變種〔Biovartrachoma〕14個(gè)血清型〔2〕性病淋巴肉芽腫變種(Biovarlymphogranunlomavenereum,LGV)4個(gè)血清型〔3〕鼠生物變種〔Biovarmouse〕2.鸚鵡熱衣原體〔C.psittaci〕〔人〕3.肺炎衣原體〔C.pneumonia〕〔人〕4.家畜衣原體(C.pecorum)編輯ppt表27-13種致病性衣原體的比較編輯ppt生物學(xué)性狀生活周期包括原體和始體兩階段光鏡下：兩種形態(tài)：原體〔elementarybody〕始體〔initialbody〕原體〔elementarybody〕1.形狀：球形，0.2～0.4μm電鏡下：核質(zhì)致密和少量核糖體細(xì)胞壁堅(jiān)韌存在于細(xì)胞外2.功能:〔1〕有很強(qiáng)的感染性〔吸附〕〔2〕發(fā)育成始體：吸附->被吞噬->胞膜在原體周圍形成空泡->原體在空泡中增大->始體編輯ppt始體〔initialbody〕1.形狀：球形，較原體大(0.8～1.5μm)，無(wú)致密核質(zhì)，有纖細(xì)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)---也稱為網(wǎng)狀體〔reticulatebody〕2.發(fā)育周期:原體->->始體->空泡內(nèi)->二分裂->子代原體->包涵體〔inclusionbody〕->原體成熟->釋放->再感染(24～48h)(無(wú)細(xì)胞外周期)3.是繁殖型，無(wú)感染性染色：1.Macchiavello染色法或Giemsa染色法原體：紅色或紫色始體：深藍(lán)色2.碘染色法：沙眼衣原體原體：褐色〔因包涵體含糖原〕編輯ppt編輯ppt編輯ppt培養(yǎng)

方法：1.雞胚卵黃囊2.各種傳代細(xì)胞(Hela細(xì)胞,McCog細(xì)胞)3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：某些可感染小鼠

培養(yǎng)時(shí)間：48～72h后觀察：包涵體原體顆粒始體顆粒編輯ppt抗原構(gòu)造

1．屬特異性抗原成分：脂多糖方法：CF試驗(yàn)和IF法2．種特異性抗原成分：外膜蛋白〔MOMP〕方法：IF法和中和試驗(yàn)(NT)3．血清型特異性抗原成分：MOMP方法：?jiǎn)慰寺】贵w微量免疫試驗(yàn)血清型:(1)沙眼生物變種:14個(gè)〔A-K、Ba、Da,Ia〕(2)LGV:4個(gè)(L1、L2、L2a和L3)編輯ppt抵抗力

熱:敏感，60℃10min或37℃48h寒冷：-50℃數(shù)年化學(xué)消毒劑：0.5%石炭酸，24h75%乙醇，半分鐘抗生素：利福平、四環(huán)素、紅霉素、磺胺敏感

青霉素:不敏感編輯ppt致病機(jī)理

致病物質(zhì)：內(nèi)毒素相似的物質(zhì)致病機(jī)理：1.抑制細(xì)胞代謝，使細(xì)胞溶解2.引起超敏反響3.形成肉芽腫傳播途徑：眼－眼眼－手－眼性接觸傳播